The production of red pigment from glucose by fed-batch culture of Monascus anka was investigated. In batch culture using fermentor, 200 rpm of agitation speed, 1vvm of aeration volume, and 10% (v/v) of inoculum size were optimal, respectively. The red pigment production was increased by removal of wall-attached mycelium. In an intermittent feeding fed-batch culture, dry cell weight increased to 30 g/l, adn the red pigment content reached 350 of absorbance at 495nm. In a continuous feeding fed-batch culture, dry cell weight increased to 22g/l, and the red pigment content reached 190 of absorbance at 495nm.
본 연구에서는 홍국색소의 항산화 활성 및 조골세포의 분화에 미치는 영향을 검토하였다. 홍국색소의 항산화 활성은 DPPH radical 소거능, ABTS radical 소거능 및 SOD 유사 활성을 측정하여 평가하였다. 홍국색소의 DPPH radical 및 ABTS radical 소거 활성은 농도 의존적으로 증가하였으며, 특히 1,000 ㎍/ml 농도에서 각각 94% 및 99%의 최대 활성을 나타내었다. 또한 SOD 유사 활성을 검토한 결과에서, 홍국색소 1,000 ㎍/ml 농도에서 62%의 최대 활성을 나타내었다. 우선 홍국색소 1~1,000 ㎍/ml의 농도에서 세포독성을 검토하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, 1~100 ㎍/ml 농도의 범위에서 세포 독성은 나타나지 않았다. ALP 활성은 1~100 ㎍/ml 농도에서 농도의 존적으로 증가하였으며, 100 ㎍/ml의 농도에서 최대 124%의 활성을 나타내었다. 또한, 석회화 형성능 시험에서도 대조군 대비 모든 농도에서 유의적으로 증가하는 경향이 나타났으며, 100 ㎍/ml의 농도에서 대조군 대비 1.5배의 석회화 형성 결과가 나타났다. 이러한 결과를 통해 홍국색소는 항산화 활성이 우수하며, 조골세포 분화에 긍정적인 영향을 줌으로써 골다공증 예방 소재로서의 개발 가능성을 가진 부가가치가 높은 천연물 소재로 활용 가능할 것으로 생각된다.
Monascus pilosus KCCM 60084로부터 생성되는 색소의 공기에 대한 안정성 및 색소용액의 온도, pH, 빛 및 염류에 대한 안정성을 조사하였다. Monascus 색소는 공기 중에 30일간 방지할 경우 77.9%, 감압하에서는 48.4%가 감소하였다. Monascus 색소는 $20{\sim}80^{\circ}C$에서는 비교적 안정하였으나 $100{\sim}121^{\circ}C$에서는 $6.0{\sim}11.6%$의 감소율을 나타내었다. Monascus 색소는 pH $4{\sim}8$에서는 안정하였으나 pH 3과 9에서의 감소율은 각각 15.5% 및 13.7%이였다. Monascus 색소는 암소에서는 안정하였으나 형광하에서 30일 동안 둔 경우는 22.9%, 태양광 하에서는 68.8%가 감소하였다. 또한 Monascus 색소는 KCI, NaCI, $CaCl_2$, $MgCl_2$ 및 $ZnCl_2$에서는 비교적 안정하였으나 0.1 M $AlCl_3$ 용액에서는 20.3%의 감소로 불안정하였다.
Monascus purpureus KFRI 1134 균주에 대해 UV ($235_{nm}$, 30 second) 조사를 통한 변이주 형성을 유도하여 Monascus sp. MK2-2를 분리하였다. 홍국 천연색소 생산의 최적조건은 rice powder 0.3%와 0.2% yeast extract, 0.3% $NH_4H_2PO_4$의 배지 조성에서 초기 pH 5.0, 배양온도 $30^{\circ}C$ 및 배양기간은 5일이었으며, 홍국 천연색소 생산에 미치는 탄소원의 영향은 wheat flour > rice powder > fructose 순으로 높았다. 질소원은 sodium nitrate > $KNO_3$의 순서로 생성능이 높았으며, C/N ratio가 $17\sim22$일 때 색소의 생성능이 우수하였다. Anti-thrombosis activity 측정결과 Monascus sp. MK2-2 추출물은 aspirin과 유사한 항혈전 기능을 지니고 있음을 알 수 있었다.
In liquid cultures using sucrose media, the coculture of Monascus with recombinant Saccharomyces cerevisiae expressing the glucoamylase gene from Aspergillus niger enhanced red pigment production by approx. 19%, compared with the coculture of wild type S. cerevisiae. Coculture with recombinant S. cerevisiae was more effective than with wild type S. cerevisiae for Monascus red pigment production. Cocultures of Monascus with commercial amylases of Aspergillus also induced high production of pigment and morphological changes in a solid culture using sucrose media.
