The purpose of this study was to investigate the effects of Violae Herba Water Extract (VH) on the proinflammatory factors of lipopolysaccharide (LPS)-induced on the production of inflammatory mediators in RAW 264.7 mouse macrophages cells. We examined effect of Violae Herba Water Extract on the cell viability of RAW 264.7 mouse macrophages cells. Futhermore, After 24 hours treatment we investigated anti-inflammatory effect of Violae Herba Water Extract by the production of Bio-Plex cytokine assay, concentrations of various cytokines such NO, $interleukin(IL)-1{\beta}$, tumor necrosis factor ${\alpha}(TNF-{\alpha})$ and IL-6. The water extract of Violae Herba significantly inhibited the production of NO, $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and IL-6 at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/mL$ in the LPS-induced RAW 264.7 mouse macrophages cells with no changes in the cell viability of them. These results suggest that water extract of Violae Herba has anti-inflammatory effect related with its inhibition of proinflammatory cytokines such as $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and IL-6 in the LPS-induced RAW 264.7 mouse macrophages cells. Further research is needed to develop therapeutic agents for inflammatory diseases using Violae Herba.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.46
no.11
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pp.1300-1307
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2017
Cheonggukjang is well known as a traditional fermented food in Korea and has various biological activity. In this study, immune-enhancing activity of extract of cheonggukjang fermented with Bacillus amyloliquefaciens (SRCM100730) was examined in RAW 264.7 murine macrophages. Treatment with extract augmented production of nitric oxide (NO) and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) from RAW 264.7 macrophages in a dose-dependent manner. Similarly, increased mRNA expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and $TNF-{\alpha}$ was observed. In addition, the extract synergistically enhanced production of NO and $TNF-{\alpha}$ from lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. Analysis of intracellular pathways revealed that the immune-enhancing activity of cheonggukjang extract was related to activation of mitogen-activated protein kinases (MAPK) and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$). These results suggest that cheonggukjang fermented with B. amyloliquefaciens (SRCM100730) is a beneficial food effective for activation of immune responses.
A quantitative assay was performed on the effects of gamma-irradiation (30- 300 Gy) on intracellular proliferation of Toxoplosmn gonnii RH tachyzoites in human leukemic HL-60 cells and murine peritoneal macrophages by means of 3H-uracil uptake assay. Infected non-irradiation group (NI) and uninfected group (incubating only host cells) were prepared. The 3H-uracil uptake by tachyzoites of NI group 12-24 hrs after infection was 2,190-4,787 counts per minute for macrophages and 2,967-8,254 for HL-60 cells, whereas the irradiated tachyzoites revealed only 381-703 (100 Gy) and 218-408 (300 Gy) for macrophages, and 1,911-2,618 (30 Gy), 1,253-1,384 (70 Gyl, 1,013-1,090 (100 Gyl, and 483-588 (300 Gy) for HL-60 cells. The proliferation inhibition rate was similar in macrophages and HL-60 cells, for example, 89-94% and 80-94% respectively by 300 Gy, 12-24 hrs after infection. It is concluded that RH tachyzoites of T gondii are severely affected by gamma-irradiation in their capability of Intracellular proliferation.
Black chokeberry (Aronia melanocarpa) has been suggested to exert antioxidant and anti-inflammatory effects due to its high polyphenol content. However, the mechanisms underlying the effects of black chokeberry on the alterations of nuclear factor E2-related factor 2 (NRF2) and nuclear factor κB (NF-κB) in macrophages have not been thoroughly studied. In this study, we investigated the protective effects of polyphenol-rich black chokeberry extract (CBE) against lipopolysaccharide (LPS)-induced oxidative stress and inflammation in RAW 264.7 macrophages. CBE significantly attenuated the increase of cellular reactive oxygen species (ROS) levels and the nuclear translocation of NRF-2 in LPS-stimulated macrophages. The mRNA abundances of Nrf2 and its downstream antioxidant genes were significantly decreased in LPS-stimulated macrophages. The LPS-induced mRNA expression of proinflammatory cytokines was significantly inhibited by reducing the nuclear translocation of NF-κB by CBE. These data suggest that black chokeberry may be used for the prevention of oxidative stress and inflammation-associated disease.
