In this study, we investigated the antioxidant effect of extract from Monascus pillosus, on the human wild-type p53 and p21 expressing A549 lung epithelial cell line and MCF-7 mammary adenocarcinoma cell line stimulated by NO. $P21^{waf/cip1}$ was identified as a gene induced in senescent cells. It is a cyclin-dependent kinase inhibitor and has been shown to cause cell cycle arrest and apoptosis. While p53-regulated stimulation of p21 appears to be central for the permanent growth-arrest, the role of p21 in p53-triggered cell death is unclear. Low dose of sodium nitroprusside (SNP) induced the development of senescence associated with increased expression of p53 and p21 in A549 cells. Inhibition of p21 transactivating activity requires high level correlates with the amount of p53 necessary to cause cell death. Association of p21 and p53 results in inhibition of p21-stimulated transcription. This requires a higher p53 level than is necessary for transcriptional activation of endogenous p53-responsive gene but correlates well with the level of p53 necessary to cause cell death. Exposure to W-1 inhibited oxidative stresses-induced senescence-like arrest, resulting in a significant reduction in p53 and p21 steady state levels. These results suggest that p53 and p21 play a central role in the onset of senescence. Thus, it is important to emphasize control of oxidative balance in tumor prevention and aging.
Prolactin (PRL) is a pituitary hormone involved in various physiological processes, including lactation, mammary development, and immune function. To further investigate the in vivo and comparative endocrine roles of PRL, mouse PRL cDNA fused to the cytomegalovirus promoter, was introduced into muscle by direct injection. Previously we studied the function of rat PRL using the same protocol. PRL mRNA was detected in the muscle following injection by RT-PCR and subsequent Southern blot analysis. PRL was also detected and Western blot analysis revealed a relatively high level of serum PRL. In the pCMV-mPRL-injected female mice, the estrous cycle was extended, especially in diestrus stage and the uterus thickening that was shown in normal estrous stage was not observed. In the pCMV-mPRL-injected male mice, new blood vessels were first found at 5 weeks of age and fully developed blood vessels were found after 8 weeks in the testis. The number of Leydig cells increased within the testis and the testosterone level in serum was observed high. Finally, the number of white blood cells (WBCs) increased in the pCMV-mPRL-injected mice. The augmentation of WBCs persisted for at least 20 days after injection. When injection was combined with adrenalectomy, there was an even greater increase in number of WBCs, especially lymphocytes. This increase was returned normal by treatment with dexamethansone. Taken together, our data reveal that intramuscularly expressed mouse PRL influences reproductive functions in female, induces formation of new blood vessels in the testis, and augments WBC numbers. Of notice is that the Leydig cell proliferation with increased testosterone was conspicuously observed in the pCMV-mPRL-injected mice. These results also suggest subtle difference in function of PRL between mouse and rat species.
Genistein is an active component of legumes and other related food shown to be associated with prevention of degenerative diseases such as cancer through inducing signaling pathways. Treatment of genistein resulted in the induction of apoptosis in the cultured cancer cells. This induction of apoptosis was demonstrated by the Tunel assay in these cells. Unveiling the potential of genistein in cytotoxicity via apoptosis when it is treated with estrogen can predict the therapeutic capability of genistein in breast cancers in the presence of endogenous estrogen. We have found that apoptosis induced by genistein treatment in the presence of estrogen is agonistic or antagonistic depending on the concentrations and treatment periods applied in MCF-7 breast cancer cells. For the suppression of cell survival, 24 hr of treatment was required to induce a synergistic agonistic response between estrogen and genistein at low concentrations of genistein. After this period, the agonistic pattern of genistein to estrogen disappeared. The decrement of COX-2 expression in MCF-7 cells treated with genistein was accompanied with the activation of AMPK only at a high concentration of genistein. This association between AMPK activation and down-regulation of COX-2 by genistein was dampened in the presence of estrogen. It was also demonstrated that genistein and estrogen regulate cell survival and apoptosis by modulating p53 and caspase-3 in the opposite direction. These results suggest that genistein has the potential to control breast cancer development, and co-treatment with estrogen can cause agonistic or antagonistic action on breast cancer cell control.
