Objectives : Eucommiae cortex is reported that it helps bone and skeletal muscle stronger. In case of bone, many report is presented, but reports related to skeletal muscle are rarely existed. So in order to investigate effects of Eucommiae cortex on the skeletal muscle atrophy following stroke, cerebral infarct was induced by the middle cerebral artery occlusion (MCAO) in the rats. Methods : In order to induce MCAO rats, nylon suture was advanced and then blocked middle cerebral artery(MCA). Water extract of Eucommiae cortex was treated for 15 days, once a day orally, after the MCAO. Effects were evaluated with muscle weights, muscle fiber type composition, cross-sectioned area of muscle fibers in soleus and gastrocnemius of the unaffected and affected hind limbs. And MyoD protein expression in gastrocnemius was demonstrated with immunohistochemistry and western blotting. Results : In the affected hind limb of the MCAO rats, muscle weight loss of gastrocnemius and tibialis anterior muscles were attenuated by Eucommiae cortex treatment. In soleus muscle of the affected hind limb of the MCAO rats, increase of type-I fibers and decrease of type-II fibers were induced by Eucommiae cortex treatment. In soleus muscle of the affected hind limb of the MCAO rats, decrease of cross-sectioned areas of type-I fibers was attenuated by Eucommiae cortex treatment. In gastrocnemius muscle of the affected hind limb of the MCAO rats, increase of type-I fibers and decrease of type-II fibers were induced by Eucommiae cortex treatment. In gastrocnemius muscle of the affected hind limb of the MCAO rats, decreases of cross-sectioned areas of type-I and type-II fibers were attenuated by Eucommiae cortex treatment. In gastrocnemius muscle of the affected and unaffected hind limb of the MCAO rats, MyoD expressions were increased by Eucommiae cortex treatment. Conclusions : These results suggest that Eucommiae cortex has a protective effect against muscle atrophy, through the inhibition of the muscle cell apoptosis, following the central nervous system demage.
Jang, Y. S.;Yoon, D. H.;Kim, T. H.;Cheong, I. C.;Jo, J. K.
Journal of Animal Science and Technology
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v.45
no.2
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pp.169-182
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2003
To understand the structure and regulation of bovine ADRP (Adipocyte Differentiation Related Protein) gene, we have isolated the genomic clone of bovine ADRP and determined its sequence. A genomic Southern blot analysis confirmed that ADRP gene is present as a single copy in bovine genome and the ADRP gene spans 12 kb. Bovine ADRP genomic clone, HwADRPg-1, had 8 exons and 7 introns, and all splicing sites conformed to the GT/AG rule with the exon-intron boundaries located exactly. Analysis of the upstream 649 bp of the sequence of HwADRPg-1 showed that it does not contain any canonical TATAA boxes; however Sp1 binding sites and CAAT boxes are found. The promoter contained potential binding sites for AP-1, AP-2 and several putative transcription factor binding sites. The 5'-flanking region of HwADRPg-1 contained muscle specific transcription activator Myo G and C/EBP (CCAAT/ enhancer binding protein) recognizing site. These results suppose that the Myo G transcription activator regulate the transcription of bovine ADRP gene in muscular tissue and its transcriptional activity was triggered by degree of muscular development. Our results provide the necessary analysis for other flanking sequences are needed in addition to the proximal cis elements of this promoter to confer adipocyte differentiation-dependent or growth-dependent transcriptional control.
Byun, Sang Kyung;An, Tae Hyeon;Son, Min Jeong;Lee, Da Som;Kang, Hyun Sup;Lee, Eun-Woo;Han, Baek Soo;Kim, Won Kon;Bae, Kwang-Hee;Oh, Kyoung-Jin;Lee, Sang Chul
Molecules and Cells
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v.40
no.9
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pp.667-676
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2017
Abnormal differentiation of muscle is closely associated with aging (sarcopenia) and diseases such as cancer and type II diabetes. Thus, understanding the mechanisms that regulate muscle differentiation will be useful in the treatment and prevention of these conditions. Protein lysine acetylation and methylation are major post-translational modification mechanisms that regulate key cellular processes. In this study, to elucidate the relationship between myogenic differentiation and protein lysine acetylation/methylation, we performed a PCR array of enzymes related to protein lysine acetylation/methylation during C2C12 myoblast differentiation. Our results indicated that the expression pattern of HDAC11 was substantially increased during myoblast differentiation. Furthermore, ectopic expression of HDAC11 completely inhibited myoblast differentiation, concomitant with reduced expression of key myogenic transcription factors. However, the catalytically inactive mutant of HDAC11 (H142/143A) did not impede myoblast differentiation. In addition, wild-type HDAC11, but not the inactive HDAC11 mutant, suppressed MyoD-induced promoter activities of MEF2C and MYOG (Myogenin), and reduced histone acetylation near the E-boxes, the MyoD binding site, of the MEF2C and MYOG promoters. Collectively, our results indicate that HDAC11 would suppress myoblast differentiation via regulation of MyoD-dependent transcription. These findings suggest that HDAC11 is a novel critical target for controlling myoblast differentiation.
