Journal of information and communication convergence engineering
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제10권2호
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pp.210-214
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2012
A microtiter well plate DNA hybridization method using Mycobacterium kansasii-specific rpoB DNA probe (kanp) were evaluated for the detection of M. kansasii from culture isolates. Among the 201 isolates tested by this method, 27 strains show positive results for M. kansasii, but the other 174 isolates were negative results for M. kansasii. This result was consistent with partial rpoB sequence analysis of M. kansasii and the result of biochemical tests. The negative strains by this DNA-DNA hybridization method were identified as Mycobacterium tuberculosis (159 strains), Mycobacterium avim (5 strains), Mycobacterium intracellulare (8 strains), and Mycobacterium flavescens (2 strain) by rpoB DNA sequence analysis. Due to high sensitivity and specificity of this test result, we suggest that DNA-DNA hybridization method using rpoB DNA probes of M. kansasii could be used for the rapid and convenient detection of M. kansasii.
Kim, Moon Sung;Han, Ji Won;Jin, Su Sin;Lee, Jong Min;Hah, Jick Hwan;Kim, Youn Jeong;Kim, Seung Joon;Kang, Moon Won;Kang, Ji Young
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제75권4호
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pp.157-160
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2013
Incidence of nontuberculous mycobacterium (NTM) pulmonary disease is increasing with the wider recognition and development of diagnostic technology. Mycobacterium kansasii is the second most common pathogen of NTM pulmonary disease in human immunodeficiency virus (HIV)-infected patients. However in Korea, the incidence of M. kansasii pulmonary disease is relatively low, and there has been no report of M. kansasii pulmonary disease with bronchial involvement in HIV patients, to the best of our knowledge. We report a case of M. kansasii pulmonary disease presenting with endobronchial lesions in an HIV-infected patient complaining of chronic cough with bilateral enlargements of hilar lymph nodes on chest X-ray.
DNA-DNA hybridization method with four oligonucleotide-specific probes was used simultaneously for differentiation and identification of four Mycobacterium species (Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii). This DNA-DNA hybridization method with 4 oligonucleotide-specific probes, which targets in the rpoB region of 4 Mycobacteria species, respectively, was tested on 322 clinical isolates. Using DNA-DNA hybridization method, we detected M. tuberculosis (282 strains), M. avim (7 strains), M. intracellulare (9 strains), and M. kansasii (3 strain) from 322 clinical isolates. This result was compared with conventional biochemical test and rpoB DNA sequence analysis of this clinical isolates. We confirmed identification of Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii with high sensitivity (100 %) and specificity (100 %). This DNA-DNA hybridization method could be performed within 4 hours at least. Therefore, we suggest that DNA- DNA hybridization method using 4 rpoB DNA probes of Mycobacteria could be used for accurate, rapid, convenient detection and identification of Mycobacterium tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, and M. kansasii in clinical samples.
Pneumothorax is an extremely rare complication of non-tuberculous mycobacterial infection. A 52-year-old man presenting with difficulty breathing and chest pain was admitted to our hospital. A right-sided pneumothorax was observed on chest radiography and chest computed tomography showed multiple cavitating and non-cavitating nodules with consolidation in the upper to middle lung zones bilaterally. Serial sputum cultures were positive for Mycobacterium kansasii, and he was diagnosed with pulmonary M. kansasii disease complicated by tension pneumothorax. After initiation of treatment including decortications and pleurodesis, the patient made a full recovery. We herein describe this patient's course in detail and review the current relevant literature.
M. kansasii는 M. avium complex에 이어 NTM 폐질환의 원인균 중 두 번째로 흔하다고 외국에서는 보고되었다. M. kansasii는 M. avium complex와 마찬가지로 과거부터 잘 알려진 상엽공동형의 형태와 함께 기관지확장증에 다발성 결절이 동반된 형태가 새롭게 알려지고 있다. 다른 NTM 폐질환과 달리 M. kansasii 폐질환은 INH, RFP, EMB 등 항결핵제에 치료반응이 매우 좋기 때문에 정확한 진단과 함께 적절한 약제와 치료기간의 선택이 중요하다. 국내에서는 임상검체에서 M. kansasii가 분리되는 빈도가 매우 낮으며, 아직까지 정상면역을 가진 성인에서 M. kansasii 폐질환으로 진단된 증례가 보고되지 않았다. 저자들은 1997년 미국흉부학회의 NTM 폐질환 진단기준에 따라 M. kansasii 폐질환을 진단하고 치료한 3명의 환자를 경험하여 이를 보고하는 바이다.
