Approximately, 15-20% of all cancers worldwide are caused by infectious agents. Understanding the role of infectious agents on cancer development might be useful for developing new approaches to its prevention. Mycoplasma genitalium is a clinically important sexually transmitted pathogen that has been associated with several human diseases. There have been a few studies suggestive of probable roles of Mycoplasma genitalium in cancer development, including prostate and ovarian cancers and lymphomas, but the role of this microorganism like other Mycoplasma species in neoplasia is still conjectural. Considering the prevalence of Mycoplasma genitalium infections and also the emergence of resistant strains, Mycoplasma genitalium needs more attention in the infectious agent cancer-causing research area.
Mycoplasma genitalium은 367개의 보존적 유전자를 가지고 있으며 단독배양이 가능한 원핵생물 중 게놈크기가 최소이다. 본 연구에서는 M. genitalium과 M. genitalium보다 보존적 유전자 수가 적은 14개 원핵생물 즉 세포외 공생을 하는 초고온성 고세균 Nanoarchaeum equitans, 식물 세포 내부 기생성 진정세균 혹은 곤충 세포 내부 공생성 진정세균 13종 등의 원핵생물에 보존적인 대사경로를 검토하였다. 이들은 11~71개의 대사경로를 가졌지만 완전한 대사경로는 1~24개였다. 전체 대사경로에 필요한 효소의 45.8%가 결핍되어 대사경로 구멍(metabolic pathway hole)이 매우 많아, 숙주의 효소와 함께 공유대사경로(shared metabolic pathway)를 나타내거나 필수물질의 상당 부분이 숙주에 의존적일 것으로 사료되었다. 세포막을 통한 물질이동에 필요한 유전자의 개수도 아주 적어 단순확산 내지 숙주의 단백질이 이들의 세포막에서 물질이동의 기능을 할 것으로 사료되었다. tRNA charging 경로만이 15개의 분석 대상 원핵생물 모두에 분포하였지만, 분석 대상 원핵생물들은 각각 5~20개의 tRNA charging 유전자를 보유하였다. 본 연구 결과는 배양 불가능한 식물 세포 내 기생성 그리고 곤충 세포 내 공생성 원핵생물들의 대사경로 이해에 대한 단서와 함께 농작물 피해 방지와 해충구제, 의약품 개발 등에 사용할 기초자료를 제공할 수 있을 것이다.
알려진 단독배양이 가능한 원핵생물 중 최소게놈을 가지고 있는 Mycoplasma genitalium보다 보존적 유전자 수가 적은 14개 원핵생물의 유전자를 보존적 유전자 관점의 COG (Clusters of Orthologous Group of proteins)로 검토하였다. 분석대상은 M. genitalium, 초고온성 고세균으로 세포외공생을 하는 Nanoarchaeum equitans, 진정세균으로 식물의 세포내에 기생하는 병원균인 Candidatus Phytoplasma 속 4개와 식물의 수액을 섭취하는 곤충의 세포내에 공생하는 9종이었다. M. genitalium이 가진 367개의 보존적 유전자 중에서, 284개가 비교대상 다른 원핵생물과 공통이었다. M. genitalium 등 분석대상 원핵생물 모두에 보존적 유전자는 29개로, 이들은 리보솜 구성단백질 22개 등 번역관련 25개, RNA 중합효소의 소단위체 3개, 단백질 접힘관련 1개 등으로 단백질의 중요성을 알 수 있었다. 분석대상 15개 원핵생물 중 Candidatus Phytoplasma속 4개 균주 모두에만 존재하는 COG는 40개 였다. 속(genus)이 서로 다른 나머지 9개의 Candidatus는 곤충에 공생한다는 공통점이 있지만 COG0539 (Ribosomal protein S1) 하나만 공통적이었고, 이는 곤충 세포내 공생체들 사이에 보존적 유전자가 다양함을 나타내는 것으로 판단되었다. 본 연구의 결과는 배양이 불가능한 세균의 보존적 유전자 이해에 대한 단서와 함께 아미노산, 항생제, 의약품, 유기합성 전구체 등을 효율적으로 합성하는 원핵생물의 조작에 필요한 기초자료로 활용이 가능할 것이다.
