As an LNG carrier preserves and transports liquefied natural gas under minus $163^{\circ}C$, the cargo tank has to have sufficient hull strength against not only the wave loads but also against loads caused by loading and unloading and thermal expansion to keep the LNG safely. The main insulation types for a CCS are No.96 and Mark III from GTT for the membrane LNG carrier. Particularly, the invar membrane plate in No.96 is very thin and its connections could experience high local stresses owing to such dynamic loads. Therefore, it should be verified whether those connections have sufficient fatigue lives for the purpose of operation and maintenance. This research aims at performing fatigue analysis with 0.1 fatigue damage criteria for 40 years of design life to support new membrane CCS development using proper S-N curves and the associated finite element modeling technique for each connection and then propose a reasonable design methodology.
In our previous studies, we reported that hybridoma B-lymphocytes can be used to determine the virulence of Listeria species in an in vitro cytotoxicity assay. Here, we examined the cytopathic effect, i.e., membrane damage and the nature of cell death induced by Listeria monocytogenes on murine hybridoma B-lymphocytes (Ped-2E9). Membrane damage was assessed by microscopic analyses and by measuring the release of intracellular alkaline phosphatase(AP) and lactate dehydrogenase (LDH). Cell death was determined by DNA fragmentation analyses using agarose gel electrophoresis. Infection by listeriolysin O (LLO)-producing L. monocytogenes strains induced substantial amounts of AP and LDH release from Ped-2E9 hybridoma B-cells, suggesting severe membrane damage in these cells, while an LLO-negative L. monocytogenes mutant strain had no effect. An LLO-producing recombinant L. innocua ($prifA^+hly^+$) strain also induced high AP and LDH release and cytopathic changes in Ped-2E9 cells. Light or scanning electron microscopic examination revealed L. monocytogenes mediated membrane destabilization, pore formation, intense cytoplasmic granulation, bleb formation, and lysis of Ped-2E9 cells. LLO-producing L. monocytogenes and L. innocua ($prifA^{+}hly{^}+$) also induced ladder-like DNA fragmentation in Ped-2E9 cells. Collectively, these results suggest that L. monocytogenes, specifically LLO-producing strains, can induce a severe cytopathic effect leading to apoptosis in hybridoma B-lymphocytes (Ped-2E9).
Piao, Mei Jing;Kim, Ki Cheon;Chae, Sungwook;Keum, Young Sam;Kim, Hye Sun;Hyun, Jin Won
Biomolecules & Therapeutics
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v.21
no.3
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pp.210-215
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2013
Ionizing radiation can induce cellular oxidative stress through the generation of reactive oxygen species, resulting in cell damage and cell death. The aim of this study was to determine whether the antioxidant effects of the flavonoid fisetin (3,7,3',4'-tetrahydroxyflavone) included the radioprotection of cells exposed to ${\gamma}$-irradiation. Fisetin reduced the levels of intracellular reactive oxygen species generated by ${\gamma}$-irradiation and thereby protected cells against ${\gamma}$-irradiation-induced membrane lipid peroxidation, DNA damage, and protein carbonylation. In addition, fisetin maintained the viability of irradiated cells by partially inhibiting ${\gamma}$-irradiation-induced apoptosis and restoring mitochondrial membrane potential. These effects suggest that the cellular protective effects of fisetin against ${\gamma}$-irradiation are mainly due to its inhibition of reactive oxygen species generation.
