• IMMUNE NETWORK
• /
• 제4권2호
• /
• pp.108-115
• /
• 2004

Background: Production of nitric oxide (NO) by inducible NO synthase (iNOS) has been implicated in the pathology of autoimmune disease. It is unknown whether iNOS expression is increased within testes and whether iNOS and NO have essential roles in the pathogenesis of EAO. Methods: EAO was induced in guinea pig testes at 17 days after secondary immunization by administration of crude extract (CE) and purified glycoprotein 1 (GP1) from normal guinea pig testes. iNOS gene expression was assessed by RT-PCR and Northern blot analysis in testes. Localization of iNOS and Mac-1 and the indicator of NO-mediated tissue injury, nitrotyrosine, were detected in the testicular lesion by immunohistochemistry. Results: In control testes, inflammation and iNOS gene expression were not detected, whereas, in CE- and GP1-injected testes, inflammation and marked iNOS gene expression were evident at day 17 after secondary immunization. Immunohistochemistry of Mac-1 showed the colocalization with iNOS protein and nitrotyrosyl proteins in intertubules, suggesting that NO produced by infiltrated macrophages may be involved in inflammatory lesions of intertubules. Intraperitoneal administration of aminoguanidine significantly prevented EAO with reduction of inflammation, iNOS expression and nitrotyrosine formation. Conclusion: These results suggest that NO production by macrophages may be important in the pathogenesis of CE- and GP1-induced EAO. Furthermore, this study demonstrated the therapeutic potential of iNOS inhibitor in the treatment of inflammatory and autoimmune mediated-diseases.

• 과학교육연구지
• /
• 제38권3호
• /
• pp.625-640
• /
• 2014

21세기에는 과학의 본성에 대한 이해가 과학 교육의 중요한 목표로 강조되고 있다. 본 연구에서는 초등학교 3, 4, 5, 6학년 과학 교과서의 지구과학 영역이 과학의 본성의 다양한 주제를 얼마나 포함하고 있으며, 학년별로 과학의 본성의 각 주제가 어떤 비율로 나타나 있는지 분석하였다. Chiappetta et al.(1991)의 분석틀과 Lee(2012)의 교과서 분석 방법을 수정하여 적용하였으며, 분석결과는 다음과 같다. 첫째, 현행 교과서는 과학의 본성에 대한 4가지 주제를 모두 포함하여 진술하고는 있으나, 각 주제별 하위 항목에 대해서는 제한적으로 과학의 본성에 대해 소개하고 있는 것으로 분석되었다. 둘째, 현행 교과서는 과학의 본성의 각 주제에 대해 학년 간 균형을 이루지 못하여 진술하고 있는 것으로 분석되었다. 과학의 본성에 대한 연구를 진행하는 궁극적인 목적은 학생들이 과학의 본성에 대해 올바른 이해를 갖게 하는 것이다. 따라서 우리나라 초등학교 과학 교과서에 과학의 본성의 다양한 주제를 명시적으로 포함시키는 노력이 필요한 것으로 나타났다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
• /
• 제5권6호
• /
• pp.521-527
• /
• 2001

Diclofenac, a phenylacetic acid derivative, is a widely used non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) to provide effective relief of inflammation and pain. Nitric oxide (NO) synthesized by inducible nitric oxide synthase (iNOS) has been implicated as a mediator of inflammation. We examined the inhibitory effects of diclofenac on the induction of iNOS in RAW 264.7 macrophages which were activated with lipopolysaccharide (LPS) plus interferon-gamma $(IFN-{\gamma}).$ Treatment of RAW 264.7 cells with diclofenac and other NSAIDs (aspirin and indomethacin) significantly inhibited NO production and iNOS protein expression induced by LPS plus $IFN-{\gamma}.$ Also, diclofenac but not aspirin and indomethacin, inhibited iNOS mRNA expression and nuclear factor-kappa B $(NF-{\kappa}B)$ binding activity concentration-dependently. Furthermore, transfection of RAW 264.7 cells with iNOS promoter linked to a CAT reporter gene revealed that only diclofenac inhibited the iNOS promoter activity induced by LPS plus $IFN-{\gamma}$ through the $NF-{\kappa}B$ sites of iNOS promoter. Taken together, these suggest that diclofenac may exert its anti-inflammatory effect by inhibiting iNOS gene expression at the transcriptional level through suppression of $NF-{\kappa}B$ activation.

