소목은 인도, 말레이시아, 중국 남부 등의 열대 아시아에 분포하는 낙엽 관목의 콩과 식물로써, 한방에서는 항통증, 항염증의 용도로 사용된다. 본 연구에서는 국내산 소목의 열수 및 에탄올 추출물의 총 폴레페놀, 총 플라보노이드의 함량 분석과 함께 항산화 및 항암활성 분석을 통해 기능성 소재로의 이용가능성을 살펴보고자 하였다. 소목 열수 추출물은 건소목 100 g에 증류수 2L를 가하여 $65^{\circ}C$의 수조에서 4시간 동안 추출하고 에탄올 추출물은 건소목 100 g에 70% 에탄올 2L를 가하여 $25^{\circ}C$, 108 rpm으로 24시간 동안 진탕 추출하였다. 추출물은 모두 여과, 농축한 후 동결 건조하여 시료로 사용되었다. 총 폴리페놀 함량은 열수 추출물 및 에탄올 추출물에서 각각 22.6 mg GAE/g과 17.6 mg GAE/g으로 나타났으며 총 플라보노이드 함량은 14.5 mg QE/g, 13.2 mg QE/g으로 에탄올 추출물에서 더 높은 함량을 보였다(p<0.05). DPPH 실험결과, 10-800 ug/mL의 농도에서 에탄올 추출물은 36.5-82.8%, 열수 추출물은 26.7-75.5%의 radical 소거능을 각각 나타내었다. DPPH실험과 동일한 농도에서 ABTS radical 소거능 측정 결과, 에탄올 추출물은 5.5-94.9%, 열수 추출물은 5.8-88.8%의 소거능을 각각 나타내었는데, 결과적으로 소목 에탄올 추출물이 열수 추출물에 비해 우수한 항산화력을 가지고 있음을 보여주었다(p<0.05). 소목의 항암 활성 측정을 위해 인체 암세포주인 A-549, HeLa, Hep3B cell에 대해 MTT assay와 SRB assay를 실시한 결과, 소목 에탄올 추출물의 농도가 증가함에 따라 각 세포주에 대한 세포 독성이 증가하는 경향을 보였다. MTT assay와 SRB assay의 모든 실험농도에서 폐암 세포인 A-549에 대해 가장 높은 세포 독성을 나타내었으며, 특히 MTT assay에서는 300 ug/mL의 소목 에탄올 추출물이 A-549 cell에 대해 90% 이상의 높은 암세포 억제효과를 보여주었다. 따라서, 우수한 항산화 활성과 항암 활성을 나타낸 소목 추출물은 향후 다양한 기능성 식품 및 의약 소재로서의 활용이 가능할 것으로 보인다.
참당귀 뿌리 추출물에서 기능성 화장품소재를 개발하고자 하였다. 기기분석시험을 통하여 참당귀 뿌리 추출물에는 유효성분으로서 decursin과 decursinol angelate가 약 97%로 매우 고농도로 존재하였으며 그 비가 약 3:2로 나타났다. 화장품소재 시험으로는 항산화(DPPH free radical scavenging assay), 미백(Tyrosinase inhibition assay, Melanogenesis inhibition assay), 주름개선(Elastase inhibition assay), 자외선 흡수 및 안전성 시험(MTT assay)이 실시되었다. 참당귀 뿌리 추출물은 $15{\mu}g/ml$의 농도에서 tyrosine에 대한 tyrosinase 저해효과가 $45.2{\pm}3.9%$, melanin 생성억제 효과가 $24.2{\pm}12.0$로 미백효과가 우수하였다. 항산화효과는 $240{\mu}g/ml$의 추출물농도에서 DPPH free radical 소거율이 $40.9{\pm}9.1%$로 비교적 우수하였다. 주름개선 효과는 $100{\mu}g/ml$의 추출물농도에서 $12.7{\pm}6.8%$로 낮았으며, 자외선 흡수효과도 거의 없었다. 따라서 본 연구를 통하여 참당귀 뿌리 추출물은 화장품용 미백소재로서 가능성을 보여주었다.
