Kim, Young Hoe;Park, So Hyeon;Kim, Gyeong Hee;Jeong, Byoung Ryong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권1호
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pp.51-54
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2004
This study was conducted to examine differences in shoot regeneration among chrysanthemum cultivars. Leaf explants of chrysanthemum cultivars 'Sulhwa', 'Puma', 'Geummokseo' and 'Sulpoong' were used. Explants cultured on the medium for 2 weeks formed calli at the cut surfaces. Shoots regenerated on MS basal medium supplemented with various concentration combinations of NAA and BAP. Explants were cultured under cool-white fluorescent lamps with a light intensity of $40\mu{Mm}^{-2}$.$s^{-1}$ for 16 $hday^{-1}$, at $25^{\circ}c$ and 70-80% relative humidity. 'Geummokseo' and 'Sulpoong' were the most responsive cultivars in shoot regeneration. Most effective medium for 'Sulhwa' and 'Puma' was MS basal medium supplemented with 10.0 $\mu{M}$ NAA and 5.0 $\mu{M}$ BAP and for 'Geummokseo' MS supplemented with 10.0$\mu{M}$ NAA and 20.0$\mu{M}$ BAP. Regeneration of multiple shoots was observed on MS basal medium supplemented with 1.0$\mu{M}$ or 10.0 $\mu{M}$ NAA and 5.0$\mu{M}$ BAP. High frequency regeneration of adventitious shoots from leaf explants and efficient induction of root from these regenerated shoots were obtained.
한국 고유의 전통주 및 일반 알코올 음료에 대한 ethyl carbamate 의 함량을 알아보기 위하여 국내에서 시판되고 있는 술을 dichloromethane 용매로 추출한 후 GC/MS-SIM방법에 의해 분석하였다 분석결과 ethyl carbamate는 한국고유의 전통주에 $4.6-50.2{\mu}g/L$ 비 증류주에 $27.8-45.4{\mu}g/L$ 위스키에는 $24.8-55.1{\mu}g/L$ 함유되어 있음을 알 수 있었다. 회수율은 83.3-104.8 %의 값을 얻었고, 상대표준편차는 1.8-14.81% 검출한계는 $0.3{\mu}g/L$이었다.
Direct injection (DI) and solid phase extraction (SPE) methods for the simultaneous determination of pendimethalin (PDM) and dinoseb (DNS) in environmental water have been optimized using the ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method. The limits of quantification (LOQs) of PDM and DNS were $0.01{\mu}g/L$ using the DI method and $0.0001-0.0002{\mu}g/L$ using the SPE method. The precision by SPE UPLC-MS/MS was less than 11 % for intra-day and inter-day analyses. When the proposed SPE method was used to analyze two analytes in environmental water, PDM was detected in a concentration range of $0.0002-0.011{\mu}g/L$ in 31 samples of the 114 surface water samples, and DNS was detected in a concentration range of $0.0005-0.045{\mu}g/L$ in 17 samples of the 114 surface water samples analyzed. When the DI method was used to analyze target compounds in the same samples, the detected concentrations of the two analytes were within 21% in samples with concentrations above $0.01{\mu}g/L$. The DI UPLC-MS/MS method can thus be used for the routine monitoring of PDM and DNS in environmental water, and the SPE LC-MS/MS method can be used for the determination of the ultra-trace PDM and DNS residues in environmental water.
A liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed and validated for the determination of caffeine in forensic aqueous sample. The centrifuged sample ($100{\mu}l$) was diluted 50-fold with distilled water. The diluted sample ($400{\mu}l$) was then diluted further with $200{\mu}l$ of 0.1% formic acid solution and $400{\mu}l$ of acetonitrile containing 500 ng of caffeine-(3-methyl-$^{13}C_3$) prior to LC-MS/MS analysis. The mobile phase was composed of 0.1% formic acid in distilled water (A) and acetonitrile (B). Chromatographic separation was performed by using a Zorbax SB-C18 ($100mm{\times}2.1mm$ i.d., $3.5{\mu}m$) column and caffeine was eluted within 1.1 min. Linear least-squares regression with a 1/x weighting factor was used to generate a calibration curve with the coefficients of determination ($r^2=0.9983$). The lower limit of quantification was $25ng/ml$ for the analyte. The process efficiency was 98.6~100.1%. Intra- and inter-day precisions were not more than 2.1% and 1.7%, while intra- and inter-day accuracies were ranged from -6.8 to 4.5%, respectively. The suitability of the method was examined by analyzing unknown forensic aqueous samples.