염기서열 분석이 완료된 9종의 고세균 (Archaea)과 15종의 단백세균 (Proteobacteria)에 대하여 유전자보유 유무와 16S rRNA에 의한 계통수를 neighbor joining method와 통계적 의미를 갖는 bootstrap method (n=1000)를 이용하여 분석하였다. 보존적 COG와 각 미생물 보유 ortholog수에 대한 비율은 4.60% (Mezorhizobium loti)와 56.57% (Mycoplasma genitalium) 사이로 종에 따라서 공통 유전자의 보유정도가 차이를 보이는 것으로 독특한 유전자를 탐색할 수 있는 가능성을 제시하는 결과로 사료되었다. Archaeabacteria와 Proteobacteria 그리고 Firmicutes모두 유전자보유 계통수와 16S rRNA 계통수가 일치하는 부분과 일치하지 않는 부분으로 나뉘어진다는 것을 알 수 있었다.
Kim, Sung Jae;Paik, Doo-Jin;Lee, Joong Shik;Lee, Hyo Serk;Seo, Ju Tae;Jeong, Mi Seon;Lee, Jae-Ho;Park, Dong Wook;Han, Sangchul;Lee, Yoo Kyung;Lee, Ki Heon;Lee, In Ho;So, Kyeong A;Kim, Seon Ah;Kim, Juree;Kim, Tae Jin
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제44권4호
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pp.207-213
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2017
Objective: This study investigated the prevalence of infections with human papillomavirus, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, and Mycoplasma genitalium in the semen of Korean infertile couples and their associations with sperm quality. Methods: Semen specimens were collected from 400 men who underwent a fertility evaluation. Infection with above five pathogens was assessed in each specimen. Sperm quality was compared in the pathogen-infected group and the non-infected group. Results: The infection rates of human papillomavirus, C. trachomatis, U. urealyticum, M. hominis, and M. genitalium in the study subjects were 1.57%, 0.79%, 16.80%, 4.46%, and 1.31%, respectively. The rate of morphological normality in the U. urealyticum-infected group was significantly lower than in those not infected with U. urealyticum. In a subgroup analysis of normozoospermic samples, the semen volume and the total sperm count in the pathogen-infected group were significantly lower than in the non-infected group. Conclusion: Our results suggest that infection with U. urealyticum alone and any of the five sexually transmitted infections are likely to affect sperm morphology and semen volume, respectively.
In this study, we describe our newly-developed sensitive two-stage PCR procedure for the detection of 13 common mycoplasmal contaminants (M. arthritidis, M. bovis, M. fermentans, M. genitalium, M. hominis, M. hyorhinis, M. neurolyticum, M. orale, M. pirum, M. pneumoniae, M. pulmonis, M. salivarium, U. urealyticum). For primary amplification, the DNA regions encompassing the 16S and 23S rRNA genes of 13 species were targeted using general mycoplasma primers. The primary PCR products were then subjected to secondary nested PCR, using two different primer pair sets, designed via the multiple alignment of nucleotide sequences obtained from the 13 mycoplasmal species. The nested PCR, which generated DNA fragments of 165-353 bp, was found to be able to detect 1-2 copies of the target DNA, and evidenced no cross-reactivity with the generated DNA of related microorganisms or of human cell lines, thereby confirming the sensitivity and specificity of the primers used. The identification of contaminated species was' achieved via the performance of restriction fragment length polymorphism (RFLP) coupled with Sau3AI digestion. The results obtained in this study furnish evidence suggesting that the employed assay system constitutes an effective tool for the disagnosis of mycoplasmal contamination in cell culture systems.
유전자보유 유무에 따른 계통수와 16S rRNA에 의한 계통수를 염기서열 분석이 완료된 33종의 미생물에 대하여neighbor joining method와 bootstrap method(n=1,000)를 이용하여 상관관계를 분석하였다. 각 분류그룹에서 공통적으로 보존된 COG와 각 미생물이 보유하고 있는 ortholog 수에 대한 비율을 조사한 결과, Mezorhiaobium lot의 4.60% Mycoplasma genitalium의 56.57% 사이에 분포하는 것으로 파악되었다. 이는 미생물 종류에 따라서 공통 유전자의 보유정도가 차이를 보이는 것으로 독특한 유전자를 탐색할 수 있는 가능성을 제시하는 결과로 사료되었다. 그리고 같은 종 내에 서도 20% 이상의 ortholog가 서로 독립적인 것을 알 수 있었다. Archaeabacteria와 Proteobacteria 그리고 Firmicutes모두 유전자보유 계통수와 16S rRNA 계통수가 일치하는 부분과 일치하지 않는 부분으로 나뉘어진다는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과는 165 rDNA처림 보존적이지 않은 유전자까지 고려한 결과이거나 horizontal gene transfer에 의한 영향 등으로 사료되었다. COC에 기초한 유전자보유 계통수는 생화학 적 실험과 염기서열에 기초한 분류의 중간자적 입장에서 유용유전자 탐색에 이용될 수 있을 것이다.
