다제내성균의 증가는 사용할 항생제가 적거나 심지어 선택할 항생제가 없기 때문에 감염환자의 치료에 커다란 위협이 되고 있다. 최근 다양한 천연 추출물이 내성세균에서 항균효과 및 상승효과를 보인다는 보고가 많다. 어성초(Houttuynia cordata)는 항균, 항바이러스 및 항산화 효과를 보이는 전통적 약초이다. 이에 저자들은 임상의 주요 내성균에 대한 어성초의 항균효과를 알아보고, 이들의 적절한 항균효과 측정방법을 평가하고자 한다. 우선 현재 가장 많은 문제를 야기하는 주요 내성균인 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), vancomycin-resistant Enterococcus faecium (VRE), carbepenem-resistant Acinetobacter baumannii(CRAB) 각각 10 균주를 선택하여, CLSI 기준으로 디스크 확산법 및 미량액체배지희석법으로 감수성 시험을 하였다. CLSI 기준으로 시행한 디스크 확산법에서 $4,096{\mu}g/mL$에서 $30,000{\mu}g/mL$ 까지의 농도에서 모든 균의 억제대는 관찰되지 않았다. 그러나 액체배지 희석법에서는 MRSA, VRE, CRAB의 $MIC_{90}$이 각각 $4,096{\mu}g/mL$, $8,192{\mu}g/mL$, $4,096{\mu}g/mL$를 보였다. 결론적으로 어성초는 MRSA, VRE, CRAB 등 주요 임상 내성균에서 우수한 항균효과를 보이며 천연물의 항균효과를 평가에 디스크 확산법보다 액체배지 희석법이 유용하다고 할 수 있다. 만약 디스크 확산법으로 항균효과를 측정하려면 천연물에 대한 균 접종 농도의 변경 등 새로운 기준이 요구된다.
The broth microdilution technique used to measure the minimal inhibitory concentration (MIC) of natural compounds against bacteria is problematic: it is difficult to visualize bacterial growth due to the color of the natural compound. Therefore, the use of a colorimetric method with a redox indicator by broth microdilution can simplify it and increase its objectivity. This study evaluated the usefulness of the colorimetric method in measuring the MIC of Phellinus baumii against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The inhibition in disc diffusion method was observed from $8,192{\mu}g/mL$ P. baumii in all 10 MRSA isolates examined; however, the MIC ranges of the 10 MRSA isolates was $512{\sim}2,048{\mu}g/mL$ by broth microdilution using a colorimetric method; with the 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) indicator. In addition, the MIC of P. baumii by broth microdilution using MTT as indicator yielded excellent results. However, the 2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) results could not be determined due to the color of the TTC indicator. The MICs of four antibiotics against MRSA using MTT or TTC were equal to those determined by visual interpretation. In conclusion, to evaluate the antibacterial effects of a natural compound, the broth microdilution technique is considered to be better than the disc diffusion method. Moreover, to resolve the problems caused by the colors of natural compounds, a colorimetric method such as that using MTT may be very valuable.
We developed the multiplex LAMP assay using 16S rRNA, femA and mecA genes for direct detection of the methicillin resistance in Staphylococci from positive blood culture. To simultaneously recognize Staphylococci genus, S. aureus and methicillin resistance, three sets of six primers for 16S rRNA, femA and mecA were designed, respectively. The performance of LAMP assay was affirmed using VITEK system for the phenotypic methods of identification and for oxacillin and cefoxitin antimicrobial susceptibility. The optimal condition for LAMP assay was obtained under $64^{\circ}C$ for 50 min. The detection limit was determined to be of 20 copies and CFU/reaction ($10^4CFU/mL$). For clinical application of comparison with phenotypic methods, the sensitivity and specificity of the LAMP with femA gene for detecting S. aureus was 95.31% and 100%, respectively. The sensitivity and specificity of the LAMP with mecA gene for detecting methicillin resistance was 98.46% and 100%, respectively. The multiplex LAMP assay with femA and mecA gene successfully detected all of MRSA (38 isolates) isolates from 103 Staphylococci in blood cultures. The LAMP assay developed in this study is sensitive, specific, and of excellent agreement with the phenotypic methods.
Limited therapeutic options are available for vancomycin intermediate-resistant Staphylococcus epidermidis (VISE) infections and no optimum therapy has been established. We report a case of VISE skull osteomyelitis that was successfully treated with linezolid. The patient was a 53-year-old man who presented with headache, nausea and dysphasia. Brain computerized tomography (CT) demonstrated a subdural hematoma in the left hemisphere. Craniotomy and hematoma evacuation was performed and he showed good recovery despite a scalp wound infection caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The organism isolated from the scalp wound was sensitive to vancomycin. The patient was treated with intravenous vancomycin for 44 days. However, he showed a high fever, persistent positive methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis (MRSE) blood cultures, and a deteriorating clinical status. He underwent infected skull bone flap removal and linezolid treatment for 35 days. During one year of follow up, he has not had any further episodes of osteomyelitis or fever. Linezolid has shown to be effective agent to eradiate osteomyelitis caused by VISE.