• KSBB Journal
• /
• 제26권2호
• /
• pp.172-176
• /
• 2011

This study was aimed to verify suppressive effect of pine-needle extract on lipopolysaccharide (LPS)-induced inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression. In order to evaluate suppressive effect on iNOS expression, RAW 264.7 cells were stably transfected using an iNOS promoterluciferase reporter plasmid yielding RAW 264.7/pGL2-NeomiNOS_ pro11 cells. Established in vitro detection system revealed to diminish LPS-induced iNOS expression by 0.1~500 ${\mu}g/mL$ of saponin at the concentration-dependant manner. Pine needle extract also diminished LPS-induced iNOS expression to 92 and 88% at 500 and 50 ${\mu}g/mL$, respectively. These results suggest that the in vitro detection system developed here could be useful for the verification of suppressive materials on iNOS expression and pine needle extract could be used for the development of functional foods.

• Clinical and Experimental Pediatrics
• /
• 제52권5호
• /
• pp.594-602
• /
• 2009

목 적 : $TGF-{\beta}1$는 흥분독성을 억제시키고 질소 산화물 생성 억제를 통한 신경세포 보호 효과가 있다고 알려져 있지만 주산기저산소 허혈 뇌손상에서 그 기전은 아직도 확실히 밝혀져 있지 않고 있다. 따라서 이번 연구에서는 신생 백서의 저산소 허혈 뇌손상에서 산화질소로 인한 신경독성 및 글루탐산염에 의한 흥분독성과 $TGF-{\beta}1$의 관계를 보고자 하였다. 방 법 : 생체외 실험으로 재태 기간 19일된 태아 백서의 대뇌피질 세포를 배양하여 1% O2 배양기에서 저산소 상태로 뇌세포손상을 유도하여 저산소군(Hypoxia), 저산소 손상 30분 전 $TGF-{\beta}1$ (1, 5, 10 ng/mL) 투여군(H+$TGF-{\beta}1$)으로 나누어 정상 산소군 (Control)과 비교하였다. 생체 내 실험은 생후 7일된 백서의 좌측 총 경동맥을 결찰한 후 저산소 (7.5% O2) 상태로 2시간 노출시켜서, 저산소 허혈 뇌손상을 유발하였다. 아무런 처치도 하지 않은 정상 대조군(Control), 경동맥 노출 후 봉합 시술만 시행한 정상 Sham 수술군(Sham-OP), 손상 30분 전 생리식염수를 주입 후 경동맥 결찰과 저산소 노출을 시행한 저산소 허혈 대조군(HI+ Vehicle), 손상 30분 전 $TGF-{\beta}1$을 대뇌로 투여하고 경동맥 결찰과 저산소 노출을 시행한 저산소 허혈 $TGF-{\beta}1$ 투여군(HI+$TGF-{\beta}1$)으로 나누어 비교분석하였다. 흥분독성과의 관련을 알아보기 위하여 NMDA 수용체 아단위를 이용하였고, 질소산화물과의 관련을 알아보기 위해 iNOS, eNOS 및 nNOS를 이용하여 western blotting과 실시간 중합효소연쇄반응을 하였다. 결 과 : 생체 외 실험에서 iNOS의 발현은 정상 산소군과 저산소군 간에 차이가 없었으며, $TGF-{\beta}1$ 투여군에서는 발현이 증가하였으며 이는 농도와는 상관성이 없었다. eNOS, nNOS의 발현은 1 ng/mL의 $TGF-{\beta}1$ 투여군에서 저산소군보다 감소하였다. 생체 내 실험에서는 iNOS와 iNOS mRNA의 발현은 $TGF-{\beta}1$ 투여한 후 저산소 대조군보다 증가하였다. eNOS와 nNOS 발현은 정상 대조군 보다 저산소 대조군에서 감소하였고, eNOS의 발현은 $TGF-{\beta}1$ 투여군에서 증가하였지만 nNOS의 발현은 증가하지 않아 통계적 유의성이 없었다. eNOS mRNA와 nNOS mRNA의 발현은 iNOS와 반대로 $TGF-{\beta}1$ 투여군에서 저산소 대조군보다 감소하였다. NMDA 수용체 아단위 mRNA의 발현은 정상 대조군과 Sham 수술군에 비해 저산소 대조군에서 모두 감소하였으나 $TGF-{\beta}1$ 투여군에서 NR2C를 제외한 나머지 아단위의 발현은 저산소 대조군보다 증가하였다. 결 론 : 신생백서의 저산소 허혈 뇌손상에서 $TGF-{\beta}1$ 치료군에서 저산소로 인하여 감소된 NMDA 수용체 아단위의 발현을 증가시켜 흥분독성 기전과 관련성을 보이며, 증가된 iNOS 발현을 감소시키고 감소된 eNOS 발현을 증가시키는 질소 산화물 중재를 통한 뇌 보호 작용에 연관이 있을 것으로 생각된다.