A lack of investigation in specific regions has impeded the understanding of epidemiological trends in the prevalence of sexually transmitted infections (STIs) in South Korea. To help fill this research gap, this study used multiplex polymerase chain reaction (mPCR) to determine the prevalence of STIs detected in clinical specimens collected from women in Cheonan, South Korea between August 2006 and November 2012, and analyzed the prevalence of STIs according to age, bacterial pathogen, and time period. Of the 1,618 specimens collected from 1,523 patients, 536 (35.2%) tested positive for at least 1 pathogen, with 407 (25.2%) testing positive for 1 pathogen, 103 (6.4%) for 2 pathogens, 20 (1.2%) for 3 pathogens, and 6 (0.4%) for 4 pathogens (n = 697 pathogens total). The median ages of all patients and of STI-positive patients were 37.8 and 33.3 years, respectively, and both decreased annually over the study period. Mycoplasma hominis (MH) was detected in 62.1% of the positive specimens, Ureaplasma urealyticum (UU) in 28.4%, Chlamydia trachomatis (CT) in 23.1%, Trichomonas vaginalis (TV) in 7.8%, Mycoplasma genitalium (MG) in 6.5%, and Neisseria gonorrhoeae (NG) in 2.1%. Whereas the prevalence of MH, MG, and TV infection did not vary greatly over the study period, that of UU decreased by one-fifth and that of both CT and NG increased 4-fold. The results indicate great variability in the rates of infection with each pathogen and a decreasing trend in overall STI prevalence, age of patients seeking STI testing, and age of STI-positive patients.
We developed a multiplex PCR (mPCR) assay to simultaneously detect Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Corynebacterium spp. and seudomona aeruginosa. This method employs a single tube and multiple specific primers which yield 200, 281, 346, 423, 542, and 1,427 bp PCR products, respectively. All the PCR products were easily detected by agarose gel electrophoresis and were sequenced to confirm the specificity of the reactions. To test this method, DNA extracted from urine samples was collected from 96 sexually transmitted disease or prostatitis patients at a local hospital clinical center, and were subjected to the mPCR assay. The resulting amplicons were cloned and sequenced to exactly match the sequences of known pathogenic isolates. N. gonorrhoeae and Corynebacterium spp. were the most frequently observed pathogens found in the STDs and prostatitis patients, respectively. Unexpectedly, P. aeruginosa was also detected in some of the STD and prostatitis samples. More than one pathogen species was found in 10% and 80.7% of STD and prostatitis samples, respectively, indicating that STD and prostatitis patients may have other undiagnosed and associates. The sensitivity of the assay was determined by sing purified DNA from six pathogenic laboratory strains and revealed that this technique could detect pathogenic DNA at concentrations ranging from 0.018 to $1.899\;pg/{\mu}l$. Moreover, the specificities of this assay were found to be highly efficient. Thus, this mPCR assay may be useful for the rapid diagnosis of causative infectious STDs and prostatitis. useful for the infectious STDs and prostatitis.
After many genome projects, algorithms and software to process explosively growing biological information have been developed. To process huge amount of biological information, high performance computing equipments are essential. If we use the remote resources such as computing power, storages etc., through a Grid to share the resources in the Internet environment, we will be able to obtain great efficiency to process data at a low cost. Here we present the performance improvement of the protein secondary structure prediction (PSIPred) by using the Grid platform, distributing protein sequence data on the Grid where each computer node analyzes its own part of protein sequence data to speed up the structure prediction. On the Grid, genome scale secondary structure prediction for Mycoplasma genitalium, Escherichia coli, Helicobacter pylori, Saccharomyces cerevisiae and Caenorhabditis slogans were performed and analyzed by a statistical way to show the protein structural deviation and comparison between the genomes. Experimental results show that the Grid is a viable platform to speed up the protein structure prediction and from the predicted structures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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