Park, Sunghoon;Suh, Gee Young;Chung, Man Pyo;Kim, Hojoong;Kwon, O Jung;Koh, Won-Jung
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.64
no.4
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pp.293-297
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2008
Mycobacterium fortuitum usually causes colonization or transient infection in patients with underlying lung disease, such as prior tuberculosis or bronchiectasis. The majority of these patients may not need to receive antibiotic therapy for M. fortuitum isolates. We report here on a patient with M. fortuitum lung disease and who was successfully treated with combination oral antibiotic therapy. A 53-year-old woman was referred to our institution because of purulent sputum and dyspnea. A chest radiograph and computed tomography scan revealed cavitary consolidation in the left upper lobe and multiple small cavities in the left lower lobe. Numerous acid-fast bacilli (AFB) were seen in multiple sputum specimens and M. fortuitum was identified by culture from the sputum specimens. The patient received antibiotic treatment including clarithromycin, ciprofloxacin and sulfamethoxazole, because her symptoms were worsening despite conservative treatment. Sputum conversion was achieved after one month of antibiotic therapy. Both the patient's symptoms and radiographic findings improved after 10 months of antibiotic therapy.
Clostridium perfringens (C. perfringens) and Mycobacterium fortuitum (M. fortuitum) are associated with considerable diseases in animals and human. In this study, the disinfection efficacy of a commercial disinfectant composed to povidone-iodine (PVI) was evaluated against C. perfringens and M. fortuitum. A bactericidal efficacy test by broth dilution method was used to determine the lowest effective dilution of the disinfectant following exposure to C. perfringens and M. fortuitum for 30 min at $4^{\circ}C$. The disinfectant and test bacteria were diluted with hard water (HW) or organic matter suspension (OM) according to treatment condition. On HW condition, the bactericidal activity of the disinfectant against C. perfringens and M. fortuitum was 50 and 80 fold dilutions, respectively. On OM condition, the bactericidal activity of the disinfectant against both C. perfringens and M. fortuitum was 15 fold dilutions. As the disinfectant composed to PVI possesses bactericidal efficacy against C. perfringens and M. fortuitum, the disinfectant solution can be used to control the spread of bacterial diseases.
The steroid 9${alpha}$-hydroxylase activity has been detected in cytosol fraction, $100,00{\times}g$ supernatant of cell free extract of Mycobacterium fortuitum. The activity was not linear with protein concentration in the assay suggesting 9${alpha}$-hydroxylase is a multicomponent enzyme. The 9${alpha}$-hydroxylase system was partially purified through fractional saturation of ammonium sulfate, strong anion exchange (Mono Q) column chromatography, gel filtration (Superose 12) column chromatography, and testosterone affinity gel chromatography. Ammonium sulfate 50~60% saturated fraction of the cytosol gave 9${alpha}$-hydroxylase activity. For further purification, the half-saturated ammonium sulfate fraction was applied to Mono Q, Superose 12, or affinity gel column. The purification factors of 9${alpha}$-hydroxylase containing fraction after Mono Q, Superose 12, and affinity gel chromatography was 13, 11, and 17 respectively.
