Vieira, Helena Henriques;Bagatini, Inessa Lacativa;Guinart, Carla Marques;Vieira, Armando Augusto Henriques
ALGAE
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v.31
no.2
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pp.155-165
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2016
Green microalgae from the class Chlorophyceae represent a major biodiversity component of eukaryotic algae in continental water. Identification and classification of this group through morphology is a hard task, since it may present cryptic species and phenotypic plasticity. Despite the increasing use of molecular methods for identification of microorganisms, no single standard barcode marker is yet established for this important group of green microalgae. Some available studies present results with a limited number of chlorophycean genera or using markers that require many different primers for different groups within the class. Thus, we aimed to find a single marker easily amplified and with wide coverage within Chlorophyceae using only one pair of primers. Here, we tested the universality of primers for different genes (tufA, ITS, rbcL, and UCP4) in 22 strains, comprising 18 different species from different orders of Chlorophyceae. The ITS primers sequenced only 3 strains and the UCP primer failed to amplify any strain. We tested two pairs of primers for rbcL and the best pair provided sequences for 10 strains whereas the second one provided sequences for only 7 strains. The pair of primers for the tufA gene presented good results for Chlorophyceae, successfully sequencing 21 strains and recovering the expected phylogeny relationships within the class. Thus, the tufA marker stands out as a good choice to be used as molecular marker for the class.
Many endocrine disorders have a genetic component. The genetic component is the major etiologic factor in monogenic disorders, while multiple genes in conjunction with environmental and lifestyle factors contribute to the pathogenesis in complex disorders. The development of the molecular basis of inherited endocrine diseases has undergone a dramatic evolution during the last two decades. The application of molecular technology allowed us to increase our understanding of endocrine diseases, and to impact on the practice of pediatric endocrinology related to diagnosis and genetic counseling. Identification of the mutation in the particular disease by genetic testing leads to precise diagnosis in the equivocal cases and prenatal diagnosis. However, clinicians should be cautious about determining therapeutic decisions solely on the basis of molecular studies, especially in the area of prenatal diagnosis and termination of pregnancy. This review describes an introduction to molecular basis of various inherited endocrine diseases and diagnosis by genetic testing.
Background: Bovine group A rotavirus (BoRVA) is a major cause of severe gastroenteritis in newborn dairy calves. Only one study has investigated the G and P genotypes among dairy calves in a few regions of China, which were G6 and P[5]. Therefore, data on the prevalence and molecular characteristics of BoRVA in dairy calves in China remains limited. Objectives: The purpose of this study was to investigate the prevalence and molecular characteristics of BoRVA in dairy calves in China. Methods: 269 dairy calves diarrheic samples from 23 farms in six provinces in China were collected to detect BoRVA using reverse transcription polymerase chain reaction. Results: 71% of samples were determined to be BoRVA-positive. Two G genotypes (G6, G10) and two P genotypes (P[1], P[5]) were identified, and G6P[1] BoRVA was the predominant strain. Moreover, the VP7 and VP4 gene sequences of these dairy calf BoRVA strains revealed abundant genetic diversity. Interestingly, eight out of 17 complete G6 VP7 sequences were clustered into G6 lineage VI and analysis showed the strains were closely related to Chinese yak BoRVA strains. Conclusions: The results of this study show that BoRVA circulates widely among dairy calves in China, and the dominant genotype in circulation is G6P[1], first report on molecular characteristics of complete P[5] VP4 genes in chinese dairy calves. These results will help us to further understand the prevalence and genetic evolution of BoRVA among dairy calves in China and, thus, prevent the disease more effectively.
Ground cherry (Physalis pubescens) is the most prominent species in the Solanaceae family due to its nutritional content, and prospective health advantages. It is grown all over the world, but notably in northern China. In 2019 firstly bacterial leaf spot (BLS) disease was identified on P. pubescens in China that caused by both BLS pathogens Xanthomonas euvesicatoria pv. euvesicatoria resulted in substantial monetary losses. Here, we compared whole genome sequences of X. euvesicatoria to other Xanthomonas species that caused BLS diseases for high similarities and dissimilarities in genomic sequences through average nucleotide identity (ANI) and BLAST comparison. Molecular techniques and phylogenetic trees were adopted to detect X. euvesicatoria on P. pubescens using recQ, hrpB1, and hrpB2 genes for efficient and precise identification. For rapid molecular detection of X. euvesicatoria, loop-mediated isothermal amplification, polymerase chain reaction (PCR), and real-time PCR techniques were used. Whole genome comparison results showed that the genome of X. euvesicatoria was more closely relative to X. perforans than X. vesicatoria, and X. gardneri with 98%, 84%, and 86% ANI, respectively. All infected leaves of P. pubescens found positive amplification, and negative controls did not show amplification. The findings of evolutionary history revealed that isolated strains XeC10RQ, XeH9RQ, XeA10RQ, and XeB10RQ that originated from China were closely relative and highly homologous to the X. euvesicatoria. This research provides information to researchers on genomic variation in BLS pathogens, and further molecular evolution and identification of X. euvesicatoria using the unique target recQ gene through advance molecular approaches.
In the study, we have obtained modified cellulase with higher cellulose degradation activity by molecular evolution method. Cellobiohydrolase(CBH I ) gene of Trichorderma reerri has been used. Cellulase mutant 228-G2 was selected and the activity of cellulase mutant 228-G2 was increased by 300% compared to original CBH I The 17 among 1542bases were found to be modified with mutant 228-G2.
