• 제목/요약/키워드: N-Acetylgalactosamine

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Glucose Transport through N-Acetylgalactosamine Phosphotransferase System in Escherichia coli C Strain

  • Kim, Hyun Ju;Jeong, Haeyoung;Lee, Sang Jun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제32권8호
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    • pp.1047-1053
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    • 2022
  • When ptsG, a glucose-specific phosphotransferase system (PTS) component, is deleted in Escherichia coli, growth can be severely poor because of the lack of efficient glucose transport. We discovered a new PTS transport system that could transport glucose through the growth-coupled experimental evolution of ptsG-deficient E. coli C strain under anaerobic conditions. Genome sequencing revealed mutations in agaR, which encodes a repressor of N-acetylgalactosamine (Aga) PTS expression in evolved progeny strains. RT-qPCR analysis showed that the expression of Aga PTS gene increased because of the loss-of-function of agaR. We confirmed the efficient Aga PTS-mediated glucose uptake by genetic complementation and anaerobic fermentation. We discussed the discovery of new glucose transporter in terms of different genetic backgrounds of E. coli strains, and the relationship between the pattern of mixed-acids fermentation and glucose transport rate.

해산 극피동물 중의 당단백질의 특성과 이용 I. 해삼 당단백질 및 황산콘드로이친의 화학조성과 특성 (Chemical Compositions of Glycoprotein and Chondroitin Sulfates from Sea Cucumber(Stichopus japonicus))

  • 류홍수;문정혜;서재수
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.72-80
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    • 1997
  • 식용 및 약용으로 이용한 역사가 오래인데도 불구하고 구성성분의 조성에 대하여 충분한 연구가 되어 있지 않은 해삼에서 당단백질과 황산콘드로이친을 추출정량하여 이들의 화학적 조성과 구조적 특성을 GC. MS및 IR로 검토하였다. 동결건조 해삼분말의 화학적인 조성은 sulfate esters함량이 0.90~l.21%, 다당류 함량이 23.08~26.97%였고 이를 구성하고 있는 구성단당류는 fucose의 함량이 30%이상을 차지하는 것을 비롯하여 glucose, N-acetylglucosamine, mannuronic acid, ribose의 5종이 거의 88%이상을 차지하고 있었고 그외 mannose, galactose, N-acetylgalactosaminne, D-glucuronic acid도 소량 검출되었다. 추출당단백질의 sulfate esters의 함량은 0.96~l.13%, 다당류의 함량은 58.7%~62.7%로 나타나고 주요 구성당은 fucose가 30%내외로 가장 많았으며 mannose, glucose와 ribose가 86%이상을 차지하며 galactose, N-acetylgalactosamine, D-glucuronic acid, N-acetylglucosamine도 소량 함유하고 있었다. 동결건조 해삼분말에서 추출한 황산콘드이친의 황산기의 함량은 3.52~3.72%이었다. 이들의 구성성분은 fucose, N-acetylgalactosamine 및 D-glucuronic acid 이며 IR spectrum에서 1240$cm^{-1}$ /의 S=0신축진동과 850$cm^{-1}$ /나 820$cm^{-1}$ /의 C-O-S 신축진동이 나타나 fucose의 $C_4$의 결합위치를 나타내고 있었다.

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군소(Aplysia kurodai)에 분포하는 글루코사미노글리칸의 추출과 기능특성 2. 글루코사미노글리칸의 구조 특성 (Extraction of Glycosaminoglycan from Sea Hare, Aplysia kurodai, and Its Functional Properties 2. Structural Properties of Purified Glycosaminoglycan)

