갯사상자는 염생식물의 일종으로 염분이 높은 토양에서 자생하는 식물로 선행연구에 따르면 갯사상자는 항암효과를 가진다고 알려져 있다. 그러나 UVB로 유도된 광노화에 대한 효과는 아직 알려져 있지 않은 실정이다. 본 연구에서는 갯사상자 조추출물이 산화스트레스에 미치는 영향과 UVB 유래 광손상에 미치는 효과와 그 작용기전에 대하여 밝히고자 하였다. 갯사상자 추출물의 항산화 활성은 ROS 생성 억제능을 통해 확인하였으며, 광노화에 대한 효능은 피부노화 관련 인자인 MMP-1, MMP-3 및 MMP-9 발현 저해 효과와 MAPKs 발현기전을 통해 확인하였다. 세포생존율 실험결과를 바탕으로 UVB 조사 기준은 15 mJ/cm2 로 설정하였으며, 갯사상자 추출물의 농도는 10, 50, 그리고 100 ㎍/ml로 설정하였다. 결과적으로 갯사상자 추출물은 농도의존적으로 활성산소종을 억제하는 효과를 가짐을 확인하였고, 피부노화 관련인자인 MMP-1, MMP-3 및 MMP-9 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 노화관련인자인 MMP 발현 억제는 MAPK 전사인자의 발현 억제효과에 의한 것임을 확인할 수 있었다. 이들 결과로부터 갯사상자 추출물이 광노화에 효능을 가진 천연 화장품 소재로서 개발이 가능할 것으로 기대된다.
Jong Pil Yoon;Seung Gi Min;Jin-Hyun Choi;Hyun Joo Lee;Kyeong Hyeon Park;Sung Hyuk Yoon;Seong Soo Kim;Seok Won Chung;Hun-Min Kim;Dong Hyun Kim
Clinics in Shoulder and Elbow
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제25권4호
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pp.296-303
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2022
Background: A previous study reported that hyperlipidemia increases the incidence of tears in the rotator cuff tendon and affects healing after repair. The aim of our study was to compare the gene and protein expression of torn rotator cuff tendons in patients both with and without hypercholesterolemia. Methods: Thirty patients who provided rotator cuff tendon samples were classified into either a non-hypercholesterolemia group (n=19, serum total cholesterol [TC] <200 mg/dL) and hypercholesterolemia group (n=11, serum TC ≥240 mg/dL) based on their concentrations of serum TC. The expression of various genes of interest, including COL1A1, IGF1, IL-6, MMP2, MMP3, MMP9, MMP13, TNMD, and TP53, was analyzed by real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR). In addition, Western blot analysis was performed on the proteins encoded by interleukin (IL)-6 and TP53 that showed significantly different expression levels in real-time qRT-PCR. Results: Except for IGF1, the gene expression levels of IL-6, MMP2, MMP9, and TP53 were significantly higher in the hypercholesterolemic group than in the non-hypercholesterolemia group. Western blot analysis confirmed significantly higher protein levels of IL-6 and TP53 in the hypercholesterolemic group (p<0.05). Conclusions: We observed an increase in inflammatory cytokine and matrix metalloproteinase (MMP) levels in hypercholesterolemic patients with rotator cuff tears. Increased levels of IL-6 and TP53 were observed at both the mRNA and protein levels. We suggest that the overexpression of IL-6 and TP53 may be a specific feature in rotator cuff disease patients with hypercholesterolemia.
