In this study, the effects of iron on cytochrome c oxidase (CcO) in rat lung mitochondria were examined. Similar to liver mitochondria, iron accumulated considerably in lung mitochondria (more than 2-fold). Likewise, the reactive oxygen species and nitric oxide (NO) content of mitochondria were increased by more than 50% and 100%, respectively. NO might be produced by nitric oxide synthase (NOS), eNOS and iNOS type, with particular contribution by NOS in mitochondria. The respiratory control ratio of iron overloaded lung mitochondria dropped to nearly 50% due to increased state 4. Likewise, cytochrome c oxidase activity was lowered significantly to approximately 50% due to excess iron. Real-time PCR revealed that the expression of isoforms 1 and 2 of subunit IV of CeO was enhanced greatly under excess iron conditions. Taken together, these results show that oxidative phosphorylation within lung mitochondria may be influenced by iron overload through changes in cytochrome c oxidase and NO.
The present study was aimed to explore pathophysiological implications of nitric oxide in the development of left and right ventricular hypertrophy. To induce selective left and right ventricular hypertrophy, rats were made two-kidney, one clip (2K1C) hypertensive and treated with monocrotaline (MCT), respectively. Six weeks later, the hearts were taken and their ventricular tissue mRNA and protein expression of endothelial constitutive isoform of nitric oxide synthase (NOS) were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot analysis, respectively. In 2K1C hypertensive rats, the expression of NOS mRNA was increased in parallel with its proteins in the left ventricle, but not in the right ventricle. In MCT-treated rats, the expression of NOS mRNA and proteins were proportionally increased in the right ventricle, but not in the left ventricle. These results suggest that the expression of NOS is specifically increased in association with the ventricular hypertrophy, which may be a mechanism counteracting the hypertrophy.
In bioassay-guided search for inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitory compounds from higher plants of South Korea, two $\beta$-carboline (2) have been isolated form the cortex of Melia azedarach var. japonica. The structures of these compounds were elucidated on the basis of spectroscopic data. Compounds 1 to 2 showed marked inhibitory activity of iNOS on LPS-and interferon-${\gamma}$-stimulated RAW 264.7 cells.
Present study was aimed to examine whether indomethacin affected the production of NO in the rat paw exudate by carrageenin. Paw edema and nitrite/nitrate levels in the paw exudate were maximal after 4 h and remained elevated up to 10 h, whereas indomethacin (10 mg/kg, po) significantly inhibited the carrageenin-induced paw edema and levels of nitrate in the paw exudate. However, paw edema and nitrite/nitrite levels were increased thereafter for 10 h. Indomethacin also enhanced the expression of iNOS mRNA and protein 4 h after carrageenin infection. Indomethacin inhibited the level of $PGE_2$ in the paw exudate in a time-dependent manner. These results suggest the possibility that indomethacin may potentiate expression of iNOS and subsequently increase nitrite/nitrate level in the late phase of carrageenin-induced rat paw inflammation possibly by suppressing cycloxygenase activity.
Nitric oxide (NO) can mediate numerous physiological processes, including vasodilation, neurotransmission, cytotoxicity, secretion and inflammatory response. The regulation of NO production by inducible NO synthase (iNOS) is considered to be the possible target of the development of anti-inflammatory agent, based on the observation that NO can activate cyclooxygenase, which results in the synthesis of prostaglandins. In an effort to screen new inhibitor of NO production from about 352 species of herbal extracts, we found 9 species with 50% or more inhibitory effect on NO production. Especially, the dose-dependent inhibition of NO production in lipopolysaccharide-treated macrophages by two of the herbal extracts (Artemisiae asiaticae Herba and Saussureae Radix) was due to the decrease in the expression of iNOS.
The aim of this study was to investigate effects on joint mobilization in neurochemical changes of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) and nitric oxide synthase (NOS) of the spinal cord neurons after right knee joint immobilization (RKJI) and in ultrastructural changes of the femoral nerves innervating the muscles acting on RKJI. A total of 15 guinea pigs were used and divided into 5 groups. Immunohistochemistry was performed to detect NADPH-d and NOS. NADPH-d and NOS were not expressed in the ventral horn of control and experimental groups, but were expressed or not in the dorsal horn according to the duration of release after RKJI and the presence or absence of joint mobilization. Ultrastructures of the femoral nerves in experimental groups had partial demyelination and condensed clumps in axon. Effects on manipulative therapy after RKJI were confirmed from expression of NADPH-d and NOS in the dorsal horn of the lumbosacral spinal cord. Manipulative therapy was more effective against a long-term immobilization than a short-term immobilization.