Aerial parts of Artemisia asiatica (Compositae) have been traditionally used as an oriental medicine for the treatment of inflammatory and ulcerogenic diseases. In the present study, artemisolide was isolated as a nuclear factor $(NF)-{\kappa}B$ inhibitor from A. asiatica by activity-guided fractionation. Artemisolide inhibited $NF-{\kappa}B$ transcriptional activity in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages RAW 264.7 with an $IC_{50}$ value of $5.8\;{\mu}M$. The compound was also effective in blocking $NF-{\kappa}B$ transcriptional activities elicited by the expression vector encoding the $NF-{\kappa}B$ p65 or p50 subunits bypassing the inhibitory kB degradation signaling $NF-{\kappa}B$ activation. The macrophages markedly increased their $PGE_2$ and NO production upon exposure to LPS alone. Artemisolide inhibited LPS-induced $PGE_2$ and NO production with $IC_{50}$ values of $8.7\;{\mu}M$ and $6.4\;{\mu}M$, respectively, but also suppressed LPS-induced synthesis of cyclooxygenase (COX)-2 or inducible NO synthase (iNOS). Taken together, artemisolide is a $NF-{\kappa}B$ inhibitor that attenuates LPS-induced production of $PGE_2$ or NO via down-regulation of COX-2 or iNOS expression in macrophages RAW 264.7. Therefore, artemisolide could represent and provide the anti-inflammatory principle associated with the traditional medicine, A. asiatica.
Hypertriglyceridemia is the main risk factor for atherosclerosis. It is reported that triglyceride (TG) induces macrophage cell death, and is involved in the formation of plaques and development of atherosclerosis. We previously reported that TG-induced cell death of macrophages is mediated via pannexin-1 activation, which increases the extracellular ATP and subsequent increase in potassium efflux, thereby activating the caspase-2/caspase-1/apoptotic caspases, including the caspase-8 pathway. Contrarily, some studies have reported that caspase-8 is an upstream molecule of caspase-1 and caspase-2 in several cellular processes. Therefore, this study was undertaken to investigate whether caspase-8 influences its upstream molecules in TG-stimulated macrophage cell death. We first confirmed that caspase-8 induces caspase-3 activation and poly ADP-ribose polymerase (PARP) cleavage in TG-treated macrophages. Next, we determined that the inhibition of caspase-8 results in reduced caspase-1 and -2 activity, which are upstream molecules of caspase-8 in TG-induced cell death of macrophages. We also found that ATP treatment restores the caspase-8 inhibitor-induced caspase-2 activity, thereby implying that caspase-8 affects the upstream molecules responsible for increasing the extracellular ATP levels in TG-induced macrophage cell death. Taken together, these findings indicate that caspase-8 potentiates the TG-induced macrophage cell death by activating its upstream molecules.