Human milk contains a number of nutritional and bioactive molecules including microorganisms that constitute the so-called "Human Milk Microbiota (HMM)". Recent studies have shown that not only bacterial but also viral, fungal, and archaeal components are present in the HMM. Previous research has established, a "core" microbiome, consisting of Firmicutes (i.e., Streptococcus, Staphylococcus), Proteobacteria (i.e., Serratia, Pseudomonas, Ralstonia, Sphingomonas, Bradyrhizobium), and Actinobacteria (i.e., Propionibacterium, Corynebacterium). This review aims to summarize the main characteristics of HMM and the role it plays in shaping a child's health. We reviewed the most recent literature on the topic (2019-2021), using the PubMed database. The main sources of HMM origin were identified as the retrograde flow and the entero-mammary pathway. Several factors can influence its composition, such as maternal body mass index and diet, use of antibiotics, time and type of delivery, and mode of breastfeeding. The COVID-19 pandemic, by altering the mother-infant dyad and modifying many of our previous habits, has emerged as a new risk factor for the modification of HMM. HMM is an important contributor to gastrointestinal colonization in children and therefore, it is fundamental to avoid any form of perturbation in the HMM that can alter the microbial equilibrium, especially in the first 100 days of life. Microbial dysbiosis can be a trigger point for the development of necrotizing enterocolitis, especially in preterm infants, and for onset of chronic diseases, such as asthma and obesity, later in life.
K.I. Wee;B.H. Son;Park, Y.H.;Park, J.S.;D.H. Ko;Lee, K.K.;Y.M. Han
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
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pp.60-60
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2001
Human thrombopoietin (hTPO) is a cytokine that plays a central role in megakaryopoiesis by influencing on the development and maturation of megakaryocyte and platelet production. To induce hTPO production in the mammary gland, expression vector was constructed by combining the promoter of bovine beta-casein gene, cDNA of hTPO and neomycine resistance gene for transfection into fibroblasts. Bovine fibroblast cells derived from female ear skin were transfercted with the expression vector using Lipofectamine (Life Technology, NY). Transected cells resistant to G4l8 treatment (600 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) were recovered and colony formation was initiated at 13 days. The colonies with about 1 cm diameter were picked and analysed by PCR. Single transfected cells were individually transferred to enucleated oocytes. After electrofusion, the reconstructed embryos were exposed to calcium ionophore (5uM) for 5 min followed by treatment with 6-DMAP (2.5 mM) for 4h. The nuclear transfer embryos were cultured in CRlaa medium at 38.5C, 5% $CO_2$ for 7 days. Twenty three of 29 (79.3%) colonies were proved to be hTPO transfectants by PCR. The colonies were further passaged and used to produce transgenic embryos using nuclear transfer. Cleavage and developmental rates of reconstructed embryos to the blastocyst stage were 65.1% and 39.4%, respectively Of 22 blastocysts that developed from reconstructed embryos with the transfected cell, 20 embryos (90.9%) were positive for hTPO by using PCR analysis. The results suggest that somatic cell nuclear transfer is efficient for production of transgenic embryos.
