Jo, Mi-Yeong;Son, Sang-Gyu;Kim, Lee-Cheong;Kim, Jin-U;O, Myeong-Ju;Jeong, Seong-Ju;Park, Su-Il
Journal of fish pathology
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v.16
no.3
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pp.175-181
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2003
VSNC is a viral disease causing significant economic losses in cultured carp Ciprinus carpio L. in Korea. Carps were immunized with prepared vaccines against VSNCV and examined specific and nonspecific immune responses. Carps were injected by O.2㎖ of formalin-killed vaccine (FKV), heat-killed vaccine (HKV) or E-MEM, respectively and dealt with boost with same way two weeks later. The lysozyme activity of serum and chemiluminescent reponses of head-kidney leucocytes showed increased responses during 2-7 days post-first injection (pfi) and post-boost (pb) in the vaccinated fish, and then decreased to the level of control. As measured by ELISA, vaccinated groups showed a significant increase in VSNCV-specific serum antibodies between 2 weeks pfi and 6weeks pb with a peak at 2 weeks pb. Results of the virus challenge showed that the fish vaccinated with FKV have induced protective immunity, while HKV injection hardly provided protection.
Two studies were conducted to investigate the effects of dietary nucleotides (NT) on the growth performance, hematological parameters, and innate immune responses of red seabream Pagrus major. In Expt I, six experimental diets were formulated: a control, four that contained each NT at a level of 0.15% (inosine monophosphate, IMP; adenosine monophosphate, AMP; guanosine monophosphate, GMP; and uridine monophosphate, UMP), and one with a 1:1:1:1 mixture of NTs (IMP, AMP, GMP, and UMP). In Expt II, five experimental diets were formulated that contained 0, 0.1, 0.2, 0.4, and 1.0% IMP (commercial product). Triplicate groups of juvenile (initial body weight 33.1 g) and growing (initial body weight 120 g) red seabream were fed one of the experimental diets to apparent satiation for 8 weeks in Expt I and 12 weeks in Expt II. In Expt I, fish fed diets with NT had higher growth performance than the control group. The nitroblue tetrazolium and lysozyme activities were higher in fish fed the mixed-NT diet, and lowest in the control group. In Expt II, the final body weight and feed utilization of fish fed the 0.1% IMP diet were significantly higher than those of fish fed the control or 1.0% IMP diets. Diet palatability was improved significantly when 0.1% IMP was added. The lysozyme activity was higher in fish fed diets with 0.4-1.0% than in the control group. These results suggest that supplementation of 0.15% IMP and Mixed-NTs in diet can enhance the growth and immune responses in juvenile red seabream. The optimum IMP level appears to be 0.2% in practical feed formulation for growing red seabream.
- To investigate the possibility of genetic development for a multi-purpose strain of Bacillus subtilis YBL-7 against Fusat-iurn solani causing root rot of many impotant corps, the plasmid pGU66 inserting urease gene of Bacillus pasteurii had been introduced into Bacillus subtilis YBL-7 by PEG-induced protoplast (PIP) transformation system. Protoplasts of B. subtilis YBL-7 were prepared by treating the cells with lysozyme (200 $\mu g$/ml) in hypertonic buffer (SMMP). The highest transformation frequency was achieved when cells of the strain with lysozyme at $42^{\circ}C$ for 90 minutes. Optimal transformation was obtained using polyethylene glycol (MW 4000) at final concentration of 30% (V/V). The transformation frequency was increased proportionally to 1.2 $\mu g$ of plasmid DNA. At best condition, the transformation frequency (transformants/ regenerants/$\mu g$ of DNA) for pGU66 was appoximately $4 \times 10^{-3}$. Also, the urease gene was strongly expressed in the transformants of B. subtilis YBL-7 and maintained steadily. The antifungal ability of transformant was very similar to that of B. ssubtilis YBL-7.
