Park, Jung-Min;Shin, Jin-Ho;Lee, Dan-Won;Song, Jae-Chul;Suh, Hyung-Joo;Chang, Un-Jae;Kim, Jin-Man
Food Science of Animal Resources
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v.29
no.6
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pp.668-672
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2009
This paper describes the differentiation between native Korean cattle (Hanwoo) and Holsteins or imported cattle using the real-time polymerase chain reaction (PCR) by targeting the sequence of the melanocortin 1 receptor (MC1R) gene. A rapid and accurate method was developed to identify Hanwoo by genotyping the DNA extracted from 295 commercial beef samples (obtained from 5 provinces in South Korea) labeled as Hanwoo beef. The results of real-time PCR assays for the proportions of Hanwoo were 84, 85.7, 95, 91.4, and 90% in the areas of Seoul, Joongbu, Youngnam, Honam, and Chungcheong, respectively. Thus, the beef samples from 295 butcher shops, which asserted to only sell Hanwoo, showed that 259 of 295 samples were of the Hanwoo beef gene type (T-type) and 36 of 295 samples were Holsteins of imported dairy cattle gene types (C-type or C/T type). In conclusion, the proportion of Hanwoo beef was 87.8% and the proportion of Holstein or imported dairy cattle meat was 12.2% (C-type: 9.8%, C/T-type: 2.4%). Generally, most consumers can not differentiate imported meat from Hanwoo beef. Therefore, Hanwoo beef and imported dairy cattle meat that is sold in butcher shops should have mandatory identification by using MC1R genotyping based on real-time PCR.
PCR-RFLP analysis was carried out to investigate the genotype of Melanocortin receptor 1 (MC1R) gene in Korean Brindle Cattle and Korean Cattle with dark muzzle, which are coat color and muzzle pigmentation variants of Korean Cattle, respectively. Allelic variants of MC1R in cattle were analyzed by digestion with BsrFⅠ, AciⅠ. Among six genotypes, $E^D/E^D,\;E^D/E^+,\;E^D/e,\;E^+/E^+,\;E^+$/e and e/e, detected in cattle, only two genotypes, $E^+/E^+\;and\;E^+$/e, were observed in Korean Brindle Cattle, probably reflecting the necessary of $E^+$ allele for the expression of black brindle coat color. As in Korean Cattle with light muzzle, the $E^+$/e and e/e genotypes were detected in Korean Cattle with dark muzzle. The $E^+$ and e alleles frequencies in two populations of Korean Cattle with dark muzzle and with light muzzle were 0.37, 0.63 and 0,11, 0.89, respectively. Although the frequency of $E^+$ allele in Korean Cattle with dark muzzle was higher than in Korean Cattle with light muzzle, the $E^+$ allele was not completely associated with dark muzzle pigmentation. The results of this experiment indicate that the difference of MC1R genotype and frequency may be useful for fixation of coat color in Korean Cattle as well as Korean Brindle Cattle.
Objective: Qingyu pig, a Chinese indigenous pig breed, exhibits two types of coat colour phenotypes, including pure black and white with black spotting respectively. Melanocortin receptor 1 (MC1R) and agouti signaling protein (ASIP) are two widely reported pivotal genes that significantly affect the regulation of coat colour. The objectives of this study were to investigate whether the polymorphisms of these two genes are associated with coat colour and analyze the molecular mechanism of the coat colour separation in Qingyu pig. Methods: We studied the phenotype segregation and used polymerase chain reaction amplification and Sanger sequencing to investigate the polymorphism of MC1R and ASIP in 121 Qingyu pigs, consisting of 115 black and 6 white with black spotted pigs. Results: Coat colour of Qingyu pig is associated with the polymorphisms of MC1R but not ASIP. We only found 2 haplotypes, $E^{QY}$ and $E^{qy}$, based on the 13 observed mutations from MC1R gene. Among which, $E^{qy}$ presented a recessive inheritance mode in black spotted Qingyu pigs. Further analysis revealed a g.462-463CC insertion that caused a frameshift mutation and a premature stop codon, thus changed the first transmembrane domain completely and lost the remaining six transmembrane domains. Altogether, our results strongly support that the variety of Qingyu pig's coat colour is related to MC1R. Conclusion: Our findings indicated that black coat colour in Qingyu pig was dominant to white with black spotted phenotype and MC1R gene polymorphism was associated with coat colour separation in Qingyu pig.