Kim, Sung-Soo S.;Saitoh, Takayuki;Jeon, Myoung-Won;Merritt, David;Figer, Donal F.;Wada, Keiich
The Bulletin of The Korean Astronomical Society
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v.35
no.1
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pp.72.1-72.1
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2010
Gas materials in the inner Galactic disk continuously migrate toward the Galactic center (GC) due to interactions with the bar potential, magnetic fields, stars, and other gaseous materials. In case of the Milky Way, those in forms of molecules appear to accumulate around 200 pc from the center (the central molecular zone, CMZ) to form stars there and further inside. The bar potential in the GC is thought to be responsible for such acculmulation of molecules and subsequent star formation, which is believed to have been continous throughout the lifetime of the Galaxy. We present 3-D hydrodynamic simulations of the CMZ that consider self-gravity, radiative cooling, and supernova feedback, and discuss the efficiency and role of the star formation in that region. We find that the gas accumulated in the CMZ by a bar potential of the inner bulge effectively turns into stars, supporting the idea that the stellar cusp inside the central 200 pc is a result of the sustained star formation in the CMZ. The obtained star formation rate in the CMZ, 0.03-0.1 Msun, is consistent with the recent estimate based on the mid-infrared observations by Yusef-Zadeh et al. We discuss the secular evolution of nuclear bulges in general, based on our results.
The gene order on the X chromosome of eutherians is generally highly conserved, although an increase in the rate of rearrangement has been reported in the rodent lineage. Conservation of the X chromosome is thought to be caused by selection related to maintenance of dosage compensation. However, we herein reveal that the cattle (Btau4.0) lineage has experienced a strong increase in the rate of X-chromosome rearrangement, much stronger than that previously reported for rodents. We also show that this increase is not matched by a similar increase on the autosomes and cannot be explained by assembly errors. Furthermore, we compared the difference in two cattle genome assemblies: Btau4.0 and Btau6.0 (Bos taurus UMD3.1). The results showed a discrepancy between Btau4.0 and Btau6.0 cattle assembly version data, and we believe that Btau6.0 cattle assembly version data are not more reliable than Btau4.0.
Plasmodium falciparum malaria is a major public health problem in Thailand due to the emergence of multidrug resistance. The understanding of genetic diversity of malaria parasites is essential for developing effective drugs and vaccines. The genetic diversity of the merozoite surface protein-1 (PfMSP-1) and merozoite surface protein-2 (PfMSP-2) genes was investigated in a total of 145 P. falciparum isolates collected from Mae Sot District, Tak Province, Thailand during 3 different periods (1997-1999, 2005-2007, and 2009-2010). Analysis of genetic polymorphisms was performed to track the evolution of genetic change of P. falciparum using PCR. Both individual genes and their combination patterns showed marked genetic diversity during the 3 study periods. The results strongly support that P. falciparum isolates in Thailand are markedly diverse and patterns changed with time. These 2 polymorphic genes could be used as molecular markers to detect multiple clone infections and differentiate recrudescence from reinfection in P. falciparum isolates in Thailand.
Positive selection on a new beneficial mutation generates a characteristic pattern of DNA sequence polymorphism when it reaches an intermediate allele frequency. On genome sequences of African Drosophila melanogaster, we detected such signatures of selection at 37 candidate loci and identified "sweeping haplotypes (SHs)" that are increasing or have increased rapidly in frequency due to hitchhiking. Based on geographic distribution of SH frequencies, we could infer whether selective sweeps occurred starting from de novo beneficial mutants under simple constant selective pressure. Single SHs were identified at more than half of loci. However, at many other loci, we observed multiple independent SHs, implying soft selective sweeps due to a high beneficial mutation rate or parallel evolution across space. Interestingly, SH frequencies were intermediate across multiple populations at about a quarter of the loci despite relatively low migration rates inferred between African populations. This invokes a certain form of frequency-dependent selection such as heterozygote advantage. At one locus, we observed a complex pattern of multiple independent that was compatible with recurrent frequency-dependent positive selection on new variants. In conclusion, genomic patterns of positive selection are very diverse, with equal contributions of hard and soft sweeps and a surprisingly large proportion of frequency-dependent selection in D. melanogaster populations.
Non-structural protein 1 (NS1) of influenza virus has been shown to inhibit the innate immune response by blocking the induction of interferon (IFN). In this study, we isolated two single-stranded RNA aptamers specific to NS1 with $K_d$ values of $1.62{\pm}0.30nM$ and $1.97{\pm}0.27nM$, respectively, using a systematic evolution of ligand by exponential enrichment (SELEX) procedure. The selected aptamers were able to inhibit the interaction of NS1 with tripartite motif-containing protein 25 (TRIM25), and suppression of NS1 enabled retinoic acid inducible gene I (RIG-I) to be ubiquitinated regularly by TRIM25. Additional luciferase reporter assay and quantitative real-time PCR (RT-PCR) experiments demonstrated that suppression of NS1 by the selected aptamers induced IFN production. It is noted that viral replication was also inhibited through IFN induction in the presence of the selected aptamers. These results suggest that the isolated aptamers are strongly expected to be new therapeutic agents against influenza infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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