  • 윤보영;최병대;배동원;최영준
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제39권11호
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    • pp.1647-1653
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    • 2010
  • 군소에서 추출한 다당류로부터 DEAE-Sepharose 상에서 glycosaminoglycan(GAG)을 정제하여 기능기의 분포, 구성당의 분포, 이당류의 조성과 당 구조를 조사하였다. 정제한 GAG는 기본 형태를 구성하는 이당류 단위가 전체 구성물 중 55% 이상을 차지하고 있는 다당 복합체였다. 정제한 GAG는 1648 $cm^{-1}$에서 amide I의 특징적인 띠와 1457 $cm^{-1}$에서 C-O stretch, 탄수화물 및 아미노산의 특징, 866 $cm^{-1}$에서 단당류의 특징을 보이는 것으로 나타났다. 정제한 GAG는 fucose, N-acetylgalactosamine, N-acetylglucosamine, glucose, galactose, 미량의 mannose와 xylose로 구성되어 있는 것으로 나타났고, 이중에서 N-acetylgalactosamine, N-acetylglucosamine이 70% 이상을 차지하는 다당 복합체인 heparan sulfate인 것으로 추정되었다. 군소 GAG는 단백질핵의 threonine 잔기에 O-연결된 GlyUA(2S)-GlcNS와 GlyUA-GlcNS(6S) 구조를 가지고 있는 것으로 나타났다.

배양 섬유 세포에 있어서 세포 표면의 미세구조적 특성과 당단백 (lectin WGA 수용체)의 분포 (Fine Structural Characterization and Localization of Lectin Receptors in the Cultured Fibroblast)

  • 김수진;함소영
    • Applied Microscopy
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    • 제31권1호
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    • pp.49-57
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    • 2001
  • 섬유아세포 표면의 미세구조적 특성과 세포표면에 존재하는 당 단백질 말단 GlcNAc(N-acetylglucosamine)와 NeuNAc(N-acetylneuraminic acid)는 섬유세포의 이동과 세포의 인식에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 따라서 섬유세포의 미세구조적 특성을 전자현미경을 사용하여 관찰하였으며, 당 단백질 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켜 전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 배양섬유세포의 표면에 미세구조적 특성은 세포의 분화 정도와 세포의 부위에 따라 다양한 형태를 형성하며, 세포의 배양시간에 따라 정도의 차이는 있으나 일반적인 미세융모의 분포와 세포질 돌기의 분화는 세포의 주위 환경에 따라 다양한 형태로 분화하는 특성이 있는 것으로 확인되었다. 섬유세포의 세포표면에 분포하는 당 단백질 말단의 일종으로 섬유세포의 이동과 세포인식에 관여하는 lectin WGA 수용체 인 sialic acid (GlcNAc; N-acetylgalactosamine, NeuNAc; N-acetyl neuraminic acid)는 세포질의 조면소포체에서 생성되어 액포상태로 이동되어 섬유세포의 외로 분비되고 분비된 sialic acid는 세포의 표면과 돌기의 표면에 당 단백질 말단으로 분화하여 섬유세포의 이동과 세포인식 등의 섬유세포 기능에 관여하는 것으로 규명되었다.

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Lectin-binding properties of chicken primordial germ cells during embryonic development

  • Kim, Duk-Kyung;Seo, Sam-Youl;Lee, Eun-Young;Lee, Seul-Ki;Han, Jae-Yong
    • 한국가금학회:학술대회논문집
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    • 한국가금학회 2001년도 제18차 정기총회 및 학술발표 PROCEEDINGS
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    • pp.69-70
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    • 2001
  • Lectins have great potential as to determine the alternation of the distribution of cell surface carbohydrates during cellular development and differentiation. Here, we investigated the presence and distribution of cell surface carbohydrates on chicken primordial germ cells (PGCs) during the migration and gonadal stages using a variety of lectins. A total of six FITC-labelled lectins from several specificity classes were used: ConA (glucose/mannose), WGA (N-acetylglucosamine), STA (N-acetylglucosamine), DBA (N-acetylgalactosamine/galactose), UEA-I (fucose) and PHA-E (oilgosaccharide). As a results, PGC-specific binding was observed in STA. PGCs of migration stage (2.5- and 5.5-day embyos) were STA-positive whereas PGCs of 10-day embryonic gonad were not. The results suggest that N-acetylglucosamine residuse are present specifically in migrating chicken PGCs and changes during development.