Park, Mi Na;Kim, Tae-Hun;Lee, Hyun-Jeong;Choi, Jin Ae;Heo, Kang-Nyeong;Kim, Chong-Dae;Choo, Hyo-Jun;Han, Jae-Yong;Lee, Taeheon;Lee, Jun-Heon;Lee, Kyung-Tai
Korean Journal of Poultry Science
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v.40
no.2
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pp.139-145
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2013
There are several loci controlling the feather color of birds, of which one of the most studied is Extended black (E) encoding the melanocortin 1-receptor (MC1R). Mutations in this gene affect the relative distribution of eumelanin, phaeomelanin. The association of feather color and sequence polymorphism in the melanocortin 1-receptor (MC1R) gene was investigated using Korean native chicken H breed (H_PL) and 'Woorimatdag' commercial chickens (Woorimatdag_CC). In order to correlate gene mutation to Korean native chicken feather color, single nucleotide polymorphism (SNP) from MC1R gene sequence were investigated. A total of 307 birds from H_PL and Woorimatdag_CC were used. H_PL have black, black-brown feather color and Woorimatdag_CC have black with brown spots or brown with black spots. There are 6 SNPs in MC1R gene, locus T69C, C212T, A274G, G376A, G636A, T637C. 3 SNPs are nonsynonymous that change amino acid. But it is difficult to find correlation of feather color and polymorphisms. It will be needed to increase the population of Korean native chicken H breed and correlation analysis of genetic variation with feather colors.
Ganbold, Onolragchaa;Manjula, Prabuddha;Lee, Seung-Hwan;Paek, Woon Kee;Seo, Dongwon;Munkhbayar, Munkhbaatar;Lee, Jun Heon
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.32
no.7
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pp.939-948
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2019
Objective: Extension and Agouti loci play a key role for proportions of eumelanin and pheomelanin in determining coat color in several species, including goat. Mongolian goats exhibit diverse types of coat color phenotypes. In this study, investigation of the melanocortin 1 receptor (MC1R) coding region in different coat colors in Mongolian goats was performed to ascertain the presence of the extension allele. Methods: A total of 105 goat samples representing three goat breeds were collected for this study from middle Mongolia. A 938 base pair (bp) long coding region of the MC1R gene was sequenced for three different breeds with different coat colors (Gobi Gurwan Saikhan: complete black, Zalaa Jinstiin Tsagaan: complete white, Mongolian native goat: admixture of different of coat colors). The genotypes of these goats were obtained from analyzing and comparing the sequencing results. Results: A total of seven haplotypes defined by five substitution were identified. The five single nucleotide polymorphisms included two synonymous mutations (c.183C>T and c.489G>A) and three missense (non-synonymous) mutations (c.676A>G, c.748T>G, and c.770T>A). Comparison of genotypes frequencies of two common missense mutions using chi-sqaure ($x^2$) test revealed significant differences between coat color groups (p<0.001). A logistic regression analysis additionally suggested highly significant association between genotypes and variation of black versus white uniform combination. Alternatively, most investigated goats (60.4%) belonged to H2 (TGAGT) haplotype. Conclusion: According to the findings obtained in this study on the investigated coat colors, mutations in MC1R gene may have the crucial role for determining eumelanin and pheomelanin phenotypes. Due to the complication of coat color phenotype, more detailed investigation needed.
Kim, Sang-Hwan;Jung, Kyoung-Sub;Lee, Ho-Jun;Baek, Jun-Seok;Jung, Duk-Won;Kim, Dae-Eun;Yoon, Jong-Taek
Journal of Embryo Transfer
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v.28
no.3
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pp.215-222
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2013
Bovine coat color is decided by the melanocortin receptor 1 (MC1R) genotype mutation and melanogenesis. Specially, in the various cattle breeds, dominant black coat color is expressed by dominant genotype of $E^D$, red or brown is expressed in the frame shift mutation of recessive homozygous e by base pair deletion and wild type of $E^+$ is expressed in various coat colors. However, not very well known about the effected of MC1R genotype mutation on the coat color through family lines in KBC. Therefore, this study were to investigate effect of MC1R genotype mutation on the coat color, and to suggest mating breed system in accordance with of MC1R genotype for increased on brindle coat color appearance. Parents (sire 2 heads and dam 3 heads) and offspring (total : 54 heads) from crossbreeding in KBC family line with the MC1R genotype and phenotype records were selected as experimental animals. The relationship between melanocortin 1 receptor (MC1R) genotypes expression verified by PCR-RFLP, and brindle coat color appearance to the family line of the cross mating breed from MC1R genotype pattern was determined. As a result, 4MC1R genetic variations, $E^+/E^+$ (sire 1), $E^+/e$ (sire 2 and dam 3), $E^+/e$ with 4 bands of 174, 207 and 328 bp (dam 1) and $E^+/e$ with 3 bands of 174, 207, 328 and 535 bp (dam 2) from parents (sire and dam) of KBC. However, 3 genetic variations, e/e (24%), $E^+/E^+$ (22%) and $E^+/e$ (56%) were identified in offspring. Also, brindle coat color expressrated was the e/e with the 0%, $E^+/E^+$ with 67% and $E^+/e$ with 77% from MC1R genotype in offspring on the cross mating of KBC. Furthermore, when the sire had $E^+/e$ genotype and the dam had $E^+/E^+$ with the 3 bands or $E^+/e$ genotype, and both had whole body-brindle coat color, 62% of the offspring had whole body-brindle coat color. Therefore, the seresults, the mating system from MC1R genotype patterns of the sires ($E^+/e$) and dams ($E^+/E^+$ with the 3 bands or $E^+/e$) with brindle coat color may have the highest whole body-brindle coat color expression in their offspring.