• 과학교육연구지
• /
• 제44권3호
• /
• pp.273-288
• /
• 2020

본 연구에서는 2015 개정 교육과정 고등학교 통합과학 교과서에 나타난 과학의 본성(NOS) 분포를 분석하였다. 분석 대상은 2015 개정 교육과정으로 출판된 통합과학 교과서 5종 모두를 분석하였으며, 분석의 개념적 틀로는 과학적 소양 기반 4가지 영역의 과학의 본성(NOS)(Lee, 2013)을 활용하였다. 4가지 영역의 과학의 본성(NOS)은 1. 과학지식의 본성(nature of scientific knowledge), 2. 과학적 탐구의 본성(nature of scientific inquiry), 3. 과학적 사고의 본성(nature of scientific thinking), 그리고 4. 과학과 기술 및 사회의 상호작용의 본성(nature of interactions among science, technology, and society)이다. 분석은 2명의 분석자가 수행하였으며, 두 분석자간의 신뢰도는 Cohen's kappa 계수 0.83 ~ 0.96으로 비교적 높은 신뢰도 값을 나타냈다. 분석 결과는 다음과 같다. 첫째, 2015 개정 교육과정 통합과학 교과서에서는 과학의 본성(NOS) 4가지 측면 중에서 '과학탐구의 본성(nature of scientific inquiry)' 영역을 전반적으로 가장 강조하고 있었다. 이것은 통합과학 교과서 5개 출판사 전체 영역에서 '과학 탐구의 본성(범주 II)'의 분포가 평균 약 44 %로 나타나는 것에서 확인할 수 있었다. 둘째, 2015 개정 교육과정 통합과학 교과서는 출판사에 상관없이 '과학탐구의 본성(범주 II)'을 가장 강조하고 있었지만, 그외 다른 측면의 과학의 본성(NOS) 부분은 출판사별로 다소 차이가 나타나고 있었다. 따라서 통합과학 교과서들은 과학적 내용과 활동을 탐구하는 방법으로서 주로 제시하면서 출판사별로 다소 다르게 과학의 본성(NOS) 특징을 강조하고 있다고 말할 수 있다. 셋째, 2015 개정 교육과정 통합과학 교과서에서 강조하는 과학의 본성(NOS) 측면은 4. 환경과 에너지 단원을 제외하고 모든 단원에서 유사하게 나타났다. 이것은 과학의 본성(NOS) 단원별 분석 결과가 대부분의 단원에서 전체 교과서 분석 결과와 유사한 양상이었으며, 4. 환경과 에너지 단원에서만 범주 II의 '과학 탐구의 본성' 영역 다음으로 '과학-기술-사회와 상호작용하는 과학의 본성(STS)(범주 IV)'이 강조되고 있는 것에서 확인할 수 있다. 이와 같은 결과는 2015 개정 교육과정 통합 과학 교과서가 지난 교육과정에 비하여 비교적 다양하고 균형 있는 과학의 본성(NOS) 측면을 제시하고 있으며, 2015 개정 교육과정의 목표인 과학적 문제해결력과 창의력 증진을 위하여 과학적 탐구를 강조를 하고 있다는 것을 알 수 있었다.