In traditional systems of medicine including homeopathy, the Condurango extract (Con) is often used to cure stomach cancer mainly, without having any scientific validation of its anti-cancer ability. Con has therefore been tested against non-small-cell lung cancer cells (NSCLC) A549 and NCI-H522 (H522) known to contain the KRAS mutation, making them resistant to most chemotherapeutic agents. As cancer cells generally defy cytotoxicity developed by chemopreventive agents and escape cell death, any drug showing the capability of preferentially killing cancer cells through apoptosis is worth consideration for judicious application. A549 and H522 cells were exposed to $0.35{\mu}g/{\mu}l$ and $0.25{\mu}g/{\mu}l$ of Con, respectively, for 48 h and analysed based on various protocols associated with apoptosis and DNA damage, such as MTT assay to determine cell viability, LDH assay, DNA fragmentation assay, comet assay, and microscopical examinations of DNA binding fluorescence stains like DAPI, Hoechst 33258 and acridine orange/ethidium bromide to determine the extent of DNA damage made in drug-treated and untreated cells and the results compared. Changes in mitochondrial membrane potential and the generation of reactive oxygen species were also documented through standard techniques. Con killed almost 50% of the cancer cells but spared normal cells significantly. Fluorescence studies revealed increased DNA nick formation and depolarized membrane potentials after drug treatment in both cell types. Caspase-3 expression levels confirmed the apoptosis-inducing potential of Con in both the NSCLC lines. Thus, overall results suggest considerable anticancer potential of Con against NSCLC in vitro, validating its use against lung cancer by practitioners of traditional medicine including homeopathy.
In this study, a novel method was proposed to test the integrity of water treatment system specifically equipped with membrane filtration process. We applied the silica particles coated with a fluorescent agent (rhodamine B isothiocyanate) as a surrogate to detect a membrane process integrity and evaluate the reliability of effluent quality in the system. Additionally, a series of experiments was conducted to evaluate the sensitivity of the method through the laboratory scale experiment. The laboratory scale experiments showed that the feasibility of application of proposed method to detect a breach or damaged part on the membrane surface. However, the sensitivity on predicting the area of a breach was significantly influenced by the testing conditions such as a concentration of surrogate, filtration flux, and detection time. The lowest error of predicting the area of breach was 3.5% at the testing condition of surrogate concentration of 80 mg/L injected with flux of $20L/m^2/hr$ for 10 minutes of detection time for the breach having the actual area of $7.069mm^2$. However, the error of estimation was increased at the small breach with area less than $0.785mm^2$. A future study will be conducted to estimate a damaged area with more accuracy and precision.
As old concrete pavements of over 20years in age are increasing in expressways, the repair and rehabilitation of concrete pavement have become an important issue. Although asphalt overlay is widely used as an alternative to rehabilitate the old concrete pavement, problems due to infiltrated water such as reflection crack and pothole are imposing a very serious threat to its performance. This study proposes waterproof membrane as a solution to minimize the damage due to reflection crack and infiltrated water, and accelerated pavement testing was carried out for the performance comparison of composite pavement with waterproof membrane and ordinary tack coating. The experiment used water spraying to simulate rainfall, and the behavior and moisture resistance characteristics of overlay pavement were analyzed. The experimental result indicated that the strain pattern of waterproof membrane section differed from ordinary tack coating section because waterproof membrane caused the asphalt pavement and concrete pavement to move together. Additionally, since waterproof membrane minimized the infiltration of water and delayed the occurrence of reflection crack by about 70% in comparison to ordinary tack coating method. Moreover, the damage due to infiltrated water also decreased.
The pilot study was conducted to (i) investigate the ability of various membrane integrity monitoring methods to detect changes in membrane integrity during operation, and (ii) determine the impact of membrane damage on microbial removal by microfiltration. Two variations of air pressure hold tests were investigated for direct integrity monitoring: pressure decay (PD) and diffusive air flow (DAF) tests which are most commonly used integrity tests for microfiltration (MF) membranes. Both PD and DAF tests were sensitive enough to detect one damaged fiber out of 66,000 under field operaing conditions. Indirect integrity monitoring such as turbidity and particle counting, however, responded poorly to defects in membrane systems. Microbial challenge study was performed using both new and deliberately damaged membranes, as well as varying the state of fouling of the membrane. This study demonstrated that MF membrane with nominal pore size $0.2{\mu}m$ was capable of removing various pathogens including coliform, spore, and cryptosporidium, at the level required by drinking water regulations, even when high operating pressures were applied. A sharp decrease in average log reduction value (LRV) was observed when one fiber was damaged, emphasizing the importance of membrane integrity in control of microbial contamination.