We investigated the most effective pre-treatment processes and LC/MS/MS condition for microcystins analysis. With a step-by-step pre-treatment, efficiencies of several established methods were compared. At the level of cell burst, sonication method was found to be the most efficient. As a mycrocystins first extraction solvent, 5% acetic acid showed the highest efficiency. An isolation and recovery rate of mycrocystins of ODS Sep-Pak $C_{18}$ cartridge was higher than HLB SPE cartridge. As a final elution solvent from cartridge, 100% MeOH had a better efficiency than others. Using a LC/MS/MS, effective analytical methods were established. C18 reverse column was used and gradient elution was performed with using acetonitrile, 0.1% formic acid as a mobile phase. We analysed to 0.8 mL/min flow rate fit to the $5{\mu}m$ particle size column and $55^{\circ}C$ housing temperature. The validity of established analytical method was evaluated that MDL as average $0.050{\pm}0.014{\mu}g/L$ and LOQ as average $0.160{\pm}0.045{\mu}g/L$ had a good sensitivity over 40 magnification rather than $2{\mu}g/L$ detection limit of HPLC.
주류 중 에틸카바메이트의 함량을 조사하기 위해 시중에 유통되는 시료를 고체상 정제컬럼(충진제: 규조토)에 흡착시켜 디클로로메탄으로 용출시킨 후 GC/MS-SIM 방법에 의해 분석하였다. 적용된 분석법의 회수율은 85.2-87.9% 이었으며 변이계수는 0.7-1.9%, 검출한계는 $2{\mu}g/kg$, 정량한계는 $10{\mu}g/kg$이었다. 에틸카바메이트의 함량을 조사한 결과는 대상 주류의 유형에 따라 검출수준에 차이를 나타냈으며, 평균 검출수준은 리큐르 $194{\mu}g/kg$, 과실주 $105{\mu}g/kg$, 일반증류주 $62{\mu}g/kg$, 청주 $28{\mu}g/kg$, 약주 $15{\mu}g/kg$, 기타 주류 $12{\mu}g/kg$, 소주 불검출 이었다.
본 연구에서는 IC-MS/MS 시스템에 내부표준물질($^{35}Cl^{18}O_4^-$)을 이용하여 식품에서의 정확한 perchlorate 분석을 위한 최적화된 전처리 방법을 제시하였다. Perchlorate를 분석하기 위한 식품의 전처리는 미국 FDA에서 제안하는 perchlorate 분석을 위한 식품 전처리 방법을 변형하여 더욱 재현성이 높은 방법을 제시하였으며, 제시된 분석법의 신뢰성을 검증하기 위한 유효성의 검토는 음용수, 우유 및 분유, 쌀, 채소류, 해조류 등 다양한 식품들을 대상으로 MDL과 LOQ를 설정하여 외국의 사례와 비교 확인하였다. 또한 시료에 표준물질을 첨가하여 회수율 및 재현성을 확인하였다. 본 연구에서 수행된 5 ${\mu}g/L$ 및 5, 10 ${\mu}g/kg$의 perchlorate 회수율 시험 결과 모든 시료에서 %RSD는 적합범위(<20%) 내에 포함되었고 평균 %RSD는 6.4%로 나타났으며, %Recovery도 98-105%로 적합한(80% < x < 120%) 범위로 나타났다. 따라서 본 연구에서 제시한 정확한 perchlorate 분석을 위한 식품 시료의 전처리 방법은 반복 분석을 통한 시험의 정확도 및 재현성을 확인할 수 있었으며, 향후 다른 식품에 대한 perchlorate 분석에도 적용하여 관련분야 연구에 크게 기여할 것으로 기대된다.
