• 제목/요약/키워드: Neutral protease

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담배잎의 노화과정에 따른 단백질의 생화학적 변화 (Biochemical Changes of Protein during the Senescence of Tobacco Leaf)

  • 이상각;심상인;강병화
    • 한국작물학회지
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    • 제41권5호
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    • pp.563-568
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    • 1996
  • 담배 생육단계별 RNA, protease 활성도와 단백질 패턴의 변화를 파악하여 노화가 진행되는 과정에서 생리 ㆍ생화학적인 변화의 기초자료를 얻고자 본 실험을 수행하였으며 결과는 다음과 같다. 가용성 단백질 함량은 출엽 후 15일까지 증가하여 출엽 후 35일까지 일정하게 유지하였다. 총 RNA 함량은 출엽 후 15일에 가장 높았으며 출엽후 30일까지 급격한 감소를 보였다. Protease 활성 변화는 중성 protease (pH 7.8)가 활성이 높았으며 노화말기인 출엽 후 50일부터 갑자기 증가하였다. 전기영동 패턴은 큰 변화가 없었으나 61.0kd의 polypeptide은 출엽 후 35일부터 생성되어 노화말기까지 증가하였다.

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Calpain protease에 의한 cyclin D3의 post-translation조절 (Calpain Protease-dependent Post-translational Regulation of Cyclin D3)

  • 황원덕;최영현
    • 생명과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.1-7
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    • 2015
  • 칼슘 의존적으로 활성화되는 neutral protease calpain에 의한 단백질 분해는 세포의 성장을 조절하는데 중요한 단백질들의 역할에 매우 중요한 역할을 한다. Cyclin의 분해는 세포주기의 진행을 위한 필연적인 과정이다. D-type cyclins는 외부자극이나 신호에 의하여 세포주기의 G1 초기에 합성이 된 후 cyclin-dependent kinases (cdk4 및 cdk6)와의 결합하여 세포주기 S기 진입을 촉진하는 역할을 한다. 본 연구에서는 cyclin D3 단백질이 calpain protease에 의하여 번역 후 수준에서 조절 받고 있음을 제시하였다. 본 실험의 조건에서 lovastatin과 actinomycin D가 처리된 PC-3-M 전립선 암세포에서 cyclin D3 단백질의 발현이 완전히 사라졌지만, calpain inhibitor인 LLnL의 처리에 의하여 정상 수준으로 회복되었음을 알 수 있었다. 그러나 26S proteasome의 선택적 억제제인 lactacystin, lysosome 억제제인 ammonium chloride 및 chloroquine, serine protease 억제제인 PMSF는 동일 조건에서 lovastatin과 actinomycin D 처리에 의한 cyclin D3 단백질의 발현저하를 억제하지는 못하였다. In vitro 조건에서 순수 분리된 calpain은 cyclin D3 단백질을 칼슘 농도 의존적으로 분해하였으며, cyclin D3 단백질의 반감기는 LLnL 처리에 의하여 매우 유의적으로 증가되었다. 또한 calpain 저해인자인 calpastatin의 과발현은 PC-3-M 세포에서 뿐만 아니라 NIH 3T3 섬유아세포에서도 cyclin D3 단백질의 반감기 및 안전성을 증대시켰다. 이러한 결과는 cyclin D3 단백질이 칼슘에 의해 활성화 되는 protease calpain에 의해 조절됨을 보여주는 것이다.

다시마를 첨가한 고추장의 숙성 중 효소활성 변화 (Changes of Enzyme Activities in Kochujang Added Sea Tangle Powder During Fermentation)

  • 배태진;김경은;최옥수;김해섭;강동수;김귀식
    • 생명과학회지
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    • 제11권5호
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    • pp.393-399
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    • 2001
  • 우리나라의 전통 발효식품의 고추장의 관능성 및 기능성을 증가시키기 위하여 전분질 원료인 찹쌀무게에 대하여 2%, 4%, 6% 및 8%의 다시마 분말을 첨가한 후 대조구와 함께 3$0^{\circ}C$에서 120일간 숙성시키면서 세균수와 효소활성을 검토하였다. 고추장의 세균수는 숙성 초기 $10^4$ cfu/g 수준에서 출발하여 숙성 30일에는 $10^{6}$ cfu/g의 수준을 나타내었고, 60일 이후에는 $10^{8}$ cfu/g의 수준을 유지하여 후반동안 $10^{8}$ cfu/g을 유지하였는데 다시마의 첨가 구별 차이는 없었고 미생물의 생육에 큰 영향을 미치지는 않았다. 효소활성의 경우 액화효소인 $\alpha$-amylase의 활성은 서서히 감소하여 숙성 후에는 효소의 활성이 거의 실활되었고 당화효소인 $\beta$-amyase의 활성은 숙성 30일까지 큰 폭으로 증가했다가 숙성 60일에 급격히 감소하였으며, 전반적으로 대조고추장에 비하여 다시마 고추장의 $\beta$-amylase의 활성이 약간 높게 나타났다. 단백질 분해효소인 acid protease 및 neutral protease의 활성은 숙성 30일까지는 증가하였으나 그 이후에는 불규칙적인 증감현상을 보이며 120일까지 감소하였다.

