Objectives : This study investigated effect of Evodiae fructus water extract (EVOR) on apoptotic cell death induced by NaCN in SK-N-SH neuroblastoma cell lines. NaCN stimulates glutamate release which can activate glutamate receptors to initiate excitotoxic processes. This study examines the role of EVOR in mediating NaCN-induced cytotoxicity. Methods & Results : Cytotoxicity was assessed by measuring lactate dehydrogenase (LDH) in the culture media. NaCN(0.1mM) produced cytotoxicity following 12hrs of incubation. NaCN-induced cytotoxicity was partially blocked by EVOR. The treatment of EVOR in simultaneous exposure of cultures to NaCN provided complete protection against cytotoxicity. NaCN-induced cytotoxicity was found to inhibit DNA fragmentation, repaired by cell cycle and simultaneous exposure to NaCN, regenerated with neurite outgrowh by EVOR. These results indicate thaf damage by NaCN in neumnal cell cultures was repaired by EVOR, whereas NaCN-induced cytotoxicity is blocked Primarily by activation of anti-apoptosis. Conclusions : These results suggest that EVOR may be beneficial for the treatment of dementia and other degenerative problems of the central nervous system.
Choi, Soo Hyun;Kim, Dae Won;Kim, So Young;An, Jae Jin;Lee, Sun Hwa;Choi, Hee Soon;Sohn, Eun Jung;Hwang, Seok-Il;Won, Moo Ho;Kang, Tae-Cheon;Kwon, Hyung Joo;Kang, Jung Hoon;Cho, Sung-Woo;Park, Jinseu;Eum, Won Sik;Choi, Soo Young
Molecules and Cells
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제20권3호
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pp.401-408
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2005
Reactive oxygen species (ROS) contribute to the development of various human diseases. Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) is one of the major means by which cells counteract the deleterious effects of ROS. SOD activity is dependent upon bound copper ions supplied by its partner metallochaperone protein, copper chaperone for SOD (CCS). In the present study, we investigated the protective effects of PEP-1-CCS against neuronal cell death and ischemic insults. When PEP-1-CCS was added to the culture medium of neuronal cells, it rapidly entered the cells and protected them against paraquat-induced cell death. Moreover, transduced PEP-1-CCS markedly increased endogenous SOD activity in the cells. Immunohistochemical analysis revealed that it prevented neuronal cell death in the hippocampus in response to transient forebrain ischemia. These results suggest that CCS is essential to activate SOD, and that transduction of PEP-1-CCS provides a potential strategy for therapeutic delivery in various human diseases including stroke related to SOD or ROS.
Scutellariae baicalensis GEORGt Acorus gramineus SOLAND and Gastrodia elata BLUME are traditional medicines used in the treatment of incipient stoke. In this study we investigated their effects on various aspects of neuronal differentiation in single or composite forms. Water-extracts of these medicines showed neuroprotective effects on cultured rat cortical neurons in normoxia and hypoxia. To understand the mechanism for neuroprotection we carried out various cell biological assays. They stimulated initial differentiation of neuronal development (transition from stage 1 to 2), and increased the number of spines and the length and number of dendritic processes. These effects were best manifested in the experimental group, which were given a mixture of the three kinds of extracts (p<0.01). To assess improvement of brain functions we carried out Morris water-maze tests for the mice that were fed on these extracts instead of water for 4 weeks. The experimental groups, especially those which were given the mixture of the three kinds of extract, showed significant (p<0.01) enhancement in memory as early as one day after the learning trial. These results indicate that these three kinds of extracts have synergistic effects on neuronal protection and improvement of brain functions.