Epidemiological studies are important in both the prevention and treatment of mycobacterial infections. This study was initiated to establish the pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) method, which are not yet extensively studied. The most apprpriate restriction endonucleases included DraI, AsnI, and XbaI. The optimal PFGE condition was different according to the enzymes used. Two stage PFGE was performed, in case of DraI first stage was performed with 10 seconds of initial pulse and 15 seconds of final pulse, while the second stage was performed with 60 seconds of initial pulse and 70 seconds of final pulse. The electrophoresis time for DraI-PFGE was 14 hours for each stage. Electrophoresis was performed for 22 hours, in case of XbaI, with 3 seconds of initial pulse and 12 seconds of final pulse. Electrophoresis was performed for 22 hours, in case of AsnI, with 5 seconds of initial pulse and 25 seconds of final pulse. In all cases the voltage of the electrophoresis was maintained constantly at 200 voltage. Standard mycobacterial strains, which included Mycobacterium bovis BCG, M. tuberculosis, and M. fortuitum, could not be differentiated by PFGE analysis. PFGE analysis was performed to differentiate 9 clinically isolated M. fortuitum strains using AsnI. All M. fortuitum strains showed different genotypes except 2 strains. Cluster analysis divided M. fortuitum strains into 2 large groups. PFGE analysis was performed to further differentiate M. fortuitum isolates using XbaI. The undifferentiated 2 M. fortuitum strains showed different PFGE patterns with Xba I. Cluster analysis of the XbaI-PFGE patterns showed more complex grouping than AsnI-PFGE patterns, which showed that XbaI-PFGE analysis was better than AsnI-PFGE in M. fortuitum genotyping. The top dissimilarity values of AsnI-PFGE and XbaI-PFGE were 0.74 and 0.75, respectively. This value was higher than that of arbitrarily primed polymerase chain reaction (AP-PCR) analysis and lower than that of restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. This suggested that PFGE can be used as a supportive or alternative genotyping method to RFLP analysis.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.363-373
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1986
We developed a giant colony test system with rapidly growing mycobacteria by stab-culture with a loopful inoculum of cells into Middlebrook 7H10 agar medium containing soluble extracts of the fruits of Gardenia jasminoides(7H10-crocin agar medium) and assessed the significance of the giant colony test with 28 strains of 10 clusters of rapidly growing mycobacteria classified by the simple biological 5-test characters. Of the 10 clusters of mycobacteria tested, some of strains which belonged to cluster No. 1a, 5a and 11a did grow as gravis types, whereas most of other clusters gave mitis or intermedius types in their colonial sizes at 12 days culture. By this test, pathogenic strains of M. fortuitum-chelonei complex which belonged to cluster No. 5a, b, 7a and 8a, b could be divided into gravis, intermedius and mitis colony types and the gravis ones were characterized by bluish-white "mushroom-shaped" colonies with central complexes in the texture, whereas the intermedius gave grayish-white "flower-shaped" colonies with radiated folds, but without any central complexes. The mitis colonies were characterized by grayish-white smooth or smooth mucoid colonies and were common among the clusters in their shapes. The colony of M. chelonei was bluish-white mitis type and was characterized by its hilly rhizoid colony. The gravis colony of cluster No. 1a identified as M. phlei was characterized by yellow "round straw- mat-shaped" or "chrysanthemum-shaped" colony with whole complexes in the texture, and the gravis colonies of the cluster No. 11a gave grayish-white "flower-shaped" colonies with central stamens, radiating trough and fine cup-shaped strands in the texture. The four colony types of pathogenic species of M. fortuitum-chelonei complex on 7H10-crocin agar medium were distinctive from those of other clusters of rapidly growing mycobacteria and these results indicated that the giant colony test, in conjunction with the simple 5-test characters, would be of value in the differentiation of M. fortuitum complex from other clusters of rapidly growing mycobacteria.
A study on the production of mycobacterial antogens has been made in order to improve immunological reactivity and specificity, which have long been explored for the better use of immunological diagnosis of mycobacterial infections. Instead of culture filtrate cell extract was used as a starting material for the production of antigens in this study. Cell extract was fractionated though several steps such as salting out, gel filtration and ion exchange column chromatography and reactivity and specificity of the fractions so produced were enaluated by the various serological methods. The result showed that the species-specific antigenic components distributed mostly in the fractions, Tc of M. tuberculosis, Kc of M. kansasii, Sa of M. scrofulaceum, Aa of M. avium and Fa, Fb, Fc (FF1) of M. fortuitum, which were fractionated by ion exchange column prior to concentrating by salting out and molecular sieving.