노화에 미치는 자외선의 영향에 대해 많은 연구가 진행되어 왔지만, 천연물에 대한 연구는 별로 알려진 것이 없다. MMPs는 광노화 과정에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 MMP-1의 발현과 활성 및 항산화 효과에 미치는 $1,2,4,6-tetra-O-galloyl-{\beta}-{_D}-glucopyranose$와 3,4,5-trihydroxybenzoic acid의 효과를 측정하였다. 이들 화합물은 박과의 백렴으로부터 분리하였으며, 자유 라디칼과 활성산소 소거활성이 매우 높은 것으로 나타났다. 이들 화합물의 DPPH 라디칼과 활성산소를 50% 소거하는 활성$(SC_{50})$은 각각 $3.9{\mu}M,\;13.3{\mu}M,\;4.3{\mu}M,\;4.0{\mu}M$로 나타났다. 또한, 이들 화합물은 단백질 수준에서의 MMP-1 발현 및 활성을 처리농도 의존적으로 저해하였지만, 유전자 수준에서는 저해활성이 없는 것으로 나타났다 따라서, 이들 화합물은 단백질 수준에서의 우수한 MMP-1 발현 저해능과 높은 항산화 활성을 가지는 것을 알 수 있다. 결론적으로 이들 화합물은 새로운 항노화 소재로 적용될 수 있을 것으로 기대된다
본 연구에서는 MIA로 골관절염을 유도한 SD 흰쥐에서 인도산 보스웰리아 검레진을 주정 추출 후, 헥산으로 지방 제거 공정을 추가하여 제조한 보스웰리아 검레진 추출물인 FJH-UBS의 항골관절염 효능을 평가하기 위해 실시하였다. FJH-UBS는 40 또는 80 mg/kg BW/day 용량으로 5주간 경구투여하였고, FJH-UBS를 2주간 투여 후 MIA (3 mg/50 µL/rat)를 무릎 관절강 내에 주사하여 골관절염을 유도하였다. MIA 유도 골관절염 동물모델에서 FJH-UBS는 무릎 관절의 부종을 감소시키고 연골의 분해를 억제하였으며, 연골 내 type II collagen과 aggrecan 발현을 증가시켰다. FJH-UBS (80 mg/kg BW/day)는 혈청 내 PGE2, LTB4, IL-1β, 및 IL-6 함량을 감소시켰고, MMP-13 함량을 감소시켰다. FJH-UBS (80 mg/kg BW/day)는 연골 활막 내 iNOS, COX-2, 5-LOX, IL-1β, IL-6 및 TNF-α 발현을 감소시켰고, MMP-2, MMP-9 및 MMP-13 발현을 감소시켰다. 이 결과는 FJH-UBS가 염증매개물질과 염증성 cytokine의 발현감소를 통해 염증 반응을 억제하고, MMPs의 발현을 억제하여 연골 기질의 분해를 억제함으로서 항골관절염 효능을 나타냄을 의미하며 이는 관절 및 연골 건강 개선 기능성 원료로 FJH-UBS의 활용 가능성을 제시한다.
Phyllanthus emblica (PE) is known to exhibit various pharmacological properties. This study aimed to evaluate the antimetastatic potential of a PE aqueous extract. Cytotoxicity to human fibrosarcoma cells, HT1080, was determined by viability assay using the 3-(4,5-dimethylthiazol,2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reagent. Cell migration and invasion were investigated using chemotaxis chambers containing membranes precoated with collagen IV and Matrigel, respectively. Cell attachment onto normal surfaces of cell culture plates was tested to determine the cell-adhesion capability. The molecular mechanism of antimetastatic activity was assessed by measuring the gene expression of matrix metalloproteinases, MMP2, and MMP9, using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay. The mRNA levels of both genes were significantly down-regulated after pretreatment with PE extract for 5 days. Our findings show the antimetastatic function of PE extract in reducing cell proliferation, migration, invasion, and adhesion in both dose- and time-dependent manners, especially growth arrest with low $IC_{50}$ value. A decrease in the expression of both MMP2 and MMP9 seems to be the cellular mechanism for antimetastasis in this case. There is a high potential to use PE extracts clinically as an optional adjuvant therapeutic drug for therapeutic intervention strategies in cancer therapy or chemoprevention.