연구배경: 메티실린 내성 황색포도알균은 의료기관 관련 감염 뿐 아니라 지역사회 감염에서도 나타나 이에 저자들은 한 대학병원 중환자실에 입원한 환자의 비강 도말 배양을 통해 MRSA의 의료기관 관련 감염 및 지역사회 감염의 빈도와 분자 역학 및 항생제 내성을 연구하였다. 방 법: 2006년 6월에서 9월까지 건양대학교 병원 중환자실 환자 353명을 대상으로 입실 첫날 비강 도말 배양을 시행하여 MRSA 획득 위험인자에 따라 HA-MRSA와 CA-MRSA로 나누어 Pulsed-Field Gel Electrophorosis (PFGE)로 분류하여 각각의 항생제 내성 검사를 시행하였다. 결 과: 353명 중 비강 도말 배양에서 동정된 MRSA는 42명(11.9%)이며, 동정된 MRSA 중 HA-MRSA는 33명(78.6%), CA-MRSA는 9명(21.4%)이다. PFGE에서 type A에서 type K까지 11형으로 구분하였고 HA-MRSA는 type A (n=9), B (n=7)가, CA-MRSA는 type A (n=2), B (n=2)가 주로 나타났다. 항생제 내성률은 erythromycin, ciprofloxacin에서 HA-MRSA가 CA-MRSA보다 높게 나타났다. 결 론: MRSA의 집락률은 11.9%이며 HA-MRSA의 균주가 CA-MRSA보다 많고, CA-MRSA는 9예로 적은 예지만 PFGE type에서 대부분의 type이 HA-MRSA에서 동정된 type과 같은 경향을 보여 지역사회전파를 시사한다.
Purpose: This study was a within subject repeated pretest-posttest design done to compare the effect of disinfection and the degree of MRSA(Methicillin- resistant staphylococcus aureus) isolation from hand disinfectant in ICU nurses. Method: Out of the total internal medicine/surgery ICU nurses at a university hospital in Seoul, 29 female nurses who were participating in direct patient care were participants in this study. After collection of samples, Staphylococcus aureus and MRSA were isolated from the palms, nails and nasal cavities of the nurses according to disinfectants (soap and beta-scrub). Results: The effect of disinfection was greater in the beta-scrub group than in the soap group, and the effect of disinfection on palms was higher in the beta-scrub group than in the soap group. As for the degree of MRSA isolation, there was more isolation in palms in the soap group than in the beta-scrub group but there was no difference in the degree of MRSA isolation from the hand disinfectant in nails and nasal cavities. Conclusion: Beta-scrub showed a superior prolonged effect against transient bacteria compared with soap. Further, to reduce MRSA infection, we recommend interventions focused on these aspects.
Objectives : Hwangheuk-san is a complex prescription composed of oriental traditional medicine and has been reported for antioxidant, antimicrobial and anticancer effects in the recent study. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is one of important causes of fatal infectious diseases such as septicemia, endocarditis, toxic shock syndrome, pneumonia, skin and soft tissue infections (SSTIs). S. aureus is reported as being for a variety of human diseases and its epidemiological relevance is mainly due to their ability of becoming highly resistant to common antimicrobials such as tetracycline, penicillin, cphalosporin and aminoglycoside. The objective of this study is to determine the antimicrobial effect of Hwangheuk-san ethanol extracts (HHS) and synergistic effects with antibiotics oxacillin against MRSA.Methods : The antimicrobial activity of HHS was measured by the disc diffusion method, broth microdilution method and the checkerboard dilution test, time-kill curve assay was performed to investigate synergistic effects with antibiotics oxacillin against MRSA.Results : HHS showed antimicrobial activity against MRSA with a MIC value of 125 ㎍/㎖. In the checkerboard test, the interaction of HHS with antibiotics oxacillin produced almost synergy or partial synergy against MRSA. This study showed that HHS reduced the MICs of oxacillin tested, and a remarkable antibacterial effect of HHS, with membrane permeability enhancers.Conclusions : These results suggest that HHS has the antimicrobial effect and synergistic effects with antibiotics oxacillin against MRSA. This study thus can be a valuable source for the development of a new drug with low MRSA resistance.
A multiplex-polymerase chain reaction (PCR) assay was used to detect staphylococcal enterotoxin production by 12 strains of Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens. To evaluate the efficacy and/or sensitivity of this method, the results were compared to those obtained with the reversed passive latex agglutination kit (SET-RPLA, Denka Seiken, Japan). Of 10 strains positive by PCR were positive by RPLA but two strains, representing high sensitivity of the former method. Enterotoxin B was the most prevalent by the two methods. The kappa index between the two methods was 0.826, indicating a higher agreement and fully reliable for use. These results would suggest that sensitive, inexpensive, and relatively rapid multiplex-PCR technique may be an effective means for the detection of staphylococcal enterotoxin genes as an alternative to traditional methods such as kits or immunological methods, which depend upon the amount of enterotoxin produced.
This research verifies stainability, super bacteria antibacterial features and antibiotic resistance of Ulmus davidiana var. japonica Nakai (UD) extract in dye cotton cloth. UD was extracted with hot water, the test cloth dyed, and then processed by mordanting treatment using $FeSO_4$$7H_2O$, $CuSO_4$$5H_2O$ and $Al_2(SO_4)_3$. The surface color and color fastness of the three kinds (original cloth, the cloth without mordancy and mordant cloth) were measured and the influence of dying of cotton cloth and the mordant method on the genesistasis of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), antibiotic resistant bacteria. 1. The surface color of the cotton cloth for dyeing (without and with mordancy) displayed a reddish and yellowish color. Stainability was greatest when the mordant of $FeSO_4$$7H_2O$ was used. 2. When a mordant was not used for dyeing, the color fastness to washing, perspiration and friction of the contaminated cloth was satisfactory at 4 to 5 grade in general. 3. As for the antibiotic effect to super bacteria, the growth of germ was meaningfully suppressed both on the cloth without and with mordancy compared to the comparison cloth; in addition, the dyeing method with the biggest antibacterial impact was found to be the mordancy with the mordant of $CuSO_4$$5H_2O$ after dyeing. The results of the experiments that involved dyeing with UD extract showed that cotton cloth processed through mordancy with the mordant of $CuSO_4$$5H_2O$ had the biggest antibiosis to super bacteria and that processed with the mordant of $FeSO_4$$7H_2O$ had the greatest stainability.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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