Liver cancer, particularly hepatocellular carcinoma (HCC), poses a significant global threat to human lives. To advance the development of innovative diagnostic and treatment approaches, it is essential to examine the hidden features of HCC, particularly its 3D genome architecture, which is not well understood. In this study, we investigated the 3D genome organization of four HCC cell lines-Hep3B, Huh1, Huh7, and SNU449-using in situ Hi-C and assay for transposase-accessible chromatin sequencing. Our findings revealed that HCC cell lines had more long-range interactions, both intra-and interchromosomal, compared to human mammary epithelial cells (HMECs). Unexpectedly, HCC cell lines displayed cell line-specific compartmental modifications at the megabase (Mb) scale, which could potentially be leveraged in determining HCC subtypes. At the sub-Mb scale, we observed decreases in intra-TAD (topologically associated domain) interactions and chromatin loops in HCC cell lines compared to HMECs. Lastly, we discovered a correlation between gene expression and the 3D chromatin architecture of SLC8A1, which encodes a sodium-calcium antiporter whose modulation is known to induce apoptosis by comparison between HCC cell lines and HMECs. Our findings suggest that HCC cell lines have a distinct 3D genome organization that is different from those of normal and other cancer cells based on the analysis of compartments, TADs, and chromatin loops. Overall, we take this as evidence that genome organization plays a crucial role in cancer phenotype determination. Further exploration of epigenetics in HCC will help us to better understand specific gene regulation mechanisms and uncover novel targets for cancer treatment.
본 연구는 bisphenol A의 실제 식품을 통한 사람의 노출농도에서 에스트로젠 효과를 알아보기 위하여 사람의 유방암 세포인 MCF-7와 난소를 적출한 무흉선 마우스를 이용하여 살펴보았다. MCF-7세포를 이용한 genistein 과 bisphenol A가 용매대조군과 무처치대조군에 비하여 genistein(10nM, 100nM, 1uM, 10uM)과 bisphenol A(2ng/ml, 4ng/ml, 8ng/ml, 16ng/ml)의 세포 성장촉진 효과가 용량의 증가에 따라 증가하는 경향을 보였다. genistein의 경우 1uM을 정점으로 세포성장촉진이 극에 달하다가 10uM 투여군에서 1uMxndurns에 비하여 약 40% 정도 세포성장이 감소하였으나 대조군에 비하여 여전히 세포의 성장을 촉진하였다. 이러한 결과는 bisphenol A와 genistein이 에스트로젠과 같이 에스트로젠 수용체와 결합하는 경로로 MCF-7세포의 성장을 촉진한 것으로 생각된다. 따라서 이러한 결과를 확인하기 위하여, 에스트로젠 의존적으로 유전자가 발현되는 유전자 중의 하나인 pS2 유전자의 발현을 살펴보았다. Genistein과 bispheno A가 pS2 유전자의 발현을 유도하는 것이 northern blot 분석에 의하여 관찰되었다. 또한, 21일령의 무흉선 마이스를 이용한 in vivo 연구에서, 무처치 대조군에 비하여 genistein과 bisphenol A를 투여한 마우스 군에서 유선의 발달과 둥-bud 의 형성이 유의하게 증가됨이 관찰되었다(p<0.05). 결론적으로, bispheno A와 genistein이 MCF-7 세포에서 에스트로젠 효과가 매우 낮은 농도에서도 나타날 수 있다는 것은 식품위생상 큰 의미를 갖고 있으며, 이러한 물질들이 실제 사람에서의 위해성 특히 성장기 유아의 위해성에 대하여 좀더 면밀히 연구되어야 할 것이다.광에 따른 입자의 분쇄보다는 마광시 구형의 입자가 소성변형으로 인해 flake형상으로 변하여 체질입도분석시 입도의 증가를 초래하였으며, 반면 철산화물은 마광에 따른 입자의 미세화가 발생함을 볼 수 있었다. 나. 철분구 외수 실험 1) 광양의 dust를 40분간 마광하여 심강(분급)실험을 행했을 때 Fe 99.17% 품위 철분말을 37.8% 회수할 수 있었다. 2) 재항의 C/F dust를 40분간 마광하여 심강(분급)실험을 행했을 때 Fe 98.38% 품위의 철분말을 44.42% 회수할 수 있었다. 3) 70 gauss 자석을 사용하여 자력선별을 행했을 때 +65-200 mesh 사이에서 Fe 품위 98% 이상의 철분말을 회수 할 수 있으나 회수율(14%)이 낮다.0^{\circ}C$의 경우 20시간(20時間)에 가장 색도(色度)가 높아 갈변반응속도(褐變反應速度)가 0.2로 나타났다. the esophageal mucous cells pf Bryzoichthys lysimus contained small amount of neutral mucin, while on the other hand a feww mucous cells contained small amount of neutral mucin and minimal amount of sialomucin. But the esophageal mucous cells of Takifugu pardalis contained considerable amount of neutral mucin only.분해가 더욱 촉진되었으며, 30℃에서 교반 처리를 행한 경우가 10℃에서 교반 처리를 행한 경우 보다 지방분해가 더욱 촉진되었다. 산양유 원유는 30℃에서 교반 처리 시간이 연장되어도 지방분해는 뚜렷한 증가를 나타내지 않았다.와 표준체중군 여자에게서 가장 높게 나타났다. 5. 남자의 53.9%, 여자의 83.2%가 체중 조절에 관심이 있다고