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Rhizopus japonicus T2에 의한 밀가루 누룩 제조시 Amylase와 Protease의 생산조건 (Conditions for the Production of Amylase and Protease in Making Wheat flour Nuluk by Rhizopus japonicas T2)

  • 소명환
    • 한국식품영양학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.96-102
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    • 1993
  • A Nuluk, a Korean traditional koji for brewing, was made with wheat flour and Rhizopus japonicus T2 which had a good aroma and strong abilities in producing saccharogenic and proteolytic enzymes, and cultural conditions for the production of those two enzymes were tested. The productivity of saccharogenic enzyme was markedly improved when Nuluk was made with unsteamed wheat flour as compared with that with steamed one, but that of acid protease was reduced. The addition of water containing 0.5% hydrochloric acid was unfavorable for the production of saccharogenic enzyme and neutral protease. The optimum ratio of water added to wheat flour for the production of saccharogenic enzyme and proteolytic enzyme was 28% on the basis of wheat flour. The productivity of saccharogenic enzyme was enhanced "when the Nuluk was molded after 10~20 hours precultivation but that of proteolytic enzyme was reduced as compared with no molding. The optimum temperature for the production of saccharogenic enzyme was 28f and that of proteolyic enzyme was also 28$^{\circ}C$. The optimum cultural time for the production of saccharogenic enzyme was 36 ~72 hours at 3$0^{\circ}C$ and that of proteolytic enzyme was 36 hours.ours.

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시판 Protease를 이용한 고추장의 품질 특성 (Quality Characteristics of Kochujang Prepared with Commercial Protease)

  • 정용진;서지형;조혜심
    • 한국식품영양학회지
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    • 제20권4호
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    • pp.378-383
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    • 2007
  • To study the characteristics and processing of Kochujang which is rapidly fermented by commercial enzymes, three kinds of Kochujang(KP-FA, KP-FN, and KP-BN) using commercial proteases and one Kochujang(KM) using Meju were prepared and their qualities investigated. There were only small differences in pH and acidity between each Kochujang. The moisture contents were high tendency in the three kinds of Kochujangs using the commercial proteases at 20 days of fermentation. Reducing sugars had a tendency to decrease during the fermentation in the Kochujangs using the proteases. During the first half of fermentation, the Kochujangs made with proteases showed higher amino nitrogen contents than the Kochujang(KM) made using Meju. Acidic protease activity was high in KP-FA at 20 days of fermentation and neutral protease activity was high in KP-FN and KP-BN at the beginning of fermentation. The Kochujangs made using the proteases, through 20 days of fermentation, obtained high preference in the sensory evaluation for color, texture, and overall acceptability. However, the hot taste was stronger in these Kochujangs during the fermentation.

Purification and Characterization of Metalloproteases from Pleurotus sajor-caju

  • SHIN, HYUN-HEE;HYE-SEON CHOI
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권5호
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    • pp.675-678
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    • 1999
  • Fibrinolytic protease activity was detected in the fruit body of Pleurotus sajor-caju using a fibrin plate method. Two fibrinolytic activities (FPI and Ⅱ) were found at the regions of 14.5 and 86.0 kDa by using gel-filtration column chromatography. FPⅡ was identified as an alkaline protease, whereas FPⅠ was a neutral protease. Both were inhibited by phenanthrolin and EDTA, suggesting that they are metalloprotease. Inactivated enzyme activities were restored by adding Co/sup 2+/ or Zn/sup 2+/. Iodoacetate inhibited FPⅠ, but not FPⅡ. Both enzymes cleaved B/sub β/ and γ chains of the human fibrinogen. FPⅡ showed a preference to hydrophobic and bulky residues of nitroanilidine compounds as substrates, whereas FPⅠ preferred positively charged residues.

