A Pseudomonas sp. strain NGK1 (NCIM 5120) capable of utilizing salicylate was immobilized in alginate and polyurethane foam (PUF). The degradation rate of salicylate by freely suspended cells was compared with the degradation rate by immobilized cells. In an initial 20 and 40 mM salicylate, free cells ($2{\times}10^{11}\;cfu\;ml^{-1}$) degraded to 16 and 14 mM, alginate-entrapped cells degraded to 18 and 26 mM, and PUF-entrapped cells degraded to 20 and 32 mM salicylate, respectively, in batch cultures. The alginate-and PUF-entrapped cells were used in repeated batch and continuous culture systems. The efficiency of both the immobilized systems f3r the degradation of salicylate was compared. It has been observed that the PUF-entrapped cells could be reused for more than 20 cycles whereas alginate-entrapped cells could be reused for a maximum of only 12 cycles, after which a decrease in degradation rat was observed with the initial 20 and 40 mM salicylate. The continuous degradation of sallcylate by freely suspended cells showed a negligible degradation rate of salicylate when compared with immobilized cells. With the immobilized cells in both alginate and polyurethane foam, the degradation rate increased with an increase in the dilution rate up to $2\;h^{-1}$ for 20 mM, and $1.5\;h^{-1}$ for 40 mM salicylate. The results revealed that PUF-entrapped cells were more efficient for the degradation of salicylate than alginate-entrapped cells and freely suspended cells.
The morphological patterns and the cytopathogenicity time of the Vero cells induced by free $Cd^{2+}$ and pigment-bound $Cd^{2+}$ were observed by inverted microscope in order to investigate the difference of cadmium toxicity. The Vero cells induced by Hee $Cd^{2+}$ of 0.1 mM were shown to have a fatal toxic effect and the cytopathogenicity could be seen early after 6$\pm$2 hours of incubation. Partially affected cells induced by pigment-bound $Cd^{2+}$ of 0.1 mM were shown and the cytopathogenicity could be seen after 20 hours of incubation. The Vero cells grown with free 0.001 mM $Cd^{2+}$ were also affected and the cytopathogenicity could be seen after 17 hours of incubation, whereas the Vero cells grown with 0.001 mM pigment- bound $Cd^{2+}$ were unaffected. The sensitivity of Escherichia coli DH5$\alpha$ bacterial cells was also examined after a short treatment with free $Cd^{2+}$ or pigment-bound $Cd^{2+}$. About 5% of cells survived after 0.01 mM of free $Cd^{2+}$ treatment, while about 68% of cells survived after 0.01 mM of pigment- bound $Cd^{2+}$.
Hybridoma cells were adapted in media containing up to 80 mM $K^+$. The adapted cells obtained tolerance at high osmotic pressure and low pH. The adapted cells showed a maximum viable cell density of $1.1{\times}10^6$ cells/ml when a batch culture was progressed in a nutrient-fortified medium with Erlenmeyer flask at 450 $mOsm/kgH_2O,$ as compared to $4.8{\times}10^5$ cells/ml for non-adapted cells grown under the same conditions. The adapted cells also showed a maximum viable cell density of $7.8{\times}10^5$ cells/ml with the same method at initial pH 7.0 as compared to $5.3{\times}10^5$ cells/ml for non-adapted cells. Adaptation of animal cells at high $K^+$ levels may therefore lead to an improvement of their performance at limited conditions.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.46-46
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1993
The neuroprotective effect of betaine, one of the , components of Lycii Fructus, on glutamate-induced neurotoxicity in primary cultured chicken brain cells were examined. Betaine was found to attenuate glutamate-induced neurotoxicity at the concentration of 5-10 mM in both morphological and chemical aspects. The pretreament of chicken brain cells with 5-10 mM betaine for 2 hr at the 12th day of culture before the 40 min-exposure to 500${\mu}$M glutamate significantly increased the survival rate of nerve cells in chicken brain. Betaine could also raise the decreased LDH-level due to the neurotoxicity induced with 100${\mu}$M glutamate in chicken braill cells. LDH value was decreased to 63% of control level in chicken brain cells at the time of 48 hr after the exposure to glutamate. However, the pretreament of chicken brain cells with 5 mM betaine for 2 hr before the exposure to glutamate could prevent the decrease of LDH-level in brain cells showing 90% of control level. Nevertheless, tile remarkable neuroprotective effect of betaine on the glutamate-inducer in neurotoxicity in cultured chicken brain cells could not be observe when betaine was simultaneously administered with glutamate.