본 연구는 뉴런 세포와 슈반 세포의 공동 배양에 의한 수초화 발생 과정과 herpes simplex virus-1 감염에 의한 탈수초화 발생과정을 전자 현미경과 분자생물학적 분석에 의하여 확인하고자 하였다. 쥐의 배아로부터 후근신경절(dorsal root ganglion, DRG)을 분리하여 슈반(Schwann) 세포와 뉴런 세포(neuronal cell)를 in vitro에서 각각 배양하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 뉴런세포와 정제된 슈반세포를 함께 공동 배양을 하여 수초화를 발생시켰다. 이렇게 수초화된 공동 배양 세포에 herpes simplex virus-1를 감염시켜 탈수초화를 진행시켰다. 수초 형성의 존재를 의미하는 myelin protein zero(MPZ) 항체를 사용하고 전자 현미경을 이용하여 수초 발생 및 탈수초화 과정을 관찰하였다.
Taurine (2-aminoethanesulfonic acid), one of bioactive amino acid in the mammalian brain, is known to exert inhibitory effects on neurons via GABA receptor. In the present study, we examined effects of taurine on glutamateinduced neurotoxicity on hippocampal neuron cell culture using cell counting method and lactate dehydrogenase (LDH) assay. After 10 d of culture, cells were stimulated with appropriate drugs. Only 43% of cultured neuronal cells survived at one day after stimulation with 500 uM L-glutamate for 10 min. Survival rate was enhanced by 82% in the presence of 10 mM taurine. LDH activity from the culture supernatant incubated with a combination of L-glutamate and taurine was less than half of that with L-glutamate alone. In the next series of experiments, interleukin-6 (IL-6) mRNA expression in cultured astrocytes was investigated using reverse tanscription-PCR (RT-PCR). IL-6 mRNA was detected in the astrocytes stimulated with L-glutamate in a dose-dependent manner, while not detected in the unstimulated control astrocytes. The expression of IL-6 mRNA caused by 10 mM glutamate was inhibited by taurine, but not by GABA. These findings demonstrated a neuroprotective action of taurine against glutamate-induced toxicity.
Taehwan Kwak;Si-Hyung Park;Siyoung Lee;Yujeong Shin;Ki-Jun Yoon;Seung-Woo Cho;Jong-Chan Park;Seung-Ho Yang;Heeyeong Cho;Heh-In Im;Sun-Ju Ahn;Woong Sun;Ji Hun Yang
International Journal of Stem Cells
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제17권2호
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pp.158-181
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2024
This study offers a comprehensive overview of brain organoids for researchers. It combines expert opinions with technical summaries on organoid definitions, characteristics, culture methods, and quality control. This approach aims to enhance the utilization of brain organoids in research. Brain organoids, as three-dimensional human cell models mimicking the nervous system, hold immense promise for studying the human brain. They offer advantages over traditional methods, replicating anatomical structures, physiological features, and complex neuronal networks. Additionally, brain organoids can model nervous system development and interactions between cell types and the microenvironment. By providing a foundation for utilizing the most human-relevant tissue models, this work empowers researchers to overcome limitations of two-dimensional cultures and conduct advanced disease modeling research.
Pineal organs of poikilotherm vertebrates transform the environmental light information into a humoral message and a neuronal activity. The former is melatonin, and the latter is modulation of the impulse in ganglion cells. The ganglion cells are physiologically classified into luminosity (achromatic) type and chromatic one, as the neural activity is modulated in two ways. We attempted to classify the pineal ganglion cells with morphological characteristics by means of the three- dimensional reconstruction method. In the pineal ganglion cells of river lamprey, there are two different features, oval and spherical. For comparison of their projection region in the brain, the tracing investigation was also carried out. The application of the neural tracer near mesencephalic tegmentum showed that only oval-shaped ganglion cells were labeled in the pineal organ. These results suggest that the oval-shaped ganglion cell is functionally different from the spherical one.