Egg allergies have been reported as one of the most prevalent food hypersensitivities in the pediatric population. One of the major egg allergens is ovalbumin (OVA), which is the major protein in the egg whites. Phenethyl isothiocyanate (PEIC) from cruciferous vegetables has an effect on anti-inflammatory therapy. In the present report, we show that PEIC inhibits the nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) activation induced by OVA. PEIC also inhibits the OVA-induced inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression and nitrite production. However, PEIC did not suppress the cyclooxygenase-2 (COX-2) expression induced by OVA. These results suggest that PEIC has the specific mechanism for anti-inflammatory responses and efficient anti-allergic activities.
Primary pro-inflammatory cytokines are a trio: tumor necrosis- $\alpha$ (TNF-$\alpha$), interleukine-$\beta$ (IL-$\beta$), and interleukine-6 (IL-6). These cytokines initiate and regulate the acute-phase inflammatory response during infection, trauma, or stress and appear to play an important role in the immune process. Nitric oxide (NO) is a multi-functional mediator, which plays an important role in regulating various biological functions in vivo. NO production by inducible nitric oxide synthase (iNOS) in macrophages is essential for the defense mechanisms against microorganisms and tumor cells. However, over-expression of iNOS by various stimuli, resulting in over-production of NO, contributes to the pathogenesis of septic shock and some inflammatory and auto-immune disease. Solvent fractions of sage ( Salvia officinalis L.), which is cultivated in Jeju-Do, was assayed for their effects on TNF-$\alpha$ and IL-6 production in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. Hexane and ethylacetate (EtOAc) fraction of sage inhibited the protein and mRNA expression of TNF-$\alpha$ and IL-6 in LPS stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of 100 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$. Also, incubation of RAW 264.7 cells with the fraction of hexane or EtOAc (50 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) inhibited the LPS induced nitrite accumulation and the LPS/IFN-${\gamma}$ induced iNOS protein. And this inhibition of iNOS protein is concordant with the inhibition of iNOS mRNA expression. Above results suggest that extract of sage may have anti-inflammatory activity through the inhibition of pro-inflammatory cytokines (TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6), iNOS and NO.
Nitric oxide synthesized by inducible nitric oxide synthase (iNOS) has been implicated as a mediator of inflammation in rheumatic and autoimmune diseases. The effects of higenamine, a tetrahydroisoquinoline compound, on induction of NOS by bacterial lipopolysaccaride (LPS) were examined in murine peritoneal macrophages. LPS-induced nitrite/nitrate production was markedly inhibited by higenamine which at 0.01 mM, decreased nitrite/nitrate levels by $48.7{\pm}4.4%$This was comparable to the inhibition of LPS-induced nitrite/nitrate production by tetrandrin ($49.51{\pm}2.02%$). at the same concentration. Northern and Western blot analysis of iNOS expression demonstrated that iNOS expression was significantly attenuated following co-incubation of peritoneal macrophages with LPS (10 $\mu\textrm{g}$/m;; 18hrs) and higenamine (0.001, 0.,01 mM; 18hrs). These results suggest that higenamine can inhibit LPS-induced expression of iNOS mRNA in murine peritoneal macrophages. The clinical implications of these findings remain to be established.
Epidemiological studies have demonstrated an association between exposure to diesel exhaust particles (DEP) and adverse cardiopulmonary effects. Despite the epidemiological proof, the pathogenesis of DEP-related pulmonary diseases remain poorly understood. So, comprehensive in vivo and in vitro researches are required to know the effects of DEP on diverse lung diseases. Alveolar macrophages (AM) and airway epithelial cells are known as important cellular targets in DEP-induced lung diseases. Other studies have shown that nitric oxide (NO) is involved in particle matter induced lung injury. The present study was undertaken to determine whether DEP has an synergistic effects on lipopolysaccharide (LPS)-induced NO formation and inducible nitric oxide synthase (iNOS) with nitrotyrosilated-protein formation in cultured primary alveolar macrophages. The formation of NO was determined through the Griess reaction in the cultured medium and iNOS with nitrotyrosilated-proteins are analyzed by immunohistochemical staining and Western analysis. The results indicate that DEP exposure does not induce NO formation by itself, however DEP showed significant synergistic effects on LPS-induced NO formation. So, our results suggest that DEP inhalation could aggravate inflammatory lung disease through NO formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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