Neuroblastoma, a pediatric malignant neoplasm of neural crest origin, has a wide range of clinical virulence. The mechanisms contributing to the development of neuroblastomas are largely unclear, but non-random chromosomal changes identified over the past years suggest the involvement of genetic alterations. Amplification of the human N-myc proto-oncogene is frequently seen either in extrachromosomal double minutes or in homogeneously staining regions (HSRs) of aggressively growing neuroblastomas. N-myc maps to chromosome 2 band 24, but HSR have never been observed at this band, suggesting transposition of N-myc during amplification. We have constructed and analyzed the region-specific painting probe for HSR in neuroblastoma IMR-32 to determine the derivative chromosomes. Microdissection was performed on HSR using an inverted microscope with the help of microglass needles and an micromanipulator. We pretreated the microdissected fragments with Topoisomerase I which catalyzes the relaxation of supercolled DNA, and performed two initial rounds of DNA synthesis with T7 DNA polymerase followed by conventional PCR to enable the reliable preparation of Fluorescent in situ hybridization probe from a single microdissected chromosome. With this method, it was possible to construct the region-specific painting probe for HSR. The probe hybridized specifically to the HSRs of IMR-32, and to 2p24, 2p13 of normal chromosome. Our results suggest there was coamplification of N-myc together with DNA of the chromosome 2p24 and 2p13. Moreover, the fluorescent signals for the amplified chromosomal regions in IMR-32 cells were also easily recognized at a Thus this painting probe can be applied to detect the similar amplification of N-myc in neuroblastoma tissue, and the probe pool for HSR may be used to identify the cancer-relevant genes.
Three different polysaccharide-peptide complexes (PPC, named as Fr-I, Fr-II, and Fr-III) were produced by submerged mycelial culture of an entomopathogenic fungus Cordyceps sphecocephala, and their anticancer activities were investigated in human hepatocarcinoma (HepG2) and neuroblastoma (SK-N-SH) cells. The highest inhibitory effects of PPC on both HepG2 and SK-N-SH cells were achieved with Fr-I, whereas Fr-III with low molecular mass showed lower inhibition effects. Interestingly, the inhibitory effects of the three fractions were increased after protease digestion, suggesting that the inhibitory effects resulted mainly from the carbohydrate moiety, at least in the case of Fr-II and Fr-III, of PPC. The results of DNA fragmentation in PPC-induced apoptotic cells were confirmed by both DNA ladder assay and comet assay. Our investigation also showed that PPC-induced apoptosis of both cancer cells was associated with intracellular events including DNA fragmentation, activation of caspase-3, and modulation of Bcl-2 and Bax. We conclude that PPC has potential as a novel therapeutic agent for the treatment of both HepG2 and SK-N-SH cancer cells without any cytotoxicity against normal cells.
Background: Nitric oxide (NO) is a reactive free radical gas and a messenger molecule. NO has many physiological functions, but excessive NO production induces neurotoxicity. Objective: The present study investigated whether the aqueous extract of Polygala tenuifolia Willdenow possesses a protective effect on NO-induced apoptosis in human neuroblastoma cell line SK-N-MC. Method: For this study, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining, terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay, DNA fragmentation assay, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), Western blot, and caspase-3 enzyme assay were performed. Result: Sodium nitroprusside (SNP) exposure significantly decreased the viability of cells. The cells treated with SNP exhibited several apoptotic features such as increasing of Bax expression, caspase-3 enzyme activity and inhibiting of Bcl-2 expression. On the other hand, the viability of cells pre-treated with the aqueous extract of Polygala tenuifolia Willdenow was increased dose-dependently. The cells pre-treated for 1 h with the aqueous extract of Polygala tenuifolia Willdenow followed by treatment with SNP showed a decreased occurrence of apoptotic features like decreasing Bax expressions, caspase-3 enzyme activity and increasing Bcl-2 expressions. The aqueous extract of Polygala tenuifolia Willdenow reduced apoptotic cell death in neuroblastoma cell line SK-N-MC through the inhibition of Bax-dependent caspase-3 activation and the increasing of Bcl-2 expression. Conclusion: Based on the present results, it is possible that Polygala tenuifolia Willdenow has therapeutic value for the treatment of a variety of NO-induced brain diseases.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
/
v.22
no.2
/
pp.167-174
/
1987
N-myc, a DNA sequence related to the oncogene c-myc, was found to be amplified in untreated primary neuroblastomas and the amplification appeared to be associated with advanced disease at diagnosis and rapid tumor progression. Synthetic peptides have been useful immunogens for generating antisera and monoclonal antibodies to a number of native proteins. In order to identify myc-related protein in the tumor cells, an antiserum against a synthetic hexapeptide (-Glu-Asp-Ile-Trp-Lys-Lys-), whose sequence corresponds to a part of the exon 2 of oncogene N-myc, was prepared by immunizing a rabbit with BSA-conjugated peptide. After ammonium sulfate precipitation and affinity column chromatography, it appeared to be specific to the peptide. Strong nuclear staining in immunoperoxidase method using this serum was observed in both human promyeloid leukemic cell line, HL-60(containing high c-myc copy number), and human neuroblastoma cell line, LA-N-5 (containing high N-myc copy number), whereas LA351 (human lymphoid cell line) cells did not react with the serum. This reaction was completely abrogated by incubating the antiserum with soluble excess peptide. These data suggest that the protein encoded by N-myc could be localized in the nucleus as c-myc protein and this antiserum can be used to detect myc-related tumor cells in clinical samples and to determine if the N-myc expression correlates with genomic amplification in cell lines, untreated primary tumors, and untreated metastases.
