산국의 꽃으로부터 2종의 sesquiterpene lactones을 분리정제하였으며, 각각 Compound I 과 II로 명명하였으며, 이 두 물질을 Sarcoma180에 감염된 ICR mouse에 대하여 항암효과실험을 수행한 결과 Compound I과 II의 투여농도가 10mg/kg일 때 수명 연장효과가 각 각 143%, 134%로 나타났다. 또한 Compound I 과 II 를 1mg/kg 씩을 섞어서 투여하였을 때에 158%의 수명 연장효과가 나타났다
본 연구는 야생꿀을 비롯한 벌꿀, 벌집채꿀 등 국내산 및 수입산 꿀의 안전관리를 위한 grayanotoxin(GTX)의 시험분석법 확립 및 실태조사를 위하여 수행하였다. GTX 표준품 I, II, III는 LC-MS/MS로 분자량을 확인한 후, 시판품인 III를 제외한 I과 II는 NMR을 이용하여 구조를 확인하였다. 총 111건(국내산 벌꿀25건, 국내산 야생꿀 21건, 벌집채꿀 13건, 수입산 벌꿀 44건, 수입산 야생꿀 8건)의 벌꿀시료는 메탄올을 사용하여 벌꿀-메탄올 용액을 만들어 tC18 cartridge에 loading 한 후, 여과된 액을 동량의 증류수로 희석하여, 이온화장치로 ESI를 장착한 triplequadrupole LC-MS/MS를 이용하여 분석하였다. LC의 용리액은 1% 포름산이 첨가된 "메탄올-물"을 사용하는 것이 10분 이내의 분석시간대에 나타나는 피크의 모양과 감도가 우수한 경향을 나타내었다. 본 방법을 이용하여 검체 중의 GTX I, II, III의 함유량을 조사한 결과 총 111건 중 수입산 야생꿀 3건(2.7%)에서 GTX I, II, III가 검출되었고, 수입산 야생꿀 1건에서 GTX I, III가 검출되었다. GTX I의 검출량은 최소 $3.13{\pm}0.00mg/kg$에서 최고 $12.93{\pm}0.01mg/kg$으로 나타났고 GTX II는 $0.84{\pm}0.01mg/kg$, $0.92{\pm}0.00mg/kg$, $1.08{\pm}0.01mg/kg$의 함량을 나타내어 GTX I 에 비해 낮은 수치를 나타내었다. GTX III는 최소 $0.25{\pm}0.01mg/kg$에서 최고 $3.29{\pm}0.74mg/kg$으로 함량에 큰 차이를 보였다. 본 방법을 이용한 총 111건의 벌꿀 시료의 GTX분석시 수입산 야생꿀 4건에서만 GTX가 검출됨을 알 수 있었다. 본 연구에서는 비 휘발성 또는 극성 때문에 GTX 분석시 GC 및 GC-MS에서 분석이 어려운 벌꿀시료를 대상으로 전처리 시간의 단축을 모색함과 동시에 LC-MS/MS를 이용한 시험분석법을 개발할 수 있었고, 모니터링을 통하여 네팔, 터키 등 특정 지역의 야생꿀의 섭취를 제한하는 과학적 근거를 마련할 수 있었다.
고추의 형질전환율을 높이기 위하여 우선적으로 효율적인 재분화조건을 구명하였다. 고추의 하배축과 자엽 모두 2mg/L zeatin과 0.1 mg/L NAA ( I )에서 51%, 1.0 mg/L BAP와 10.0 mg/L IBA ( II)는 45.1%의 재분화율을 보였으며, 두 배지에 5 $\mu$M AgNO$_3$을 첨가하였을 때 I의 배지에서 보다 건강한 식물체를, II의 배지에서는 재분화율이 약 8%로 증가함을 보였다. 따라서 II의 배지 조건은 가격이 비싼 zeatin의 효과를 대치할 수 있었다. 이렇게 얻어진 효율적인 재분화배지에 고추의 하배축과 자엽을 ADA와 NPT II 유전자를 함유한 Agrobacterium tumefaciens pDY183을 이용하여 형질전환을 유도하여, kanamycin 100 mg/L에서 선발하여 성공적으로 형질전환체를 얻었다. 식물체내로의 ADA와 NPT II 유전자의 도입은 PCR을 이용하여 확인하였으며, Northern blot에 의하여 ADA 유전자의 전사여부를 확인하였다. ADA 효소의 활성도는 spectrophotometer를 이용하여 측정하여 본 결과 고추세포내에서 정상적으로 발현하였으므로 동물유전자인 ADA가 식물체 형질전환시 표시 유전자로서의 사용가능성이 확인되었다.