Park, Young-Ja;Park, Hyeoun-Yeoun;Kim, Young-Ran;Oh, Jeong-Dae;Yoon, Chong-Guk
대한의생명과학회지
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제9권3호
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pp.151-158
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2003
In the biological world, there are a number of ecological fights for survival between each organism such as plants, animals and microorganism In such events, an organism can use its natural bioactive products as defence agent against other organisms. Furthermore, natural bioactive products can be utilized for medicine or functional food. Recently, we investigate the effect of Monascus pigment extracted from a fungus, Monascus anke, on the alcohol metabolism and blood lipid profile. In the present study, it is observed that Monascus pigment supplemented dietary may have a hepatoprotective effect on rat's liver damage induced with $CCl_4$ . By treatment with $CCl_4$(3 times, I.P), liver damage was reduced more in the rats fed 2% Monascus pigment extract supplemented diet than those fed standard diet, based on the serum levels of alanine aminotransferase, microsomal glucose-6-phosphatse activity and hepaic malondialdehyde content. On the other hand, oxygen free radical generating enzymes, hepatic P-450 dependent aniline hydroxylase, xanthine oxidase, and oxygen free radical scavenging enzymes, hepatic glutathione S-transferase, catalase, superoxide dismutase activities were generally higher both in $CCl_4$ treated group and control fed 2% Monascus pigment extract supplemented diet than those fed standard diet. In conclusion, the rats fed 2% Monascus pigment extract supplemented diet showed more reduced liver damage than those fed standard diet, which may be due to the acceleration of oxygen free radical metabolism.
Monascus anka KCTC 6121을 이용하여 백미에 의한 고체 배양을 통한 실험균의 적색 색소의 생산을 위한 배양조건의 최적화에 관한 연구 결과는 다음과 같이 요약된다. 실험균주가 생산하는 적색색소 생산의 최적 배양조건은 초기 수분함량 25%, 2.5$\times$$10^{6}$/mL의 실험균주의 포자, 배양온도3$0^{\circ}C$, 배양습도 90%에서 배양 12일째가 가장 양호했다. 생산된 적 색 색소의 추출은 80% 에탄올에서 2일간 추출이 가장 양호했으며 2일 이후의 색소 추출은 색소 추출량에 거의 변화가 없음을 알 수 있었다. 실험균주로부터 추출한 색소의 빛에 대한 안정성은 반 직사광선에서 색소의 색상이 30일간 8% 미만으로 감소하여 햇빛에 대한 안정성은 비교적 높았다.
Monascus purpureus MK2를 이용하여 수용성 홍국 천연색소 생산을 위한 최적 배양조건에 대한 연구 결과, 탄소원으로 wheat flour 3.0% 첨가, 질소원으로 $NaNO_3$ 0.15%, 인산염으로 $K_{2}HPO_4$ 농도가 0.2% 및 $MgSO_4\;7H_{2}O$의 농도가 0.05%일 때 가장 높은 수용성 홍국 천연색소 생성을 나타내었다. 또한 배양온도는 $30^{\circ}C$, 초기 pH가 7.0, 진탕속도 130 rpm 및 배양시간 7일 일 때 수용성 홍국 천연색소의 생성능은 모 균주의 생성능인 3.12 unit(황색), 1.87 unit(오렌지), 1.77 unit(적색)에 비해 각각 9.33, 19.70, 27.64배 높은 29.10 unit(황색), 36.84 unit(오렌지), 48.92 unit(적색)로 가장 높은 수용성 홍국 천연색소의 생성능을 나타내었다.
천연 황색소 생산을 위하여 Monascus anka Nakazawa et Sato IFO 4478(KCCM l1832 strain) 균주를 모균주로 하여 UV 조사 및 NTG(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)처리 및 이들 방법을 병용하는 방법을 사용하여 모균주와는 색소생성 특성이 다르게 황색소를 단일성분으로 생성하는 변이주를 분리하고 그 특성을 조사하였다. leucine, cystein, aspartic acid, glutamic acid 와 asparagine 등 5종의 아미노산에 대한 영양요구주를 분리하였고 이중 asparagine 영양요구주 Y7은 colony 형태와 균사의 직경에서 약간의 차이를 나타내지만 전형적인 Monascus 균주의 특성을 지니고 있었으며 특히 유성생식에 의한 번식 특성이 강하여 색소 생성에 유리한 조건을 지니고 있었다. 그리고 Y7은 밝은 색조의 황색소를 단일 성분으로 생성하며 10대 이상의 계대배양에서도 색소 생성 특성이 안정하였고 색소 생성량이 모균주보다 약 2.2배 높은 값을 나타내고 있었다. 이때 생성된 황색소는 373 nm에서 단일 흡수 peak를 나타내고 물, 에탄올 등 극성용매에 대한 용해성이 높은 특성을 나타내며 생성된 색소의 대부분이 균체 밖으로 배출되는 특성을 지니고 있었다.
홍국 색소의 액체배양에 의한 대량생산조건을 개발하기 위하여 Monascus sp. KM 1001 변이주를 대상으로 균체생산 및 색소생성에 미치는 최적배양조건을 비교 검토하였다. 실험균주의 색소생성을 위한 액체배지의 최적화학적 조성은 4% rice powder, 0.15% Bacto-peptone, 0.1% glycine, 0.01% $FeSO_{4}{\cdot}7H_{2}O,\;0.1%\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O,\;0.25%\;KH_{2}PO_{4},\;pH4.5$였다. 실험균주의 $2.0{\times}10^{6}\;spores/ml$의 포자현탁액을 액체배지 50 ml에 접종하여 배양온도 $30^{\circ}C$에서 150 rpm으로 5일간 배양하였을 때, 10.00 g/L의 균체생산과 세포외 황색색소 오렌지색소와 적색색소는 각각 3.25 unit, 1.59 unit, 0.88 unit를 생성하였으며, 세포내 황색색소 오렌지색소와 적색색소는 84.96 unit, 78.84 unit, 91.80 unit의 색소를 생산할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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