The NADH reductase component of the steroid 9.alpha.-hydroxylase from Mycobacterium fortuitum was purified to homogeneity. Recovery of the enzyme from the 50-60% ammonium sulfate saturated fraction was 49%, with a purification factor of 100-fold. The NADH reductase has a relative molecular of 60 KDa as determined by SDS-PAGE. The absorption maxima at 410 and 450 nm indicate the presence of iron-sulfur group and flavin. These prosthetic groups seemed to function as redox groups that transfer electrons from NADH to the following protein. The $K_M$ value for NADH as substrate was $68{\mu}M$. The $NH_2$-terminal amino acid sequence of the reductase was determined as Met-Asp-Ala-Ile-Thr-Asn-Val-Pro-Leu-Pro-Ala-Asn-Glu-Pro-Val-His-Asp-Tyr-Ala-Thr. This sequence does not show a homology with the $NH_2$ -terminal sequences reported for the reductase component of other monooxygenases, suggesting that the NADH reductase component of the steroid 9.alpha.-hydroxylase system is novel.
Kim, S.J.;Hong, Y.P.;Bai, G.H.;Kim, S.C.;Jin, B.W.;Chung, C.M.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.17
no.1
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pp.87-93
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1982
Two cases of pulmonary disease in a 54 year-old female and a 70 year-old male patient due to Mycobacterium avium-intracellulare complex(MAIC) and a case of pulmonary infection ina 69 year-old male patient due to M. fortuitum(MF) were found recently in this institute. All three patients had a long history of anti-tuberculous chemotherapy because they were initially diagnosed as pulmonary tuberculosis. A 70 year-old male patient infected with MAIC had an unsuccessful chemotherapy history of isoniazid(INH), para-aminosalicylic acid(PAS) and streptomycin(SM) with an incomplete, temporary, symptomatic improvement, for three years since 1964 when he was first diagnosed as pulmonary tuberculosis on physical examination. A 54 year-old female patient infected with MAIC also had an unsuccessful chemotherapy history with the various anti-tuberculous drugs since 1958. Both patients discharged large number of MAIC in their sputum specimens for at least more than one year, but no M. tuberculosis at all. A 69 year-old male patient infected with MF was diagnosed as moderately advanced pulmonary tuberculsis in 1977. Combined chemotherapy with INH+PAS+pyrazinamide(PZA) improved his clinical symptoms, however, his chest radiograph was deteriorated again in 1980 one year after he stopped therapy. Therefore he started chemotherapy again with INH+ethionamide(TH)+cycloserine(CS) but no improvement was noticed. MF was cultured from his sputum in August 1981 and he continuously discharged the same bacilli until last examination of January 1982. Whether all three patients were initially !infected with nontuberculous mycobacteria or complicated with predisposing tuberculosis was not clear because there were no reliable bacteriological examination records.
It has been reported that extracts of globe thistle (Echinops spp.) and thistle (Circium spp., Carduus spp. and Onopordum spp.) have anti-bacterial and anti-fungal activities. Methanol extracts of Echinops setifer and Carduus spp. were used to test and see if the extracts of these plants could suppress growth of Mycobacterium smegmatis and Mycobacterium fortuitum. Although extract of Echinops setifer showed no anti-mycobacterial activities, extract of Carduus spp. showed inhibition zones when tested with filter discs. Genomic DNA was isolated from Carduus spp. and PCR was performed to clone a DNA fragment containing ITS1, 5.8S rRNA gene and ITS2. A 733-bp PCR product was obtained and its DNA sequence was reported to the GenBank (accession number GU188570). BLAST search of the obtained DNA sequence did not show a match with any DNA sequences in the Genbank. Carduus crispus and Carduus defloratus had the closest phylogenetic relationships to this plant.
Clinical strains of Mycobacterium tuberculosis, M. terrae complex, M. gordonae, M. avium-intracellulae complex, and M. fortuitum from Korean patients were isolated and analyzed by comparing large restriction fragment (LRF) patterns produced by digestion of genomic DNA with infrequent-cutting endonucleases like AsnI and XbaI. and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Three M. tuberculosis, two M. terrae complex, two M. gordonae, two M. avium-intracellulae complex, and two M. fortuitum strains were compared by using AsnI and XbaI. and this allowed easy visual separation of all epidemiologically unrelated strains. PFGE exhibits different DNA restriction patterns which are easy to compare. Genome size of the strains roughly ranged from 3020 to 3335 kb. The LRF patterns are useful for epidemiologic studies of tuberculosis with regard to drug resistance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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