The MC1R (Melanocortin 1 receptor) gene has been known as a causative gene of the coat colors in mammals and responsible for the E (Extension) locus which has three alleles ($E^D$, $E^+$, e) that determines coat colors. The dominant allele $E^D$ produces black or brown colors due to the missense mutation and the recessive e allele has frameshift mutation which shows red or yellow coat colors. Whereas the wild type $E^+$ produces variety of colors due to the interaction with A (Agouti) locus. In this study, PCR-RFLP was performed using two restriction enzymes (BsrF I and MspA1 I) in order to obtain MC1R genotypes in Korean brindle cattle and black cattle. The results showed that all of the animals have the $E^+$ alleles, indicating the $E^+$ allele might related with black coat colors. Later on, the experiments expanded to the 260 Korean candidate bulls whether these animals have the same $E^+$ allele. Among 260 samples investigated, 5% (13/260) of the animals had $E^+$e genotypes, indicating the $E^+$ allele is also present in the candidate bulls in a low frequency. Even though we expected that A locus also affect the black coat color in cattle, all the black coat color animals (brindle and black) have $E^+$ alleles in this study. Therefore, the genotyping of the MC1R gene in candidate bulls will recommended be applied for eliminating of black coat colors in Hanwoo population, if the farmers need to have the brown coat colors only.
In order to understand the mechanism if the regulation of CYP 1A1 gene expression and ethoxyresorufin deethylase (EROD) activity in ex vivo system, we have studied the action of TCDD and 3MC in the isolated perfused female rat liver. CYP1A1 mRNA level and EROD activity were measured in rat liver that was isolated and perfused with various chemicals such as 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD), 3-methylcholanthrene (3MC), 17$\beta$-estradiol (E$_2$), morin. TCDD or 3MC alone perfusion into female rat liver resulted in increase of CYP 1A1 mRNA level and the magnitude of stimulation was six times higher with TCDD treatment than 3MC treatment. However E$_2$ perfusion into female rat liver showed inhibition of CYP 1A1 mRNA level. When 10$^{-8}$ M E$_2$ was administered concomitantly with either 10$^{-9}$ M TCDD or 10$^{-9}$ M 3MC, stimulated CYP 1A1 mRNA by either TCDD or 3MC was inhibited. Morin was examined for its effects on CYP 1A1 mRNA level and result was similar to that was observed with estrogen. EROD activity was also stimulated with either TCDD or 3MC perfusion, and the magnitude of EROD stiumlation was smaller than that of CYP 1A1 mRNA stimulation in response to TCDD or 3MC perfusion. Unlike CYP1A1 mRNA level, stimulation of EROD activity was greater with 3MC than TCDD. Concomitant perfusion either E$_2$ or morin with TCDD or 3MC inhibited 3MC perfusion or TCDD perfusion stimulated EROD activity. These data suggested that TCDD and 3MC might act diffrently in terms of regulation of CYP 1A1 gene expression in rat liver.
Most cattle breeds have a coat color pattern that is characteristic for the breed. Korean cattle(Hanwoo) has a coat color ranging from yellowish brown to dark brown including a red coat color. Variation in the Hanwoo coat color is likely to be the effects of modified genes segregating within the Hanwoo breed. MC1R encoded by the Extension(E) locus was almost fixed with recessive red e allele in the Hanwoo, but other gene(s) might be affecting the variation of the Hanwoo coat color into yellowish to red brown. We have analyzed a segregation of coat color in the F2 families generated from two Hanwoo bulls(yellowish brown) mated to six F1 dams(black) derived from Hanwoo and Holstein crosses. Segregation of coat color in the offspring found a ratio of 1(yellowish brown) : 1(black) and this ratio indicates that a single gene may play a major role for the Hanwoo coat color. We further investigated SNPs in MC1R, ASIP and TYRP1 loci to determine genetic cause of the Hanwoo coat color. Several polymorphisms within ASIP intron 2 and TYRP1 exons were found but not conserved within the Hanwoo population. However, the segregation of the MC1R e allele was completely associated with the Hanwoo coat color. Based on this information, it is clear that the MC1R e allele is mainly responsible for the yellowish red Hanwoo coat color. Further study is warrant to identify possible genetic interaction between MC1R e allele and other coat color related gene(s) for the variation of Hanwoo coat color from yellowish brown to dark brown. (Key words : Hanwoo, Coat color, SNP, MC1R, ASIP, TYRP1)
The gene coding for $\beta$-galactosidase of Neisseria lactamica 2118 was cloned into Escherichia coli MC 1061. The isolated 6.5 Kb EcoR I fragement and 7.2 Kb BamH I fragment of chromosomal DNA in Southern hybridization were ligated to a vector plasmid pBR322 and then transformed into Escherichia coli MC 1061 cells. Finally, I obtained three clones as $\beta$-galactosidase positive clone by colony hybridization and Southern hybridization($\beta$-galactosidase probe: lac Z gene of pMC1871). Three recombinant plasmids(pNL.13. 17 and 24) were found to contain the 7.2Kb BamH I fragment originated from Neisseria lactamica 2118 chromosomal DNA by Southern hybridization and pNL 24 was showed high homology to probe especially and also its physical map was constructed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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