70% 에탄올로 추출한 후 농축한 유근피 추출물을 여러 용매로 분획한 부분들의 MMP-9 활성 저해능 실험에서 ethyl acetate 분획분이 MMP-9 활성 저해능이 있는 것으로 나타났다. 이 분획분에서 MMP-9의 활성에 저해능을 나타내는 물질을 분리 정제하여 분석하였고 이 물질은 catechin 계열로 판명되었다. Zymography법에 의해 MMP-9의 활성 억제 효과를 관찰하였고 정제된 화합물은 MMP-9을 5 mM 농도에서 48%가 억제하였고 10 mM 에서는 43%를 억제하는 것으로 나타났다. 정상 세포주인 Chang 세포주와 인체 간암세포인 SK-Hep-1 세포주를 동일한 조건으로 배양한 후에 형태학적 변화를 관찰한 결과, 정상 세포주의 핵과 그 주변에서는 변화가 거의 관찰되지 않았으나 SK-Hep-1 세포주는 핵의 주위에 검은 반점이 관찰되었다. 세포의 증식과 살아있는 세포를 측정하기 위하여 MMP-9 억제물질인 정제된 추출물을 투여하고 MTT 검색법에 의해 ELISA reader로의 측정에서 정상세포주인 Chang 세포주에서는 1 mM에서 세포 활성이 오히려 증가하는 경향($130.77{\pm}13.71$)을 보인 반면, SK-Hep-1 세포주에서는 세포 증식이 상당히 억제된 것으로 나타났다.
Objective: The purpose of this study was to investigate the effects of skin application with Gelidium amansii extract on skin with deep second degree burns in mice. Methods: BALB/c mice were divided into four groups: normal (NOR) group; burn-elicited mice (CON) group, Silmazine-treated mice after burn elicitation (ST) group, and Gelidium amansii-extract treated mice after burn elicitation (GT) group. To examine the skin recovery effect after burn, changes of burn area, angiogenesis and histologic structure were analyzed. To measure effect of edema regulation, matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) was analyzed. To estimate the skin regenerative & stable effect, 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) and substance P were analyzed. Results: 2 weeks later, 1. The size of burn area decreased in the GT and ST groups more than the CON group. 2. Alleviation of angiogenesis appeared in the GT and ST groups more than in the CON group. 3. Blood clot, epithelial cell hyperplasia, and inflammatory cell infiltration declined in the GT and ST groups more than in the CON group. 4. MMP-9, BrdU, and substance P positive reaction decreased in the GT and ST groups more than in the CON group 5. In the comparative study, the GT group was superior to the ST group. Conclusion: The skin application of Gelidium amansii extract could lessen skin damage by the medium of regulation MMP-9 activation. This skin stabilization was induced in mice with deep second degree burns.
Background: LIGHT (TNFSF14) is a member of tumor necrosis factor superfamily and is the ligand for TR2 (TNFRSF14/HVEM). LIGHT is known to have proinflammatory roles in atherosclerosis. Methods: To find out the expression pattern of LIGHT in atherosclerotic plaques, immunohistochemical analysis was performed on human carotid atherosclerotic plaque specimens. LIGHT induced atherogenic events using human monocytic cell line THP-1 were also investigated. Results: Immunohistochemical analysis revealed expression of LIGHT and TR2 in foam cell rich regions in the atherosclerotic plaques. Double immunohistochemical analysis further confirmed the expression of LIGHT in foam cells. Stimulation of THP-1 cells, which express TR2, with either recombinant LIGHT or immobilized anti-TR2 monoclonal antibody induced interleukin-8 and matrix metalloproteinase(MMP)-9. Electrophoretic mobility shift assay demonstrated that LIGHT induces nuclear localization of transcription factor, nuclear factor $(NF)-{\kappa}B$. LIGHT induced activation of MMP-9 is mediated by $NF-{\kappa}B$, since treatment of THP-1 cells with the $NF-{\kappa}B$ inhibitor PDTC (pyrrolidine dithiocarbamate) completely blocked the activation of MMP-9. Conclusion: These data indicate that LIGHT is expressed in foam cells in atherosclerotic plaques and is involved in atherogenesis through activation of pro-atherogenic cytokine IL-8 and destabilization of plaque by inducing matrix degrading enzyme.