Diabetes mellitus is a systemic disease with profound effects on oral health and periodontal wound healing. Uncontrolled diabetes adversely affects surgical wound healing and is often associated with abnormal proliferation of fibroblasts. Human gingival fibroblasts and PDL cells were chosen because they are intimately involved in periodontal therapy and are important for the success of surgical procedure such as guided tissue regeneration. The aim of the present study was to elucidate whether cellular activity and collagen synthesis by glucose pre-treated human gingival fibroblasts and PDL cells are influenced by insulin, and whether healthy cells differ from glucose treated cells. Cells were cultured with DMEM at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 100% humidified incubator. To evaluate the effect of glucose on gingival fibroblasts and periodontal ligament cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. Then MTT assay was carried out. To evaluate the effect of insulin on glucose-pretreated cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. After incubation, $10^3$, $10^4$ and $10^5mU/l$ of insulin were also added to the each well and incubated for 2 days, respectively. Then, MTT assay and collagen synthesis assay were carried out. The results indicate that cellular activity of gingival fibroblasts significantly increased by glucose while periodontal ligament cells were unaffected and cellular activity of gingival fibroblasts and periodontal ligament cells were unaffected by insulin. Collagen synthesis of gingival fibroblast with 20mM glucose and insulin unaffected, but 50mM glucose and insulin increased than control. Collagen synthesis of periodontal ligament cell with 20mM glucose and $10^5mU/l$ insulin significantly increased than other groups and 50mM glucose pretreated PDL cells significantly increased at $10^3mU/l$ insulin but decreased at $10^4mU/l$ insulin. Our findings indicated that these cell types differed in their growth response to glucose, and the increase in collagen synthesis was significantly raised at insulin level of $10^3mU/l$ in gingival fibroblasts and periodontal ligament cells except 20mM glucose pretreated periodontal ligament cells.
The aim of the present study was to assess whether exposure to the combination of an extremely low frequency magnetic field (ELF-MF; 60 Hz, 1 mT or 2 mT) with a stress factor, such as ionizing radiation (IR) or $H_2O_2$, results in genomic instability in non-tumorigenic human lung epithelial L132 cells. To this end, the percentages of G2/M-arrested cells and aneuploid cells were examined. Exposure to 0.5 Gy IR or 0.05 mM $H_2O_2$ for 9 h resulted in the highest levels of aneuploidy; however, no cells were observed in the subG1 phase, which indicated the absence of apoptotic cell death. Exposure to an ELF-MF alone (1 mT or 2 mT) did not affect the percentages of G2/M-arrested cells, aneuploid cells, or the populations of cells in the subG1 phase. Moreover, when cells were exposed to a 1 mT or 2 mT ELF-MF in combination with IR (0.5 Gy) or $H_2O_2$ (0.05 mM), the ELF-MF did not further increase the percentages of G2/M-arrested cells or aneuploid cells. These results suggest that ELF-MFs alone do not induce either G2/M arrest or aneuploidy, even when administered in combination with different stressors.
Lee, Jong Hwa;Choi, Eun Sili;Oh, Kyu Seon;Lee, Dong Wook;Chang, Jeong Hyun;Um, Kyung Il
Animal cells and systems
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v.4
no.3
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pp.293-297
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2000
The present investigation was performed to elucidate the effect of pretreatment with low dose ultraviolet radiation (UV) and ethyl methanesulfonate (EMS) on cell survival by trypan blue dye exclusion method and plasma membrane glycoconjugates by lectin-cytochemistry in sarcoma 180 (S180) cells. Pretreatment with 2 J/$m^2$ UV or 2 mM EMS increased the percentage of survival of cells subsequently treated with high dose UV (10 or 20 J/$m^2$) or EMS (10 or 20 mM), respectively. Staining intensity of concanavalin A (Con A) of the cells pretreated with 2J/$m^2$ UV or 2 mM EMS and subsequently treated with 10 or 20 mM EMS was stronger than that of the cellstreated with 10 or 20 mM EMS. These results suggest that there is an adaptive response on cell survival to EMS or UV in S180 cells. And the results show a change in mannose-containing glycoconjugates of plasma membrane in S180 cells pretreated with EMS or UV and subsequently treated with EMS.