• Molecular & Cellular Toxicology
• /
• 제3권4호
• /
• pp.215-221
• /
• 2007

Neuronal cell toxicity induced by decreased nitric oxide (NO) production may be caused by modulation of constitutive neuronal NO synthase (nNOS). We used lead acetate ($Pb^{2+}$) to modulate physiological NO release and the related pathways of protein kinases like PKC, CaM-KII, and PKA in CATH.a cells, a dopaminergic cell line that has constitutive nNOS activity. In the cells treated with $Pb^{2+}$, cell viability and modulation (phosphorylation) levels of nNOS were determined by MTT assay and Western blot analysis, respectively. nNOS reductase activity (cytochrome c) was also assessed to compare the phosphorylation site-specific nNOS activity. nNOS activity was also determined by NADPH consumption rates. $Pb^{2+}$ treatment alone increased the phosphorylation of nNOS with decreased reductase activity. The phosphorylation levels increased markedly with decreased nNOS reductase activity, when $Pb^{2+}$ was combined with inhibitors for two (PKC and CaM-KII) or three (PKA, PKC and CaM-KII) protein kinases. Interestingly, when the cells were exposed to $Pb^{2+}$ plus PKC or CaM-KII inhibitor, the nNOS was phosphorylated strongly with the lowest activity. However, the levels of phosphorylated nNOS following $Pb^{2+}$ treatment decreased significantly after combined treatment with the PKA inhibitor, and $Pb^{2+}$-induced suppression of reductase activity did not occur. These results demonstrate that physiological NO release in the neuronal cells exposed to $Pb^{2+}$ can be decreased by PKA-mediated nNOS phosphorylation that may be caused by interactions with PKC and/or CaM-KII.

• 대한물리치료과학회지
• /
• 제10권2호
• /
• pp.193-198
• /
• 2003

Acupuncture has been used as a clinical treatment in Oriental medicine for various diseases. In the present study was carried out to investigate the effects of acupuncture and electrical stimulation on the change neuronal nitric oxide synthase(nNOS) immunoreactive cells in the periaqueductal gray(PAG) area of the male SD rats. Enhanced expression of nNOS was detected in the dorsolateral-PAG(DL-PAG) area of rat with stress by fixed body, and acupuncture and needle electrode electrical stimulation groups at Hapgok like acupoint decreased the stress-induced enhancement in the expression of nNOS. The present results demonstrate that acupuncture and needle electrode electrical stimulation is effective in the modulation of expression of nNOS in the DL-PAG area under stress conditions.

• Toxicological Research
• /
• 제21권4호
• /
• pp.285-290
• /
• 2005

We demonstrate that radicicol, a macrocyclic antifungal antibiotic originally isolated from Monosporium bonorden, inhibits LPS-induced expression of iNOS gene in RAW 264.7 cells. Treatment of peritoneal macrophages and RAW 264.7 cells with radicicol inhibited LPS-stimulated nitric oxide production in a dose-related manner. Immunohistochemical staining of iNOS and RTPCR analysis showed that the decrease of NO was due to the inhibition of iNOS gene expression in RAW 264.7 cells. Immunostaining of p65, EMSA, and reporter gene assay showed that radicicol inhibited $NF-\kappa/Rel$ nuclear translocation. DNA binding, and transcriptional activation, respectively. Collectively, these series of experiments indicate that radicicol inhibits iNOS gene expression by blocking $NF-\kappa/Rel$ nuclear translocation. Due to the critical role that NO release plays in mediating inflammatory responses, the inhibitory effects of radicicol on iNOS suggest that radicicol may represent a useful anti-inflammatory agent.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제23권4호
• /
• pp.407-412
• /
• 2000

The presence of the nitric oxide synthase (NOS) enzyme from Salmonella typhimurium (S. typhimurium) was identified by measuring radiolabeled L-$[^3H]$citrulline and NO, and Western blot analysis. NOS was partially purified by both Mono Q ion exchange and Superose 12HR size exclusion column chromatography, sequentially. The molecular weight of NOS was estimated to be 93.3 kDa by Western blot analysis. The enzyme showed a significant dependency on the typical NOS cofactors; an apparent Km for L-arginine of 34.7 mM and maximum activity between $37^{\circ}C$ and $43^{\circ}C$. The activity was inhibited by NOS inhibitors such as aminoguanidine and $N^{G}$ $N^{G}$-dimethyl-L-arginine. taken together, partially purified NOS in S. typhimurium is assumed to be a different isoform of mammalian NOSs.OSs.