To evaluate the possibility that the ginseng saponins could be developed as an anti-arteriosclerotic agent, we examined the inhibitory effects of ginseng saponins (total saponin[TS], panaxatriol[PT], panaxadiol[PD]) on the expression of c-fos mRNA and the proliferation of cultured rat aortic vascular smooth muscle cells (VSMCs) stimulated by angiotensin II (Ang II). TS and PT (1.0 mg/ml) suppressed c-fos mRNA induction in VSMCs stimulated by $10^{-5}$ M Ang II. The order of inhibitory potency was PT>TS. Ginseng saponins ($0.01{\sim}1.0$ mg/ml) inhibited the proliferation of VSMCs stimulated by Ang II in a concentration dependent manner, the inhibitory potency was TS>PT>PD at $0.1{\sim}1.0$ mg/ml. These results suggest that ginseng saponins may suppress Ang II-stimulated proliferation of aortic VSMCs which can be seen in atherosclerosis, hypertension and restenosis.
Cu(II) can cause health problem for human being and phosphate is a key pollutant induces eutrophication in rivers and ponds. To remove of Cu(II) and phosphate from solution, chitosan as adsorbent was chosen and used as a form of hydrogel bead. Due to the chemical instability of hydrogel chitosan bead (HCB), the crosslinked HCB by glutaraldehyde (GA) was prepared (HCB-G). HCB-G maintained the spherical bead type at 1% HCl without a loss of chitosan. A variety of batch experiment tests were carried out to determine the removal efficiency (%), maximum uptake (Q, mg/g), and reaction rate. In the single presence of Cu(II) or phosphate, the removal efficiency was obtained to 17 and 16%, respectively. However, the removal efficiency of Cu(II) and phosphate was increased to 50~55% at a mixed solution. The maximum uptake (Q) for Cu(II) and phosphate was enhanced from 11.3 to74.4 mg/g and from 3.34 to 36.6 mg/g, respectively. While the reaction rate of Cu(II) and phosphate was almost finished within 24 and 6 h at single solution, it was not changed for Cu(II) but was retarded for phosphate at mixed solution.
PS-D2EHPA beads were prepared by immobilizing di-2-ethylhexyl-phosphoric acid (D2EHPA) with polysulfone (PSf). The removal experiments of Cu(II) and Pb(II) by the prepared PS-D2EHPA beads were conducted batchwise. The removal efficiency of Cu(II) and Pb(II) by PS-D2EHPA beads was increased with increasing pH of solution. The removal rate of Cu(II) and Pb(II) was well described by the pseudo-second-order kinetic model. The maximum removal capacity of Cu(II) and Pb(II) obtained from Langmuir isotherm were 2.58 mg/g and 12.63 mg/g, respectively. External mass transfer coefficients for the removal of Cu(II) and Pb(II) by PS-D2EHPA beads were obtained $0.61{\times}10^{-2}{\sim}5.87{\times}10^{-2}/min$ and $1.55{\times}10^{-2}{\sim}8.53{\times}10^{-2}/min$, respectively and diffusion coefficients were obtained $1.32{\times}10^{-4}{\sim}3.98{\times}10^{-4}cm^2/min$ and $1.80{\times}10^{-4}{\sim}2.28{\times}10^{-4}cm^2/min$, respectively.