This study describes the effect of myo-inositol on sustained cell division and plant regeneration from cotyledon-derived protoplast of cabbage (Brassica oleracea var. capitata). Freshly isolated protoplasts were cultured in modified Murashige and Skoog (MS) medium removed ammonia ions and containing $0.4\;mg\;l^{-1}$ thiamine HCl, $100\;mg\;l^{-1}$ myo-inositol, $2\;mgl^{-1}$ 2,4-D, $0.5\;mgl^{-1}$ BA, $30\;gl^{-1}$ sucrose and several concentrations of myo-inositol (2, 4, 6, 8, 10% (w/v)) as an osmotic stabilizer. After 3 weeks of culture in the dark at $25^{\circ}C$, the plating efficiency of cabbage protoplasts reached to $22.5{\pm}2.9%$ when cultured in modified MS medium supplemented with $2\;mgl^{-1}$ 2,4-D, $0.5\;mgl^{-1}$ BA, $30\;gl^{-1}$ sucrose and 8% (w/v) of myo-inositol at a density of $2{\times}10^5$ protoplasts/ml. Rapidly growing cell colonies after 3 weeks of culture were transferred to the same culture medium removed osmoticum. To induce shoot regeneration from calluses, calluses with about 2 mm in diameter were transferred to the MS medium containing $2\;mgl^{-1}$ BA and $0.5\;mgl^{-1}$ NAA. After further three weeks of incubation onto the medium in the light, green shoots were formed on the surface of calluses at a frequency of 30%. Upon transfer to half-strength MS basal medium, roots were formed onto the bottom of regenerated shoots without auxin treatments. These regenerated plantlets were successfully acclimatized to soil transfer, grown to normal mature plants. The cabbage protoplast culture system established in this study could be applied for production of somatic hybrids or cybrids by asymmetric protoplast fusion and mass proliferation of elite somatic clones of cabbage.
Park, Jinryong;Lee, Jeongeun;Song, Ki-Duk;Kim, Sung-Jo;Kim, Dae Cheol;Lee, Sang Cheol;Son, Young June;Choi, Hyun Woo;Shim, Kwanseob
Animal Bioscience
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v.34
no.8
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pp.1392-1402
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2021
Objective: The growth rate of pigs is related to differentiation and proliferation of muscle cells, which are regulated by growth factors and expression of growth-related genes. Thus, the objective of this study was to establish optimal culture conditions for Jeju black pig (JBP) muscle cells and determine the relationship of various factors involved in muscle growth with the proliferation of JBP muscle cells. Methods: Muscles were taken from the femur skeletal muscle of JBP embryos. After isolation of the muscle cells, cells were cultured in a 6-well plate under four different culture conditions to optimize culture conditions for JBP muscle cells. To analyze proliferation rate of JBP muscle cells, these muscle cells were seeded into 6-well plates at a density of 1.5×105 cells per well and cultured for 3 days. Western blot and quantitative real-time polymerase chain reaction were applied to verify the myogenic differentiation 1 (MyoD) expression and growth-related gene expression in JBP muscle cells, respectively. Results: We established a muscle cell line from JBP embryos and optimized its culture conditions. These muscle cells were positive for MyoD, but not for paired box 7. The proliferation rate of these muscle cells was significantly higher in a culture medium containing bFGF and epidermal growth factor + basic fibroblast growth factor (EGF+bFGF) than that without a growth factor or containing EGF alone. Treatment with EGF and bFGF significantly induced the expression of MyoD protein, an important transcription factor in muscle cells. Moreover, we checked the changes of expression of growth-related genes in JBP muscle cells by presence or absence of growth factors. Expression level of collagen type XXI alpha 1 gene was changed only when EGF and bFGF were added together to culture media for JBP muscle cells. Conclusion: Concurrent use of EGF and bFGF increased the expression of MyoD protein, thus regulating the proliferation of JBP muscle cells and the expression of growth-related genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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