견과류 중에 있는 트리코테센계 곰팡이독소 오염도를 조사하기 위하여 LC-MS/MS를 이용한 정확성과 신뢰성을 동시에 확보할 수 있는 분석방법을 개발하였다. 견과류 중 트리코테센계 곰팡이 독소는 QuEChERS 추출 및 EMR-Lipid-dSPE 정제과정을 통하여 분석에 사용되었다. 검량선 작성을 위하여 트리코테센계 곰팡이독소 10종에 대하여 $2.00{\sim}75.00{\mu}g/kg$의 범위로 혼합표준용액을 제조하여 실험하였으며, 상관계수는 모두 0.998 이상으로 높은 직선성을 나타내었다. 분석방법의 검출한계는 $0.41{\sim}3.57{\mu}g/kg$로 나타났으며, 정량한계는 $1.23{\sim}10.82{\mu}g/kg$로 나타났다. 또한 트리코테센계 곰팡이 독소 10종에 대하여 각각 저, 중, 고 3가지 농도로 처리하여 회수율 실험을 수행한 결과 81.84~96.87%로 나타났다. 확립된 분석법으로 견과류 중 땅콩을 대상으로 오염도를 조사한 결과 1종에서 deoxynivalenol이 검출되었다. 이러한 결과를 바탕으로 확립된 시험법은 견과류 중 트리코테센계 곰팡이 독소 분석에 적합함을 확인할 수 있었으며 견과류 중 트리코테센계 곰팡이 독소 검출 가능성을 확인한바 보다 다양한 종류의 견과류에 대한 모니터링 조사가 필요한 것으로 판단된다.
온라인 고체상 추출을 이용한 LC/MS/MS를 사용하여 carbaryl과 유기인계 농약 7 종을 동시에 분석하는 방법을 확립하였다. 분석 대상농약은 carbaryl, diazinon, methyl-demeton, fenitrothion, malathion, parathion, phenthoate, EPN 등 8 종이다. 본 연구에서는 온라인 고체상 추출과 LC/MS/MS의 ESI positive mode로 전처리 없이 물 시료 $500{\mu}L$를 직접 주입하여 10분안에 분석하였다. 농약 8 종의 회수율은 86.8~100 % 였고, 정확도는 90.6~98.8 %로 90 %이상이었고, 정밀도는 1.3~5.2 %로 나타났으며 검출한계 및 정량한계는 각각 $0.05{\sim}0.28{\mu}g/L$, $0.16{\sim}0.89{\mu}g/L$ 였다. $0.5{\mu}g/L$에서 $8.0{\mu}g/L$까지 다섯 개의 농도로 검량선을 작성한 결과 모든 물질의 상관계수(r2)가 0.99이상을 나타냈다. 방법의 유효성 평가를 한 결과 모든 내용에서 적합하므로확립한 분석방법으로 수질 시료에서 농약을 조사한 결과 모두 검출되지 않았다.
1. 지황의 잎조직과 줄기조직을 생산조절물질이 첨가된 MS배지에 치상하였을 때 Quincrac, NAA, 2.4-D에서 보다 TDZ에서 더 많은 신초분화가 일어났다. 뿌리분화는 신초분화가 잘되었던 TDZ에서와는 달리 NAA가 첨가된 배지에서 잎조직을 치상했을 때 분화가 많이 일어나TEk. 2. 지황의 잎조지과 줄기조직을 $B_5$배지에 치상하였을 때 Quinerac, NAA, 2.4-D에서보다 TDZ에서 신초분화가 많이 일어났다. $B_5$배지에서는 Quincrac, NAA, 2.4-D 모두 0.01mg/l에서 분화가 일어났다. 뿌리의 분화에서 $B_5$배지에서는 NAA, TDZ 모두 분화가 잘 되었다. $B_5$배지에서는 Quincrac과 2.4-D에서도 뿌리분화의 효율이 높았다. 3. 2.4-D와 TDZ 생장조절물질을 조합처리한 MS배지에 지황의 잎과 줄기조직을 치상한 결과 신초수와 길이는 2.4-D 0.01mg/l와 TDZ 0.01, 0.1, 2(${\mu}M$)의 조합처리에서 가장 많은 신초분화수와 길이를 나타냈다. 2.4-D와 TDZ을 조합처리한 $B_5$배지에 지황의 잎과 줄기조직을 치상한 결과 신초수와 길이는 MS배지에 치상했을 때와 마찬가지로 2.4-D 0.01mg/l와 TDZ 0.1, 2.0(${\mu}M$)의 조합처리에서 신초분화가 일어났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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