The infection status of zoonotic trematode metacercariae (ZTM) was investigated in total 568 freshwater fishes (19 species) from the irrigation canal of Togyo-jeosuji (Reservoir) in Cheorwon-gun, Gangwon-do, the Republic of Korea for 3 years (2018-2020). All fishes were examined using the artificial digestion method. The metacercariae of Clonorchis sinensis (CsMc) were detected in 180 (43.8%) out of 411 fish of positive species, and their infection intensity was 38 per fish infected (PFI). Especially, in 2 fish species, i.e., Pseudorasbora parva and Puntungia herzi, the prevalence was 82.1% and 31.3%, and the infection intensity with CsMc was 88 and 290 PFI, respectively. Metagonimus spp. metacercariae (MsMc) were found in 403 (74.1%) out of 544 fish of positive species, and their infection intensity was 62 PFI. In the pale chub, Zacco platypus, the prevalence of MsMc was 98.6%, and their infection intensity was 144 PFI. Centrocestus armatus metacercariae were detected in 171 (38.9%) out of 440 fish of positive species, and their infection intensity was 1,844 PFI. Echinostoma spp. metacercariae were found in 94 (19.6%) out of 479 fish of positive species, and their infection intensity was 3 PFI. Metorchis orientalis metacercariae were detected in 43 (29.3%) out of 147 fish of positive species, and their infection intensity was 4 PFI. By the present study, it has been confirmed that some species of ZTM, including CsMc and MsMc, are prevalent in fishes from the irrigation canal of Togyo-jeosuji in Cheorwon-gun, Gangwon-do, Korea.
Eosinophils are important effector cells in host defense against parasites. Excretory-secretory product (ESP) produced by helminthic worms plays important roles in the uptake of nutrients, migration in the host tissue, and in immune modulation. However little is known about the ability of the ESP to directly trigger eosinophil apoptosis. This study investigated whether the ESP of newly excysted metacercariae of Paragonimus westermani could induce apoptosis in human eosinophils. Apoptosis was assayed by staining the cells with FITC-annexin V, and the cells were analyzed by flow cytometry. It was found that the ESP of newly excysted metacercariae of P. westemani induced a direct time- and concentration-dependent increase in the rate of constitutive apoptosis in mature human eosinophils. Eosinophil apoptosis was first apparent 3 hr after treatment with the ESP and continued to increase after 6 hr of incubation with respect to the cells cultured in the absence of the ESP. While only 2.8% of the eosinophils incubated in the medium for 3 hr were apoptotic, 7.6%, 10.9% and 22.6% of the eosinophils treated with 10. 30 and $100{\;}\mu\textrm{g}/ml$ ESP were apoptotic, respectively. This result suggests that the ESP of newly excysted metacercariae of P. westermani directly induce eosinophil apoptosis, which may be important for the survival of the parasites and the reduction of eosinophilic inflammation in vivo.
Metacercariae of Acanthoparyphium marilae Yamaguti, 1934 (Digenea: Echinostomatidae) were discovered in an intertidal clam, Mactra veneriformis, in a southwestern coastal area of the Republic of Korea. A total of 128 metacercariae were detected from 10 clams examined. They were round, 320 m in average diameter, with 23 collar spines. They were fed experimentally to chicks, and 10 days later adult flukes were obtained. The adults were morphologically characterized by the head collar with a single row of 23 dorsally uninterrupted spines, without special end group spines, a round ventral sucker, 2 round and tandem testes, and vitellaria extending at lateral fields from the posterior extremity not beyond the middle level of the posterior testis. The most characteristic feature of this species was the limited distribution of vitellaria, which differs from Acanthoparyphium tyosenense Yamaguti, 1939, the metacercariae of which are encysted in the same mollusk species. This is the first report in which the metacercariae of this species were detected, and the intertidal bivalve, M. veneriformis, has been identified as a second intermediate host for A. marilae.