The chemical investigation of the 90% EtOH extract from Cicadidae Periostracum led to the isolation and identification of seven known N-acetyldopamine dimers (1-7). These compounds were identified by comparing mass spectrometry data and NMR spectroscopic data with those previously reported. In this study, complete interpretation of 1D and 2D NMR data of 1 and 2 were reported for the first time. In addition, compounds 3 and 4 were isolated from this material for the first time. All isolates were obtained as racemic mixtures, as confirmed by chiral HPLC. Furthermore, we evaluated the neuroprotective activities of compounds 1-7 and found that compounds 1, 5, and 6 significantly attenuated rotenone-induced death of SH-SY5Y neuroblastoma cells at a concentration of 100 μM. Parallel to this result, compounds 3 and 6 displayed antioxidant effects in the cytoplasm, as determined by CM-H2DCFDA fluorescence intensity, while compounds 1 and 5 showed antioxidant effects in the mitochondria, as assessed by MitoSox fluorescence intensity. Overall, these results suggest that some of these compounds protect neuroblastoma cells by ameliorating the release of reactive oxygen species. Further studies are warranted to elucidate the underlying mechanisms by which these compounds exhibit antioxidant and neuroprotective actions.
Purpose : $IFN{\gamma}$ sentitizes many tumor cells to $TNF{\alpha}$ and FASL-mediated apoptosis by enhancing the expression of TNF or FAS/CD95 receptor and modulating the activation of caspase and Bcl-2 family. It has been reported that $IFN{\gamma}$ and $TNF{\alpha}$ synergistically caused differentiation and growth inhibition of neuroblastoma cells. Even though some neuroblastoma cell express FASR/FASL on the cell surface, they could not induce apoptosis by ligation of the FAS/CD95 receptor. But the treatment of $IFN{\gamma}$ is reported to induce apoptosis in some neuroblastoma cell lines through the CD95/CD95L autocrine circuit. In this study, we examined whether $IFN{\gamma}$ could affect $TNF{\alpha}$ and agonistic FAS/CD95 antibody(CH-11)-induced apoptosis against neuroblastoma cell lines that had shown diverse drug sensitivity and resistance. Methods : CHLA-15, CHLA-90 and LA-N-2 neuroblastoma cells were cultured in IMDM and treated with recombinant $IFN{\gamma}$, $TNF{\alpha}$ and CH-11 antibody. Cell viability was measured by DIMSCAN with a fluorescent calcein-AM. Apoptosis was analyzed through flow cytometry using Annexin V-PE and 7-ADD staining and confirmed by pancaspase and caspase-8 blocking experiments. The expression of TNF RI and FAS/CD95 receptor was evaluated by flow cytometry using the corresponding antibody and PE-conjugated secondary antibody. Results : $IFN{\gamma}$ or $TNF{\alpha}$ alone had no demonstrable cytotoxic effects, whereas both cytokines in combination induced apoptosis synergistically in CHLA-15 and CHLA-90 cells. Although there was no cytotoxicity with the ligation of CH-11 alone in CHLA-90 cells, pretreatment of $IFN{\gamma}$ increased the sensitivity of CH-11-mediated apoptosis. The expression of TNFRI and FAS/CD95R were non-specifically enhanced after treatment of $IFN{\gamma}$ without relation to sensitivity to $TNF{\alpha}$ and CH-11. This finding suggest up-regulation of both receptors may contribute to sensitization of $TNF{\alpha}$ and CH-11-mediated apoptosis by $IFN{\gamma}$ in only sensitive cell lines. Conclusion : $IFN{\gamma}$ induced sensitization of $TNF{\alpha}$ and agonistic FAS/CD95 antibody-mediated apoptosis on some neuroblastoma cells through up-regulation of TNFRI and FAS/CD95 receptor.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
/
2002.06b
/
pp.46-46
/
2002
Cdk5, a neuronal Cdc2-like kinase, exhibits a variety of functions in neuronal differentiation and neurocytoskeleton dynamics as well as neuronal degeneration and cell death. However, its role in retinoic acid (RA)-induced differentiation has not been reported yet. We newly found that RA treatment of SK-N-BE(2)C, human neuroblastoma, increased expression of Cdk5 concomitantly with a neuronal specific activator, p35.(omitted)
The effects of acid hydrolysis product of Panax ginseng and MeOH extract of Euphorbia humifusa on the growth of human brain tumor cells were evaluated using U-373 MG human astrocytoma and SK-N-MC human neuroblastoma cells as model cellular systems. These plant extracts induced cytotoxicity in both cells in a dose-dependent manner. These cytotoxic effects were significantly inhibited by GSH, an antioxidant, in both cells. BAPTA/AM, an intracellular $Ca^{2+}$ chelator, significantly blocked the cytotoxic effects of these extracts in U-373 cells, but enhanced these effects in SK-N-MC cells. These results suggest that the plant extracts may be a valuable choice for the studies on the treatment of human brain tumors.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.