In order to elucidate the toxic mechanism of oxygen radicals in cultured mouse spinal sensory neurons, cytotoxic effect of oxygen radicals was evaluated by M1T assay and NR assay. In addition, protective effect of Sopunghwalhyultang(SPHHT) water extract on oxidant-induced neurotoxicity was investigated on these cultures. Spinal sensory neurons derived from mice were cultured in mediums containing various concentrations of Xanthine Oxidase / Hypoxanthine(XO/HX). Cell viability was measured by MTT assay and NR assay. XO/HX-mediated oxygen radicals remarkably decreased cell viability of cultured spinal sensory neurons in a dose-and time-dependent manner. And also, SPHHT blocked XO/HX-induced neurotoxicity in these cultures. These results suggest that oxygen radicals are toxic and SPHHT are effective in blocking against the oxidant-induced neurotoxicity in cultures of spinal sensory neurons of mice.
The purpose of the study was to investigate a transmittance rate of UVB (Ultraviolet B) through summer fabrics and a protection rate of summer fabric from UVB. The subjects were randomly selected 159 fabrics from Korean common summer fabrics. The protection rates of 159 fabrics from UVB were measured by UVB lamp and UVB sensor, and 14 fabrics among these fabrics were selected for an assay of MTT(3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl) -2, 5 -diphenyltetrazolium). The protection rate of fabrics from cell toxicity of UVB was measured by investigating the difference of the amount of cell toxic substance on between fabrics covered with and without HeLa cell The average protection rate of 159 fabrics from UVB was 95.08%. As result findings, three negative correlations were found between: 1) the transmittance rate of UVB and the amount of MTT on fabrics (y=0.0373+0.O0518 x, r=-0.9323, p<0.001); 2) the air permeability of fabrics and the amount of MTT (r: -0.79, p< 0.01); 3) the air permeability of fabrics and the protection rate of fabrics from UVB (r=0.89, p<0.01). However, there was no effect of thickness of fabrics on the protection rate from UVB and the amount of MTT.
개비자 나무 추출물을 2종의 유방암 세포주(SOC-1395와 SK-BR-3)를 이용하여 MTT활성 분석을 수행하였다. RPMII-1640 배지에 $10\%$ FBS과 $1\%$의 penicillin-streptomycin 혼합용액을 사용하였으며, MTT을 농도로 PBS에 녹여 사용하였다. SK-BR-3 세포주가 개비자나무 추출물과 HHT(homoharringtonine)에 대하여 SCC-1395에 비하여 민감성이 높은 것으로 나타났다. 개비자나무의 추출시 응집제로 처리하고 건조 후 에탄을 추출물은 건조 후 에탄올 추출물에 비하여 SCC-1395 세포주가 높은 황성을 보였으며 SK-BR-3를 이용한 항암분석에서도 동일한 결과를 얻을 수 있었다.
The purpose of this study was to investigate the anti-cancer effects of Sophorae Radix and the effects of 5-Fluorouracil (5-FU) in human colorectal adenocarcinoma cells (HT-29). We used human colorectal adenocarcinoma cell line, HT-29 cells. We examined cell death by MTT assay and caspase 3 assay with Sophorae Radix. To examine the inhibitory effects of Sophorae Radix, cell cycle (sub G1) analysis was done the HT-29 cells after three days with Sophorae Radix. The reversibility of Sophorae Radix was examined on one day to five days treatment with $150{\mu}g$ Sophorae Radix. Sophorae Radix inhibited the growth of HT-29 cells in a dose-dependent fashion. Also we showed that Sophorae Radix induced apoptosis in HT-29 cells by MTT assay, caspase 3 assay and sub-G1 analysis. Sophorae Radix combined with 5-FU markedly inhibited the growth of HT-29 cells compared to Sophorae Radix or 5-FU alone. After 3 days treatment of HT-29 cells with Sophorae Radix, the fraction of cells in sub-G1 phase was much higher than that of the control group. Our findings provide insight into unraveling the effects of Sophorae Radix in human colorectal adenocarcinoma cells and developing therapeutic agents against colorectal cancer.
The aim of the study is to investigate the anti-cancer effects of Scutellaria barbata in AGS human gastric adenocarcinoma cells. MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay and caspase 3 or 9 activity assay were carried out to examine cell death with Scutellaria barbata. To elucidate the inhibitory effects of Scutellaria barbata, cell cycle (sub-G1) analysis and mitochondrial membrane potential were performed in AGS cells after 24 h incubation with Scutellaria barbata. Scutellaria barbata induced apoptosis in AGS cells by using the MTT assay, the sub-G1 analysis and mitochondrial membrane potential assay. The stronger inhibition effects of AGS cell growth was observed by application of Scutellaria barbata combined with several anti-cancer drugs (paclitaxel, 5-fluorouracil, cisplatin, ectoposide, doxorubicin and docetaxel) in comparison to the application of Scutellaria barbata or anti-cancer drugs. Our findings provide insight into unraveling the effects of Scutellaria barbata in human gastric cancer cells and developing therapeutic agents against gastric cancer.