In vitro cultivation of trematodes would assist studies on the basic biology of the parasites and their hosts. This is the first study to use the yolk of unfertilized chicken eggs as a simple and successful method of ovocultivation and the first time to obtain the adult-stage of the trematode Cymatocarpus solearis Braun, 1899 (Digenea: Brachycoeliidae). Chicken eggs were inoculated with metacercariae from the muscle of the spiny lobster, Panulirus argus (Latreille, 1804). The metacercariae were excysted and incubated for 576 hr (24 days) at $38^{\circ}C$ to obtain the adult stage. Eggs in utero were normal in shape and light brown color. The metacercariae developed into mature parasites that have been identified as the adultstage found in marine turtles. The adult lobsters collected in Quintana Roo State, Mexico, showed the prevalence of 49.4% and the mean intensity of 26.0 per host (n=87). A statistical study was performed to determine that no parasitic preference was detected for male versus female parasitized lobsters. Morphometric measurements of the adult-stage of C. solearis obtained in our study have been deposited in the National Helminths Collection of the Institute of Biology of the National Autonomous University of Mexico. This study is significant because it is the first time that a digenean of the family Brachycoeliidae has been demonstrated to develop in vitro from metacercariae into adults capable of producing eggs using the yolk of unfertilized chicken eggs. Secondly, this technique allows to obtain the adult stage of C. solearis without the presence of its marine turtle host, allows us to describe the mature parasites, and thus contribute to our understanding of the biology of C. solearis.
Among Paragonimus species, P. paishuihoensis is one of the most mysterious and poorly understood species. Metacercariae are characterized by having a unique dendritically branched excretory bladder. However, the morphology of the adult worm remains unknown. To date, metacercariae of this species have been reported only in China and Thailand. In this study, we first found P. paishuihoensis metacercariae in freshwater crabs, Potamon lipkei, in Hinheub District, Vientiane, Lao PDR, with a prevalence of 77.7% and the average intensity of 10.3 (range 1-28) metacercariae per crab. The molecular data based on ITS2 and CO1 markers indicated that P. paishuihoensis from Laos and Thailand were almost completely identical and were close to members of the Paragonimus bangkokensis/Paragonimus harinasutai complex. Attempts to infect experimental animals (cats, dogs, and rats) with P. paishuihoensis were unsuccessful, suggesting that these animals might be unsuitable definitive hosts for the species. Further studies are necessary to elucidate the taxonomic status and life cycle of P. paishuihoensis.
A small survey was performed to investigate the recent infection status of Clonorchis sinensis and other zoonotic trematode metacercariae in freshwater fish from a local market of Yen Bai city, Yen Bai province, northern Vietnam. A total of 118 fish in 7 species were examined by the artificial digestion method on March 2016. The metacercariae of 4 species of zoonotic trematodes, i.e., C. sinensis, Haplorchis pumilio, Haplorchis taichui, and Centrocestus formosanus, were detected. The metacercariae of C. sinensis were found in 62 (69.7%) out of 89 fish (5 species), and their intensity of infection was very high, 81.2 per fish infected. Prevalences of 3 intestinal flukes, H. pumilio, H. taichui and C. formosanus, were 75.0%, 47.6%, and 31.7% in positive fish species, respectively, with the metacercarial intensities of 15.5, 10.3, and 2.2 per fish infected. From the above results, it has been confirmed that various species of freshwater fish continue to play the role of the infection source of C. sinensis and other zoonotic trematodes in Yen Bai city, Yen Bai province, northern Vietnam. It is of particular note that the prevalence and intensity of C. sinensis metacercariae are much higher than those reported in previous studies in fish in northern Vietnam.