Soeumin Sibjeundaibo-tang (SJDBT) and Soyangin Sibimijihwang-tang (SMJHT) have been used traditionally to improve the systemic blood circulation and biological energy production in the patients with circulatory and neuronal diseases. The object of this study is to determine the protective effects of SJDBT and SMJHT extracts on the spontaneous and glutamate-induced neuronal damages in cultured cells derived from mice cerebral cortex. At 14 days after beginning the cultures, the activity of lactate dehydrogenase released into the culture media was significantly decreased by treatment of cerebroneuronal cells with SJDBT and SMJHT (0.1 mg/ml) for 7 days. By comparison with the normal cells, cerebroneuronal morphology was dramatically changed by treatment of glutamate (1 mM) for 12 hrs, and this was conspicuously recovered by pretreatment of cerebroneural cells with SJDBT and SMJHT (0.1-1.0 mg/ml) for 2 days. Moreover, glutamated-induced DNA fragmentation was also protected by pretreatment of cerebroneuronal cells with those extracts. These results suggest that naturally occurring and glutamate-induced degeneration of cultured cerebrocortical cells may be related, in part, to the process of apoptotic cell death. The pharmacological properties of SJDBT and SMJHT extracts to improve cerebroneuronal degeneration may be considered as one of useful medicines that can prevent cerebrocortical impairments resulted from age-dependent and excitotoxicity-induced neuronal degeneration in human brain.
Epilepsy or the occurrence of spontaneous recurrent epileptiform discharges (SREDs, seizures) is one of the most common neurological disorders. Shift in the balance of brain between excitatory and inhibitory functions due to different types of structural or functional alterations may cause epileptiform discharges. N-Methyl-D-aspartate (NMDA) receptor dysfunctions have been implicated in modulating seizure activities. Seizures and epilepsy are clearly dependent on elevated intracellular calcium concentration ([C $a^{2+}$]$_{i}$ ) by NMDA receptor activation and can be prevented by NMDA antagonists. This perturbed [C $a^{2+}$]$_{i}$ levels is forerunner of neuronal death. However, therapeutic tools of elevated [C $a^{2+}$]$_{i}$ level during status epilepticus (SE) and SREDs have not been discovered yet. Our previous study showed fast inhibition of ginseng total saponins and ginsenoside R $g_3$ on NMDA receptor-mediated [C $a^{2+}$]$_{i}$ in cultured hippocampal neurons. We, therefore, examined the direct modulation of ginseng on hippocampal neuronal culture model of epilepsy using fura-2-based digital $Ca^{2+}$ imaging and neuronal viability assays. We found that ginseng total saponins and ginsenoside R $g_3$ inhibited $Mg^{2+}$ free-induced increase of [C $a^{2+}$]$_{i}$ and spontaneous [C $a^{2+}$]$_{i}$ oscillations in cultured rat hippocampal neurons. These results suggest that ginseng may playa neuroprotective role in perturbed homeostasis of [C $a^{2+}$]$_{i}$ and neuronal cell death via the inhibition of NMDA receptor-induced SE or SREDs.d SE or SREDs..
마우스 간염 바이러스, 코로나, 홍역 및 sindbis 바이러스와 같은 많은 바이러스가 쥐의 신경계에서 수초 형성의 파괴를 의미하는 탈수 초 유도의 원인 바이러스로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 슈반 세포와 신경 세포의 공동 배양에 의한 수초화와 쥐의 sindbis 바이러스 감염에 의한 탈수초화에 의한 수초화 과정을 연구하는 데 있다. 쥐의 배아의 (Dorsal root ganglion, DRG)에서 슈반 (Schwann) 세포와 신경 세포 (neuronal cell)를 in vitro에서 배양 하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 신경세포와 정제 된 Schwann 세포를 갖는 공동 배양을 하였다. 그 후,이 수초화 된 공동 배양 시스템에 sindbis 바이러스 감염이 수행되었다. 수초 형성의 존재를 의미하는 peripheral myelin protein 22 (PMP 22) 항체를 사용하여 수초 형성 및 탈수초화 과정을 관찰 하였다. 우리는 수초화 된 뉴런의 존재를 의미하는 말초 myelin 단백질 22 (PMP 22)의 항체를 사용하여 수초화 및 탈수초 과정을 확인하였다. 이 연구는 과학 기술부, ICT 및 미래 계획 (NRF-2015R1C1A1A01053484 및 2017R1A2B3005753)이 자금을 지원하는 국립 연구 재단 (NRF)을 통한 기초 연구 프로그램의 지원을 받았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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