Objectives : This study aims at examining the effect of the fermentative extract of root of Sophorae Radix on the immuno-modulating activity. Methods : Cell viabilities were measured by MTT assay. Effect of SFS on nitric oxide(NO), hydrogen peroxide production from RAW 264.7 cells was accessed by Griess reagent assay. Effect of SFS on productions of inflammatory cytokines such as TNF-${\alpha}$, IL-6 in LPS-induced RAW 264.7 cells was accessed by a multiplex bead array assay based on xMAP technology. Results : The results of the experiment are as follows. 1. As a result of carrying out MTT assay to check the cellular toxicity of the fermentative extract of Sophorae Radix. There was not any excessive toxicity to the macrophage when the fermentative extract of root of Sophorae Radix was treated in different concentrations. 2. The fermentative extract of Sophorae Radix increased the generation of hydrogen peroxide in the macrophage and significantly restored the suppression of the generation of the hydrogen peroxide in the macrophage induced by LPS. 3. The fermentative extract of Sophorae Radix reduced the generation of NO in the macrophage and significantly suppressed the increase of the generation of NO in the macrophage induced by LPS. 4. The fermentative extract of Sophorae Radix significantly decreased the amount of TNF-${\alpha}$ generated in the macrophage induced by LPS when it was $25{\mu}g/mL$ or higher. Conclusion : These results suggest that SFS has anti-inflammatory moiety related with its inhibition of NO, hydrogen peroxide, TNF-${\alpha}$, IL-6, in macrophage led by LPS.
Objectives : This study was carried out to examine toxic effect of Sintongchukeo-tang on cultured mouse spinal sensory neurons inhibited by neurotoxicity induced by hydrogen peroxide. Methods : MTT assay, NR assay, LDH and neurofilament assay were performed after spinal sensory neurons were preincubater with various concentrations of Sintongchukeo-tang water extract before treatment of cells with hydrogen peroxide. Results : Hydrogen peroxide induced ceil degeneration such as the decrease of cell viability was measured by MTT and NR assay in the cultured mouse spinal sensory neurons. Sintongchukeo-tang water extract was effective in the decrease of LDH activities of neurons produced by hydrogen peroxide. Sintongchukeo-tang water extract was effective in the increase of amount of neurofilaments damaged by hydrogen peroxide. Conclusions : From the above results, it is suggested that hydrogen peroxide induces the inhibition of cell viability in cultured mouse spinal sensory neurons and Sintongchukeo-tang water extract was effective in cultured neurons damaged by hydrogen peroxide.
This experiment was designed to study the antitumor effects and Activity of Natural Killer Cell of semen Tiglii plus Rhizoma Rhei. The cytotoxic and antitumor effects were evaluated on human cell lines(A549, Caki-1, LL2, Sarcoma 180, NIH/3T3) after exposure to prebrewed Semen Tiglii plus Rhizoma Rhei water extract 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.6mg/ml using in MTT assay, LDH, colony forming efficency and SRB assay which were regarded as a valuable method for cytotoxic and antitumor effects of unknown compound on tumor cell lines. The results obtained in this studies were as follows. 1. From the result of MTT assay, the cytotoxicity of ST(生巴豆霜), ST+RR(生巴豆霜加大黃) were concentration-dependently increased in both group of the ST and ST+RR, the cytotoxicity of ST+RR(生巴豆霜加大黃) was similar to that of ST(生巴豆霜). 2. From the result of LDH, the cytotoxicity of ST, ST +RR were concentrati -on-dependently increased in both group of the ST and ST+RR, the cytotoxicity of ST+RR was similar to that of ST. 3. The antitumor effect on A549 tumor cell from the result of colony forming efficiency showed the inhibitory effect on the growth in both group of the ST and ST+RR, the inhibitory effect on growth was low slightly in the ST+RR. 4. From the result of SRB assay, the antitumor effect on caki-1 tumor cell of ST, ST+RR showed the inhibitory effect on the growth in both group of the ST and ST+RR, the antitumor effect of ST+RR was similar to that of ST. 5. Median survival time and increased life span were increased slightly in both group of the ST and ST+RR. 6. The inhibitory effect on the growth of Sarcoma 180 and Lewis lung carcinoma tumor cell were increased slightly in both group of the ST and ST+RR. 7. The activity of NK cell was increased in the ST+RR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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