Jo, Joo-hyun;Im, Ji-sung;Kim, Jong-gyu;Park, Jung-hyun;Choi, Hag-soon;Hwang, Geu-won;Song, Yung-sun
Journal of Korean Medicine Rehabilitation
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v.31
no.1
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pp.33-46
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2021
Objectives The aim of this study is to evaluate anti-inflammatory and anti-arthritic effects of Sogyunghwalhyel-tang-gamibang (SGHHTGB) in cell and animal models and also to suggest one of putative mechanisms underlying its anti-arthritic effects. Methods Enzyme-linked immunosorbent assay was applied to measure the concentrations of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-1β, IL-6 and prostaglandin E2 (PGE2) in culture medium and blood serum and nitric oxide (NO) was assayed by Griess reagent. The expressions of inducible NO synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were analyzed by Western blot method. Results In a cell model using RAW264.7 macrophages stimulated with the endotoxin lipopolysaccharide (LPS), the drug, at its non-cytotoxic concentrations, inhibited the production of the pro-inflammatory cytokine TNF-α, IL-1β and IL-6. In addition, it suppressed the expression of the inflammatory enzyme iNOS and COX-2, and reduced the synthesis of the enzyme product NO (as stable nitrite) and PGE2 in activated macrophages. Meanwhile, in an animal model using rheumatic arthritis (RA) mice induced with injection of type II collagen antibody (CAb) and LPS, the drug improved clinical symptom of arthritis and reduced paw thickness and inflammatory cell infiltration. In blood of RA mice, the drug reduced serum levels of TNF-α, IL-1β, IL-6, nitrite, and PGE2, all inflammatory mediators produced by activated macrophages. Conclusions SGHHTGB may ameliorate CAb and LPS-induced RA in mice, presumably by inactivating macrophages that are capable of initiating joint inflammation by producing pro-inflammatory cytokines and expressing inflammatory enzymes.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Polygoni Multiflori Radix Water Extract (PM) on the production of inflammatory mediators in RAW 264.7 mouse macrophages induced by lipopolysaccharide (LPS). Method : We examined effect of PM Extract on the cell viability of RAW 264.7 cells. Futhermore, we investigated anti-inflammatory effect of PM Extract by the production of proinflammatory cytokines such as NO, intracellular calcium, interleukin(IL)-$1{\alpha}$, IL-3, IL-$1{\beta}$, IL-6, interferon inducible protein-10(IP-10), keratinocyte-derived chemokine(KC) and vascular endothelial growth factor(VEGF). Result : No significant changes have been found in the mouse macrophge cell viability by the PM Extract at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/mL$. The water extract of PM significantly inhibited the production of NO and intracellular calcium in the LPS-induced macrophages at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/mL$. The water extract of PM significantly inhibited the production of IL-$1{\alpha}$, IL-${\beta}$, IL-3, IP-10, KC, VEGF in the LPS-induced macrophages at the concentration of 50, 100, and $200{\mu}g/mL$; IL-6 at the concentration of 100 and $200{\mu}g/mL$ ; and IL-17 at $200{\mu}g/mL$. Conclusion : The water extract of PM significantly inhibited the production of NO, intracellular calcium, IL-$1{\alpha}$, IL-3, IL-${\beta}$, IP-10, KC, VEGF at the concentration of 50 ㎍/mL or higher in the LPS-induced macrophages with no changes in the cell viability of them. These results suggest that water extract of Polygoni Multiflori Radix has anti-inflammatory effect regulating the production of proinflammatory cytokines in the LPS-induced macrophages.
Ji-Won, Park;Jin-Mi, Park;Sangmi, Eum;Jung Hee, Kim;Jae Hoon, Oh;Jinseon, Choi;Tran The, Bach;Nguyen, Van Sinh;Sangho, Choi;Kyung-Seop, Ahn;Jae-Won, Lee
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.50
no.4
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pp.574-583
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2022
Ficus vasculosa Wall. ex Miq. (FV) has been used as a herbal medicine in Southeast Asia and its antioxidant activity has been shown in previous studies. However, it has not yet been elucidated whether FV exerts anti-inflammatory effects on activated-macrophages. Thus, we aimed to evaluate the ameliorative property of FV methanol extract (FM) on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses and the underlying molecular mechanisms in RAW264.7 macrophages. The experimental results indicated that FM decreased the production of inflammatory mediators (NO/PGE2) and the mRNA/protein expression of iNOS and COX-2 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. FM also reduced the secretion of interleukin (IL)-1β, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-α and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Results also demonstrated that FM improved inflammatory response in LPS-stimulated A549 airway epithelial cells by inhibiting the production of cytokines, such as IL-1β, IL-6 and TNF-α. In addition, FM suppressed MAPK activation and NF-κB nuclear translocation induced by LPS. FM also upregulated the mRNA/protein expression levels of heme oxygenase-1 and the nuclear translocation of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 in RAW264.7 cells. In an experimental animal model of LPS-induced acute lung injury, the increased levels of molecules in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid were suppressed by FM administration. Collectively, it was founded that FM has anti-inflammatory properties on activated-macrophages by suppressing inflammatory molecules and regulating the activation of MAPK/NF-κB signaling.
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