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Carbohydrate Structure of N- and O-linked Oligosaccharides of Human Erythropoietin Expressed in Chinese Hamster Ovary Cells

  • Lee, Dong-Eok;Ha, Byung-Jhip;Kim, Suk-Joon;Park, Ji-Sook;Yoo, Ree-Ann;Oh, Myung-Suk;Kim, Hyun-Su
    • BMB Reports
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    • 제29권3호
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    • pp.266-271
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    • 1996
  • A recombinant human erythropoietin (EPO), expressed in Chinese hamster ovary (CHO) cells, is glycosylated at Asn 24, Asn 38, Asn 83, and Ser 126. After release of the N-linked carbohydrate chains by $peptide-N^{4}-(N-acetyl-{\beta}-glucosaminyl)$ asparagine amidase F, the oligosaccharides were analyzed by FACE (Fluorophore-Assisted Carbohydrate Electrophoresis). The O-linked carbohydrate chain was separated by hydrazine, and analyzed by FACE. The monosacccharide composition of recombinant EPO showed man nose, fucose, galactose, N-acetylglucosamine, N-acetylneuraminic acid, and a trace of N-acetylgalactosamine, which are typical monosaccharides in the glycoproteins from the CHO cell. Sequences of N-linked and O-linked oligosaccharides were determined. The structure and composition of oligosaccharides attached to recombinant human EPO, expressed in the CHO cell, are identical to the reported oligosaccharide structure in human EPO isolated from urine.

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폐흡충조직내 Lectin(WGA) 수용체의 분포 (The Localization of Lectin Receptors in the Tissue of the Paragonimus westermani)

  • 김수진;남현우;이준상;주경환
    • Applied Microscopy
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    • 제30권1호
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    • pp.101-111
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    • 2000
  • 기생충에서 세포 표면에 존재하는 당단백 말단 Glc-NAc(N-acetylglucosa-mine)와 NeuNAc (N-acetylneuraminic acid)가 숙주 면역계를 인식하고 영양물질 흡수와 막 투과성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 이들 당단백 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 폐흡충 피낭유충과 유약성충, 성충의 충체 조직세포에 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켰다. WGA 황금입자 복합체에 반응시킨 폐흡충 발육 단계별 조직을 전자현미경으로 관찰한 결과 폐흡충 피낭유충의 표피합포체에는 황금입자가 고밀도로 표지된 것이 관찰되어 폐흡충 피낭유충 표피세포질에 lectin수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 관찰되었다. 유약성충과 성충의 맹관 막구조물에 WGA 황금입자가 고밀도로 표지되어 맹관의 상피세포 막 구조물에 WGA 수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 확인되었다. 폐흡충 피낭유충과 유약성충 그리고 성충의 배설관 상피의 막구조물에 WGA 황금입자가 표지되어 배설관상피의 막구조물에 WGA 수용체가 분포하는 것으로 확인되었다. 따라서 피낭유충의 표피합포체와 표피세포의 세포질에 분포하는 WGA 수용체인 GlcNAc와 NeuNAc는 숙주의 면역계와 세포인식에 관여하며 유약성충과 성충은 표피세포의 GlcNAc와 NeuNAc는 소멸되고 맹관과 배설관 상피에 GlcNAc와 NeuNAc가 분포하여 영양물질 흡수와 막수송에 의한 재흡수작용이 활발한 것이 확인되었다.

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Exploring the Nucleophilic N- and S-Glycosylation Capacity of Bacillus licheniformis YjiC Enzyme

  • Bashyal, Puspalata;Thapa, Samir Bahadur;Kim, Tae-Su;Pandey, Ramesh Prasad;Sohng, Jae Kyung
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제30권7호
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    • pp.1092-1096
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    • 2020
  • YjiC, a glycosyltransferase from Bacillus licheniformis, is a well-known versatile enzyme for glycosylation of diverse substrates. Although a number of O-glycosylated products have been produced using YjiC, no report has been updated for nucleophilic N-, S-, and C- glycosylation. Here, we report the additional functional capacity of YjiC for nucleophilic N- and S- glycosylation using a broad substrate spectrum including UDP-α-D-glucose, UDP-N-acetyl glucosamine, UDP-N-acetylgalactosamine, UDP-α-D-glucuronic acid, TDP-α-L-rhamnose, TDP-α-D-viosamine, and GDP-α-L-fucose as donor and various amine and thiol groups containing natural products as acceptor substrates. The results revealed YjiC as a promiscuous enzyme for conjugating diverse sugars at amine and thiol functional groups of small molecules applicable for generating glycofunctionalized chemical diversity libraries. The glycosylated products were analyzed using HPLC and LC/MS and compared with previous reports.