The induction of detoxification enzymes by benzyl isothiocyanate (BITC) and its synthetic N-acetyl-L-cysteine (NAC) conjugate (NAC-BITC) was examined in Hepa1c1c7 murine hepatoma cells. BITC and NAC-BITC inhibited Hepa1c1c7 cell growth in a dose-dependent manner. Cell growth was 4.5~57.2% lower in Hepa1c1c7 cells treated with $0.1{\sim}1.0{\mu}M$ BITC than in control-treated Hepa1c1c7 cells. The NAC-BITC treatment had a similar inhibitory pattern on Hepa1c1c7 cell growth; $0.5{\mu}M$ and $10{\mu}M$ NAC-BITC decreased cell growth by 13.6% and 47.4%, respectively. Treatment of Hepa1c1c7 cells with $0.1{\sim}2.0{\mu}M$ BITC also elicited a dose-response effect on the induction of quinone reductase quinone reductase (QR) activity and QR mRNA expression. Treatment with $1{\mu}M$ and $2{\mu}M$ BITC caused 1.8- and 2.8-fold inductions of QR mRNA, respectively. By comparison, treatment with $1{\mu}M$ and $2{\mu}M$ NAC-BITC caused 1.6-and 1.9-fold inductions of QR mRNA, respectively. Cytochrome P450 (CYP) 1A1 and CYP2E1 induction were lower in $0.1{\sim}2{\mu}M$ BITC-treated cells than in control-treated cells. CYP2E1 activity was 1.2-fold greater in $0.1{\mu}M$ NAC-BITC-treated cells than in control-treated cells. However, the CYP2E1 activity of cells treated with higher concentrations (i.e., $1{\sim}2{\mu}M$) of NAC-BITC was similar to the activity of control-treated cells. Considering the potential of isothiocyanatesto prevent cancer, these results provide support for the use of BITC and NAC-BITC conjugates as chemopreventive agents.
The serine/threonine kinase mTOR is essential for the phosphoinositide 3-kinases (PI3K) signaling pathway, and regulates the development and function of immune cells. Aberrant activation of mTOR signaling pathway is associated with many cancers including leukemia. Here, we report the contributions of mTOR signaling to growth of human leukemic cell lines and mouse T-cell acute leukemia (T-ALL) cells. Torin, an ATP-competitive mTOR inhibitor, was found to have both cytotoxic and cytostatic effects on U-937, THP-1, and RPMI-8226 cells, but not on Jurkat or K-562 cells. All cells were relatively resistant to rapamycin even with suppressed activity of mTOR complex 1. Growth of T-ALL cells induced by Notch1 was profoundly affected by torin partially due to increased expression of Bcl2l11 and Bbc3. Of note, activation of Akt or knockdown of FoxO1 mitigated the effect of mTOR inhibition on T-ALL cells. Our data provide insight on the effect of mTOR inhibitors on the survival and proliferation of leukemic cells, thus further improving our understanding on cell-context-dependent impacts of mTOR signaling. [BMB Reports 2016; 49(1): 63-68]
To define the ecological roles of bacterial community in Daechung Reservoir. Vertical variation of total bacterial numbers were estimated at MAN site for one year with DAPI staining. The bacterial numbers were counted, environmental factors were monitored at the surface, -5m, -10m, -15m and -25 m of MAN sited and tried to explain the vertical bacterial numbers with environmental factors. The bacterial number was $1.6-1.7.0 x10^6$ cells/ml at the surface, $2.3-11.0x10^6$ cells/ml at 5 m depth, $1.2-1.4.0x10^6$ cells/ml at 10 m depth, $1.4-15.0x10^6$ cells/ml at 15 m depth and $1.4-1.3.0x10^6$ cells/ml at 25 m depth. The Mean bacterial number at the surface was more that those at any other depth. The explanation of the vertical total bacterial numbers with environmental factors were suggested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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