Hemocyte parameters of the wild Pacific oyster Crassostrea gigas inhabiting intertidal zones in small bays (Gwangyang and Jinhae Bay) on the southern coast of Korea were evaluated using flow cytometry and neutral red retention (NRR) assay. Morphological features, cell count, mortality, DNA damage, phagocytosis, and lysosomal membrane stability of hemocytes were analyzed. Three types of hemocytes were identified in the oyster hemolymph: granulocytes, hyalinocytes, and blast-like cells. Immune related functions of hemocyte including phagocytosis and lysosomal membrane stability were significantly different among the study areas (P<0.05), while cell count, mortality, and DNA damage of hemocytes were not significantly different. In Gwangyang Bay, phagocytosis of granulocytes and lysosomal membrane stability of oyster hemocytes inhabiting inside bay were significantly lower than those of oyster hemocytes in outside bay (P<0.05), indicating that oysters in inside bay of Gwangyang were relatively suppressed the immunological function in hemocytes. Contrary to Gwangyang Bay, immune parameters of oyster hemocytes in Jinhae Bay not showed the difference between sampling sites. In conclusion, flow cytometry and NRR assay using oyster hemocyte has a powerful tool to investigate the cell level in a short time due to no-preprocessing of material.
Liver tissue damage by a radiation exposure caused a jaundice and ascitic fluid e form harden atrophy. The reason for this lies in morphological damage of a liver cells. This study tried that observe damage mechanism of the cell organelles. It was especially observed mitochondria, endoplasmic reticulum and nuclear membrane associated with energy metabolizable. also, This study had with a radio-protector development research at the same time. Radio-protector was used to alliin that has an blood flow increase. Cell observation make used of transmission electron microscope(TEM). The result of an experiment, 7Gy of whole body irradiation was caused an inflammation in cell organelles and hypertrophy of the nucleus membrane. After 20 days, The hepatocyte has been observed in a damaged membrane on peroxisome, mitochondria and vacuole of the cell organelles. After 30 days, The hepatocyte has been observed in disconnected ribosomes on a rough endoplasmic reticulum. There was looked a giant lipoblast. There was clearly normal observed a mitochondria and nucleus membrane in the hepatocyte after alliin injection. aslo, It was no damaged the nucleus membrane. therefore, It was identified portion a radio-protector effect from alliin.
The fungal cell wall and membrane are the principal targets of antifungals. Herein, we report that myricetin exerts antifungal activity against Candida albicans by damaging the cell wall integrity and notably enhancing the membrane permeability. In the presence of sorbitol, an osmotic protectant, the minimum inhibitory concentration (MIC) of myricetin against C. albicans increased from 20 to 40 and 80 ㎍/ml in 24 and 72 h, respectively, demonstrating that myricetin disturbs the cell wall integrity of C. albicans. Fluorescence microscopic images showed the presence of propidium iodide-stained C. albicans cells, indicating the myricetin-induced initial damage of the cell membrane. The effects of myricetin on the membrane permeability of C. albicans cells were assessed using crystal violet-uptake and intracellular material-leakage assays. The percentage uptakes of crystal violet for myricetin-treated C. albicans cells at 1×, 2×, and 4× the MIC of myricetin were 36.5, 60.6, and 79.4%, respectively, while those for DMSO-treated C. albicans cells were 28.2, 28.9, and 29.7%, respectively. Additionally, myricetin-treated C. albicans cells showed notable DNA and protein leakage, compared with the DMSO-treated controls. Furthermore, treatment of C. albicans cells with 1× the MIC of myricetin showed a 17.2 and 28.0% reduction in the binding of the lipophilic probes diphenylhexatriene and Nile red, respectively, indicating that myricetin alters the lipid components or order in the C. albicans cell membrane, leading to increased membrane permeability. Therefore, these data will provide insights into the pharmacological worth of myricetin as a prospective antifungal for treating C. albicans infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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