Soyfoods have potential roles in the prevention and treatment of chronic diseases, most notably cancer, osteoporosis, and heart disease. There is evidence that carcinogenesis are supressed by isolated soybean derived products in vivo such as a protease inhibitor, phytic acid, saponins and isoflavones. It is believed that supplementation of human diets with soybean products markedly reduces human cancer mortality rates. Especially, recent papers recognize the potential benefit of soybean isoflavone components for reducing the risk of various cancers. Isoflavones exhibit a multitude of medicinal effects that influence cell growth and regulation, which may have potential value in the prevention and treatment of cancer. In addition to potential biological effects, soybean isoflavones have the important physiological functions such as the induction of Bradyrizobium japonicum nod genes and the responses of soybean tissues to infection by Phytophthora megasperma as well as biochemical activities such as antifungal and antibacterial actions. Genistin, daidzin, glycitin and their aglycone (genistein, daidzein, glycitein) are the principal isoflavones found in soybean. Malonyl and acetyl forms have also been detected but they are thermally unstable and are usually transformed during the processing in glucoside form. Most soy products, with the exception of soy sauce, alcohol-extracted soy protein concentrate, and soy protein isolate, have total isoflavone concentrations similar to those in the whole soybean. Soybean-containing diets inhibit mammary tumorigenesis in animal models of breast cancer, therefore, it is possible that dietary isoflavones are an important factor accounting for the lower incidence and mortality from breast cancer. Of the total soybean seed isoflavones, $80\~90\%$ were located in cotyledons, with the remainder in the hypocotyls. The hypocotyls had a higher concentrations of isoflavones on a weight basis compared with cotyledons. Isoflavone contents were influenced by genetics, crop years, and growth locations. The effect of crop year had a greater impact on the isoflavone contents than that of location. The climate condition might be the attribution factor to variation in isoflavone contents. Also, while the isoflavone content of cotyledons exhibited large variations in response to high temperature during seed development, hypocotyls showed high concentration in isoflavone content. So, it is concluded that one of the factors affecting isoflavone content in soybean seeds is temperature during seed development. High temperature, especially in maturity stage, causes lower isoflavone content in soybean seed. It is also suggested that there may exist a different mechanism to maintain isoflavone contents between cotyledon and seed hypocotyls. In a conclusion, soy foods may be able to have a significant beneficial impact on public health.