The present study was designed to determine whether cyclosporine A inhibits Major Histocompatibility Complex Class II antigen[MHC II expression in the allograft rat heart myocardium. In this rat allograft study we also tried to elucidate whether CSA inhibits MHC II in a dose dependent way. Hearts were isolated from LBN rats weighing 200-250 grams and heterotopically transplantated into the abdomen of weight-matched ACI rats. The ACI rats were randomly assigned to one of the three experimental groups according to cyclosporine dosage: {1}control [no CSA , n=6 {2}CSA 5 mg/day , n=5 {3}CSA 10 mg/day, n=5. The transplanted hearts were harvested 5 days postoperatively and analyzed. MHC II expression was detected by indirect immunoperoxidase staining and quantified via computer image analysis system. The % positive area reading was obtained in each slide [50 areas per group and compared to other groups. Significant differences were noted between three groups [p<0.05 . We conclude that CSA inhibits MHC II in heterotopically transplanted allograft rat heart in a dose dependent way.
2,4,6-Trinitrotoluene (TNT)을 분해할 수 있는 Stenotrophomonas sp. OK-5에서 분리한 NAD(P)H-nitroreductase의 특성을 조사하였다. 먼저 ammonium sulfate precipitation, DEAE-sepharose, 그리고 Q-sepharose 등의 일련의 정제 과정을 통하여 NAD(P)H-nitroreductase을 분리정제하였다. 분취기로부터 얻어진 시료로부터 NAD(P)H-nitroreductase의 효소활성을 가지는 3개의 다른 fractions (I, II 및 III)이 탐침되었다. NAD(P)H-nitroreductase의 fractions I, II, 그리고 III의 비활성(specific activity)은 각각 5.06 unit/mg, 4.95 unit/mg, and 4.86 unit/mg이었으며, crude extract와 비교하여 각각 10.5배, 9.8배, 8.9배 이상 농축되었다. 이 실험에서 이들 3개의 fractions 가운데, fraction I이 가장 높은 비활성을 나타내었다. NAD(P)H-nitroreductase (fractions I, II 및 III)의 효소활성에 영향을 미치는 몇 가지 요인을 조사하였다. 모든 NAD(P)H-nitroreductase (fractions I, II 및 III)의 최적 온도는 30$^{\circ}C$이었으며, 최적 pH는 약 7.5이었다. 4Ag^+, Cu_2^+, Hg_2^+$ 등의 금속이온은 약 80%의 효소활성을 저해하였으나, $Mn_2^+ 이나 Ca_2^+$의 첨가 시에는 약 30~40% 정도의 활성이 감소되었다. 그러나 $Fe_3^+$은 이들 효소의 활성을 증진시켰다. SDS-PAGE에 의해 측정된 NAD(P)H-nitroreductase의 fractions I, II 및 III의 분자량은 모두 약 27 kDa임이 확인되었다.
last few decades. In this study, the lyophilized cells of Pleurotus eryngii (mushroom) were used as an inexpensive biosorbent for Cd(II) and Pb(II) removal from aqueous solutions. The effect of various physicochemical factors on Cd(II) and Pb(II) biosorption such as pH (2.0-7.0), initial metal concentration ($0.0-300mg\;L^{-1}$), temperature, fungal biomass and contact time (0-120 min) were studied. Optimum pH for removal of Cd(II) and Pb(II) was 6.0, and the contact time was 45 min at room temperature. The nature of biosorbent and metal ion interaction was evaluated by Infrared (IR) spectroscopic technique. IR analysis of mushroom biomass revealed the presence of amino, carboxyl, hydroxyl and methyl groups, which are responsible for biosorption of Cd(II) and Pb(II). The maximum adsorption capacities of P. eryngii for Pb(II) and Cd(II) calculated using Langmuir adsorption isotherm were 82.0 and $16.13mg\;g^{-1}$, respectively. The adsorption isotherms for two biosorbed heavy metals were fitted well with Freundlich isotherm as well as Langmuir model with correlation coefficient ($r^2$>0.99). Thus, this study indicated that the P. eryngii is an efficient biosorbent for the removal of Cd(II) and Pb(II) from aqueous solutions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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