연구배경: 급성폐손상에서 염증세포의 모집과 활성, 그 염증세포의 부산물인 활성산소, 사이토카인, 기질단백분해효소등과 기획성 세포사멸이 폐실질 파괴와 재구성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 또한 당뇨환자에서 세균 감염 시 중성구의 기능 이상과 활성 산화기의 기능이상, 살균 능의 저하를 가져온다고 알려져 있으나 단백분해효소 대한 견해가 부족한 편이다. 본 연구에서는 동물 모델에서 내독소로 유발된 급성폐손상의 기전에 중요한 역할을 하는 단백분해효소와 그 억제제의 분비를 비교 관찰하였다. 방 법: 생후 6주된 수컷 쥐 40마리를 정상군, 당뇨군, 내독소군, 당뇨-내독소군으로 나누어 당뇨군은 streptozotocin을 투여하였고 내독소군은 지질다당질을 투여하고서 희생시켰다. 각각 혈액, 기관지폐포세척액을 얻어 gelatin zymography를 이용하여 MMP-9의 활성을 측정하였고 Western blot으로 TIMP-1을 측정하였다. 결 과: 1) 내독소군과 당뇨-내독소군은 정상과 당뇨군에 비해 폐 무게의 증가와 기관지폐포세척액과 폐 조직 소견상 염증세포, 특히 중성구의 증가를 보였고 기관지폐포세척액 내 단백질 양의 증가를 보였다 (p < 0.05). 또한 당뇨-내독소군은 내독소군과 달리 기관지폐포세척액 내 총 염증세포 수가 유의하게 감소하였다 (p = 0.001). 2) MMP-9의 활성은 혈청에서는 당뇨-내독소군이 다른 세 군보다 가장 높은 활성을 보였고 기관지폐포세척액에서는 내독소군과 당뇨-내독소군은 차이가 없었으나 정상과 당뇨군에 비해 높은 활성을 보였다 (p < 0.05). TIMP-1 발현은 혈청에서는 네 군간의 차이가 없었고 기관지폐포세척액은 당뇨-내독소군이 가장 낮은 발현을 보였다 (p < 0.05). MMP-9/ TIMP-1 density ratio를 비교했을 때 기관지폐포세척액에서 당뇨-내독소군이 다른 세 군보다 높았고 내독소군도 정상과 당뇨군보다 높았다 (p < 0.05). 결 론: 급성폐손상이 있는 당뇨에서는 염증세포의 화학 주성 감소로 중증 감염에 민감해지고, 기질단백분해효소 활성 증가와 그 억제제의 감소로 폐손상이 가중될 것으로 예상된다.
Objectives: This study aimed to evaluate Emblica officinalis (Indian gooseberry or amla) as an acid etchant and matrix metalloproteinase (MMP) inhibitor, and to compare its effect on the microshear bond strength of composite resin with orthophosphoric acid (OPA) and 2% chlorhexidine (CHX) as an acid etchant and MMP inhibitor, respectively. Materials and Methods: The etching effect and MMP-inhibiting action of amla on dentin samples were confirmed by scanning electron microscopy (SEM) and gelatin zymography, respectively. Dentinal slabs (3 mm thick) from 80 extracted human molars were divided into 10 and 20 samples to form 2 control groups and 3 experimental groups. Groups 1, 2, and 4 were etched with OPA and groups 3 and 5 with amla juice. An MMP inhibitor was then applied: CHX for group 2 and amla extract for groups 4 and 5. Groups 1 and 3 received no MMP inhibitor. All specimens received a standardized bonding protocol and composite resin build-up, and were subjected to microshear bond strength testing. The force at which the fracture occurred was recorded and statistically analyzed. Results: Amla juice had a similar etching effect as a self-etch adhesive in SEM and 100% amla extract was found to inhibit MMP-9 by gelatin zymography. The microshear bond strength values of amla were lower than those obtained for OPA and CHX, but the difference was not statistically significant. Conclusions: Amla has a promising role as an acid etchant and MMP inhibitor, but further studies are necessary to substantiate its efficacy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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