배경: 최근의 약물 용출 스텐트의 발전으로 급성 관동맥 증후군의 치료에 있어서 외과의 영역이 축소되어 가고 있다. 이에 저자들은 급성 관동맥 증후군 환자들의 수술적 치료에 대한 결과를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 2001년 1월부터 2005년 8월까지 416명의 환자가 수술 전 ST분절의 상승을 동반하지 않은 급성 관동맥 증후군으로 진단되어 관상동맥 우회로 조성술을 시행 받았다. 평균 연령은 $61.8{\pm}9.0$세였고 남자가 276명(66.3%), 여자가 140명(33.7%)이었다. 심장혈관 조영술에서 삼혈관 질환이 324예(77.9%)였고 좌주 관상동맥 질환은 92예(22.1%)였다. 관상동맥 질환의 위험 인자로는 고혈압이 236예(56.7%), 당뇨가 174예(41.8%)에서 있었다. 종래의 심폐기하 관상동맥 우회로 조성술은 194예 (46.6%), 무인공심폐기하 관상동맥 우회로 조성술은 222예(53.4%)에서 시행되었다. 사용된 도관은 좌내흉동맥이 396예(95.2%), 우내흉동맥 85예(20.4%), 요골동맥 278예(66.8%), 복재정맥 316예(76.0%) 등으로 대동맥 조작 없이 동맥 도관만을 사용한 경우는 97예(23.3%)였다. 총 원위부 문합 수는 1,306개였고 환자 한 명당 평균 원위부 문합수는 $3.21{\pm}1.71$개였다. 결과: 수술 사망은 4예(1.0%), 수술 후 합병증은 65예(15.6%)에서 발생하였다. 152예에서 관상동맥 우회로 조성술 후 1개월에서 36개월 사이에 다중검출 전산화 단층촬영기(multi-directional computed tomography)로 각 이식편의 개존율을 추적 관찰 결과, 좌내흉동맥 95.3%(141/148), 우내흉동맥 98.1% (51/52), 요골동맥 92.2% (106/115), 복재정맥 89.0% (89/100)등의 개존율을 보였다. 결론: 급성 관동맥 증후군의 수술적 치료는 비교적 낮은 수술사망률과 우수한 이식편의 개존율을 보여주었다. 향후 약물 용출 스텐트를 이용한 내과적 치료와 장기 성적에 대한 비교 연구가 필요하다.
당 단백질에 붙어 있는 당사슬 구조는 형질전환 돼지 유즙으로 분비되는 의약용 단백질의 생물학적 활성, 안정성 그리고 안전성에 영향을 줄 수 있다. 형질전환 동물을 이용한 치료용 당 단백질 생산은 유선 세포에서 이루어지는 당사슬 부가능력에 의해 제한되며, 균일한 당사슬 형태를 가지는 당 단백질 생산은 도전 과제로 남아있다. ${\beta}$-1,3-N-acetylglucosaminylatransferase1 (B3GNT1) 유전자는 N-아세틸글루코사민에 갈락토오스 잔기를 부착시키는 단백질 당화기작에 중요한 효소이지만, 돼지 당 전이효소에 대한 정보는 매우 제한적이다. 따라서, 돼지 B3GNT1 (pB3GNT1) 유전자를 클로닝하고 N-아세틸글루코사민에 갈락토오스 잔기를 부착시키는 기능적 특성을 조사하였다. 몇가지 다른 프라이머를 사용하여 전체 전사영역(ORF)을 함유하는 부분적인 pB3GNT1 mRNA 염기서열을 간 조직으로부터 분리하였다. 클로닝 된 pB3GNT1의 ORF는 1,248개의 뉴클레오티드를 가지며, 415개 아미노산 잔기로 구성되어 있었다. pB3GNT1 유전자의 장기별 발현특성은 성돈 및 자돈의 여러 기관에서 분석하였다. pB3GNT1 mRNA 발현 수준은 심장, 소장 보다는 근육에서 높았지만 폐에서는 낮았다. pB3GNT1의 기능적 특성 분석을 위해 돼지 신장 세포주(PK-15)에서 pB3GNT1 유전자의 안정적인 발현을 확립하였다. 그 결과, PK-15 세포에서 pB3GNT1 발현에 의한 당화 패턴은 총 시알산 증가에는 영향을 미치지 않지만, poly-N-아세틸글루코사민은 증가하는 것으로 나타났다. 본 연구는 생물반응기로 형질전환 돼지를 이용할 때 희망하는 당사슬을 부가하여 치료 가능성을 높이며 개선된 활성을 나타내는 당단백질 생산에 도움이 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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