폐종괴로 발현하는 M. kansasii 감염은 흔하지 않으며 기관지 탄분섬유화증을 동반한 M. kansasii 폐감염에 대한 보고는 아직 없었다. 기저질환 없이 면역력이 정상인 비흡연자에서 우하엽의 폐종괴로 발현하고 기관지 탄분섬유화증을 동반한 M. kansasii 폐감염에 대하여 표준 치료로 호전되고 있는 증례를 경험하였기에 보고하는 바이다.
배경: 결핵은 전세계적으로 단일 원인균으로는 가장 높은 치사율을 가진 질병이다. 결핵의 치료에 있어서 마이코박테리아를 빠르고 정확하게 확인하는 것이 필수적이다. 본 연구에서는 임상 객담 검체의 도말 슬라이드에서 결핵균과 비결핵 항산균의 감별을 위해 Peptide Nucleic Acid (PNA) Probe를 이용한 FISH assay를 평가하고자 한다. 방법: 결핵균과 비결핵 항산균의 16s rRNA를 타겟으로 한 PNA probe를 합성하였다. 각 probe의 특이도는 표준 균주인 Mycobacterium tuberculosis ATCC 13950, M. kansasii ATCC 12479, 임상 검체에서 분리된 마이코박테리아 3종(M. abscessus, M. avium, and M. intracellulare) 그리고 호흡기계에서 흔히 분리되는 10종류의 박테리아를 이용하였다. Centers for Disease Control and Prevention (CDC)의 Acid fast bacili (AFB) 염색 기준상 trace 이상인 128개의 임상 객담 검체를 이용하여 Probe의 성능을 평가하였다. PNA FISH와 항산균 염색결과는 CDC 기준에 따라 단계를 분류하고 서로 비교하였다. 결과: 결핵균과 비결핵 항산균 특이 PNA probe는 결핵균과 M. kansasii 표준 균주 그리고 임상검체에서 분리된 3종의 마이코박테리아에 대해 특이적인 반응을 보였고 다른 박테리아와 교차반응을 보이지 않았다. 또한 89개의 결핵균 배양 양성 객담 검체와 29개의 비결핵 항산균 배양 양성 객담 검체에 각각 특이적인 반응을 보였고 CDC 기준에 따라 분류한 PNA FISH와 AFB염색 결과는 2+ 이상의 검체에서 서로 잘 일치하였다. 결론: PNA FISH 방법은 임상 객담 검체에서 결핵을 진단하고, 항산균과 비결핵 항산균을 구분하는데 있어서 민감하고 정확한 결과를 보였다.
Mycobacterium은 느리게 성장한다. 따라서 고체배지는 8주, 액체배지는 6주 동안 사용하여야 한다. 이 연구의 목적은 Mycobacterium을 빠르게 성장시킬 수 있는 성장 인자를 찾고, 신속한 동정을 위한 고체배지를 개발하는 데 도움을 주는 것이다. $Difco^{TM}$ Mycobacteria 7H11 agar (Becton, Dickinson and Company)에 activated charcoal, defibrinated sheep blood, L-ascorbic acid를 첨가하여 10종의 Mycobacteria 가지고 Mycobacterium 성장 인자 3가지를 평가하였다. 집락의 검출 시간 및 판독 용이성을 현재의 방법과 비교하였다. 빠르게 성장하는 Mycobacterium 있어 새로운 배지와 기존의 배지에서 검출 시간의 차이는 새로운 배지가 더 빠르다는 것을 확인시켜 주었다. M. kansasii와 M. intracelluare는 7H11 배지보다 7H11 C 배지에서 더 빠르게 자라는 것으로 확인되었다. MTB는 7H11 C 배지에서 다른 배지보다 빠르게 성장하였다. 이 연구는 2 두 가지 성장 인자가 빠르게 성장하는 Mycobacteria과 느리게 성장하는 Mycobacteria에 영향을 주는 것으로 확인되었다. 7H11 C 배지는 색상 대비로 인하여 10종의 모든 Mycobacterium에서 기존배지보다 더 뛰어난 판독 용이성을 보여 주었다. 특히, MTB가 성장했을 경우 집락의 크기가 다른 배지에서 보다 커서 시각화가 용이하였다.
A study on the production of mycobacterial antogens has been made in order to improve immunological reactivity and specificity, which have long been explored for the better use of immunological diagnosis of mycobacterial infections. Instead of culture filtrate cell extract was used as a starting material for the production of antigens in this study. Cell extract was fractionated though several steps such as salting out, gel filtration and ion exchange column chromatography and reactivity and specificity of the fractions so produced were enaluated by the various serological methods. The result showed that the species-specific antigenic components distributed mostly in the fractions, Tc of M. tuberculosis, Kc of M. kansasii, Sa of M. scrofulaceum, Aa of M. avium and Fa, Fb, Fc (FF1) of M. fortuitum, which were fractionated by ion exchange column prior to concentrating by salting out and molecular sieving.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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