This study was performed to observe the influence of host immune response on the chemotherapy of mice experimentally infected with Fasciola hepatica. Following immunosuppression with prednisolone or immunoenhancement with Freund's complete adjuvant(FCA), mice were experimentally infected with 3 Fasciola hepatica metacercariae and treated with closantel at 1 week post infection. In the group of mice infected with metacercariae alone, 2 mice of 10 were dead at 10 weeks post infection(20% mortality), and adult flukes were recovered from the liver and the peritoneal cavity of the remaining 8 mice(100% infectivity). In the group of mice treated with prednisolone and infected with metacercariae, 8 of 10 mice died before euthanasia with a mean time of death earlier than the control group (p<0.05). In the group of immunosuppressed mice infected with metacercariae and treated with closantel 20mg/kg, 4 of 10 mice died before sacrifice. In the group of mice infected and treated with closantel 20mg/kg, mortality and infectivity was 10% and 30%, respectively. Similar results were observed in mice infected and treated with closantel 5mg/kg which resulted in 10% and 50% mortality and infectivity, respectively. These results indicated that the efficacy of closantel treatment was decreased in immunosuppressed mice, while the pathogenicity was increased. In immunoenhanced mice infected with metacercariae, on the other hand, the efficacy of chemotherapy with both 5mg/kg or 20mg/kg closantel resulted in only 10% infectivity. The results shown in this study strongly suggest that a close interaction between chemotherapy against F hepatica with closantel and the host immune system exists. Considering that fascioliasis is a zoonosis, treatment regimen against the infection to immunosuppressed patients may require a concurrent prescription of an appro-priate immuno-enhancing adjuvant.
Fishborne zoonotic metacercariae have not been reported from brackish water and marine fish from Vietnam waters although these parasites are common in the country's freshwater fish. Both wild-caught and cultured grouper (Epinephelus coioides and Epinephelus bleekeri), and mullet (Mugil cephalus) from brackish and marine waters located in Khanh Hoa province in central coastal Vietnam were examined, and found positive for zoonotic trematode metacercariae. From grouper, Heterophyopsis continua and Procerovum varium were recovered. The prevalence of H. continua ranged from 2.0 to 6.0% and that for P. varium ranged from 11.6 to 15.8%. Mullet were infected with Pygidiopsis summa and H. continua; both of these species are new records for Vietnam. The prevalence of P. summa in mullet was generally high, ranging from 17.6 to 75.5%, and was significantly higher than the prevalence of H. continua (2.5 to 32.4%). There were no significant differences in the prevalence of metacercariae between grouper from natural or cultured habitats, indicating that the highest risk of infection occurs in the wild-caught state prior to their placement in culture. Further, there was no difference in metacercarial prevalence between the 2 species of grouper. Infected wild-caught seed were only observed from January to October. Monthly variation in prevalence suggests seasonal variation in mullet infections occurs in this region with the highest transmission taking place from October to December. Basic investigations on the ecology and epidemiology of these intestinal flukes need to be carried out to determine their significance as a public health problem and the aspects of their biology that may be vulnerable to control interventions.
참굴큰입흡충(Gymnophalloides seoi)의 국내 분포상황을 알기 위하여 동해안 남해안 및 서해안 등 여러 해안 지역에서 참굴을 채집한 후 참굴큰입흡충 피낭유충 감염상황을 조사하였다. 전라남도 신안군의 13개 면과 신안군 외 14개 군(경기도, 전라북도, 전라남도, 경상남도, 경상북도, 강원도)의 씨개 면을 대상지역으로 하였고. 굴의 피낭유충 감염 여부 및 감염량을 조사하였다. 신안군 13개 면 중 압해면 및 안좌면을 포함한 10개 면의 굴에서 피낭유충 감염이 확인되었고 지역별 감염률은 1.7-100%이었다. 그 중 압해면산 굴이 개체당 평균 785.9개의 피낭유충을 보유하고 있어 감염량이 가장 높았다 신안군 이외의 24개 면 중에서는 전라북도 부안군 변산면만 제외하고 모두 음성의 결과를 나타내었으며, 부안군 변산면에서는 굴 50개 중 1개에서 피낭유충 15마리가 검출되었다. 이번 연구 결과로 보아 참굴큰입흡충의 농후한 유행은 전라남도 신안군에 국한된 것으로 보이며, 전라북도 부안군 등 인근 지역에 약간의 유행이 있는 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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