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인삼백 첨가가 알콜발효용균의효소생성에 미치는 영향 (Effect of Red Ginseng Residue on Various Enzyme Production of Alcohol Fermentation Koji)

  • 김상달;도재호;이종철
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제6권2호
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    • pp.131-137
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    • 1982
  • The effect of red ginseng residue on the several enzyme activities of the koji and alcohol fermentation were investigated. The koji showed maximum values of amylase and cellulase activity when it was prepared by 30% red ginseng residue and 70% wheat bran, and of protease activity when it was prepared by 40% red ginseng residue and 60% wheat bran-${\alpha}$ amylase activity of the koji during its fermentation was increased rapidly until 4 days and there after it was increased slowly, but ${\beta}$-amylase was rapidly increased after 3 days fermentation. During the preparation of the koji, the acidic, neutral protease and cellulase activities showed the maximum value after 3 days fermentation and the alkaline protease showed the maximum value within 4-6 days fermentation. On the otherhand, fermented broth, containing 6%(v/v) alcohol, could be obtained when the substrate was saccharified by the koji, based on 25% red ginseng residue and 75% wheat bran, prior to alcohol fermentation.

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간장발효덧중에 생육하는 유용효모의 역활 (The Role of useful yeasts in the soy sauce mash)

  • 이택수
    • 미생물학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.87-92
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    • 1972
  • Serratia marcescens가 생성하는 단백질 분해효소를 연구하기 위하여 효소의 활성도를 규명한 결과는 다음과 같다. (1)단백질 분해효소의 활성은 PH6.0과 PH7.5의 두 범주에서 최대로 나타났다. (2)45$^{\circ}C$에서 효소의 활성도가 가장 높았다. 이러한 결과로 미루어 볼때 Serratia marcescens의 단밸질 분해효소는 중성 PH 범위에서 안정된 효소활성을 갖는 것으로 생각할 수 있으며 다른 효소에 비해 비교적 높은 온도에서 활성도가 더욱 좋음을 알 수 있었다.

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개량식 고추장의 특성 (Characteristics of improved Kochujang)

  • 우동호;김재욱
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제33권2호
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    • pp.161-168
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    • 1990
  • 개량식 고추장의 특징을 검토하기 위하여 재래식과 개량식 고추장의 숙성시 성분 변화, 메주와 고오지의 효소 역가 그리고 소금과 고추가루의 첨가 영향 등을 본 결과 숙성 초기에는 재래식과 개량식 고추장에서 아미노태질소, 환원당 함량의 큰 차이를 보이나 그 이후에는 평행되게 변화되었다. Koji의 protease역가는 악산성에서 메주는 중성에서 최대 활성을 보였다. 기질 소화의 최적 조건은 $60^{\circ}C$에서 3시간이었다. 소금 및 고추가루의 첨가로 protease와 당화 amylase의 역가가 현저하게 떨어지므로 소금과 고추가루는 소화 후에 첨가하는 것이 유리하였다.

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Aspergillus sp. 101로부터 내염성 단백분해효소 생산을 위한 최적 조건 및 특성 (Optimal Conditions for the Production of Salt-tolerant Protease from Aspergillus sp. 101 and Its Characteristics)

  • 황주연;최승화;이시경;김상무
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제38권11호
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    • pp.1612-1617
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    • 2009
  • 단백질 식품의 가공에 이용할 수 있는 내염성 단백분해효소를 생산하기 위하여, 된장에서 분리한 Aspergillus sp. 101균으로부터 내염성 단백분해효소생산을 위한 최적 배지조성을 확립하였다. 질소원으로서 대두단백원인 탈지대두분(DSF)과 분리대두단백(SPI)을 각각 2% 첨가 시에 효소 활성이 가장 높았고, 무기질소원으로 $CaCO_3$$K_2HPO_4$이 각각 0.1%씩 첨가 시에 가장 좋은 결과를 얻었다. 또한 Arabic gum을 배양액에 0.1% 첨가하였을 때, 효소 활성이 가장 높았다. Aspergillus sp. 101은 최고 15% NaCl 농도의 agar plate에서 생육이 가능하였으며, 조효소 또한 NaCl 7%까지 안정하였다. 이와 같이 조정 배지(modified medium)에 Aspergillus sp. 101에 의해 생산된 내염성 단백분해효소는 일반적인 곰팡이류의 단백분해효소 생산용 배지에 비해 생산성이 높았으며, 최적배지에서 배양한 Aspergillus sp. 101 유래 단백분해효소에 의한 어육단백질 가수분해물의 기능 개선 또는 식품첨가물로서의 활용은 단백분해효소 생산의 산업화를 가능하게 하는 것으로 보인다.