An electron spin resonance study has been made on lysozyme in. frozen aqueous solutions irradiated with $_{60}Co$ r-rays in air at $77^{circ}K.$ Water resonances are dominant when the concentration and the temperature are both below 20% and $130^{circ}K$ respectively. More solute radicals are produced in the solution of higher concentration. Majority of the solute radicals results from direct hit of the radiation. The same types of radicals are induced at $77^{circ}K$ whether the substances are irradiated in the dry state or in frozen aqueous solution. Based on these results, it is assumed that the number of ESR centers produced by the secondary intermolecular radical reacions and stabilized in aqueous solutions may depend on the concentration of the solution, and the presence of water may facilitate the secondary radical reactions occuring in the solute molecules after heat treatment. Majority of the solute radicals above around $193^{circ}K$ are believed to react with oxygen to form peroxytype radicals. However, when the solution is subiected to heat-treatment at $265^{circ}K$ after irradiation at $195^{circ}K$ the peroxy-type resonance was not observed, suggestin that an appreciable amount of oxygen is condensed into the ice, at $77^{circ}K.$ in addition to the oxygen that has already been dissolved in solution and react with solute free radicals during the process of heat-treatment. When the solution contains $H_2O_2$, no water resonance but $HO_2$, type resonance was observed probably indicating that the radiation-induced OH radicals are trapped in $H_2O_2$ aggregates and react readily with $H_2O_2$ molecules to poroduce $HO_2$ type radicals even at $77^{circ}K.$.
Kim, Shin Ae;Cho, Sang-Jin;Magay, Elena;Ryu, Sun-Young
Journal of the Korean Crystal Growth and Crystal Technology
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v.23
no.1
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pp.1-7
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2013
The three-dimensional structure of the proteins, including the location of the hydrogen atoms can be analyzed by using neutron diffraction. In order to grow single crystals for neutron diffraction experiments, we developed a simple magnetic field device with the commercial magnets and succeeded in growing hen egg-white lysozyme single crystals of more than 1 $mm^3$ in volume using this device. The crystals grown with a magnetic field were larger and had perfect transparency, whereas the crystals grown without a magnetic field had micro-cracks. The result of the X-ray measurement showed a good resolution and small mosaicity for the crystals grown in the presence of a magnetic field.
Multi-cycle chromatographic separation of Iysozyme from egg white was investigated. Multi-cycle chromatography was performed by repeated cycling(one cycle: resin equilibration, sample loading, washing, elution). Two types of cation exchange resins, Cellufine CM C-200 and Bio-rex 70, were used to determine the optimum condition for the separation of Iysozyme by multi-cycle chromatography. The resin was equilibrated in 20 mM Na-phosphate buffer(pH 7.0). Chromatograms of UV absorbance levels of every cycle were compared to confirm the eluting ability of Iysozyme in the two types of gel. Collected samples from eluting regions in every cycle were assayed by 15% SDS-PAGE.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.12-12
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2017
Genetic improvement in potato can be carried out through several approaches, as sexual crosses, somatic hybridization, mutation and genetic engineering. Although the approach is different, but the goal is the same, to get a superior cultivar. Mutation and genetic engineering are very interesting methods for genetic improvement of potato plants. Mutation by gamma-ray irradiation have been performed to get some new potato cultivars which are more resistant to disease and have higher productivity. We have carried out a mutation of some potato cultivars and obtained some excellent clones to be potentially released as new superior cultivars. By the mutation method, we have released one potato cultivar for the French fries industry, and we registered one cultivar of potato for chips, and two cultivar for vegetable potatoes. Actually we are doing multi-location trial for three clones to be released as new cultivars. Through genetic engineering, several genes have been introduced into the potato plant, and we obtained several clones of transgenic potato plants. Transgenic potato plants containing FBPase gene encoding for fructose bisphosphatase, have a higher rate of photosynthesis and higher tuber productivity than non-transgenic plants. This result suggests that FBPase plays an important role in increasing the rate of photosynthesis and potato tuber productivity. Some transgenic potatoes containing the Hd3a gene are currently being evaluated for their productivity. Over expression of the Hd3a gene is expected to increase tuber productivity and induce flowering in potatoes. Transgenic potato plants containing MmPMA gene encoding for plasma membrane ATPse are more tolerant to low pH than non-transgenic plants, indicating that plasma membrane ATPase plays an important role in the potato plant tolerance to low pH stress. Transgenic potato plants containing c-lysozyme genes, are highly tolerant of bacterial wilt diseases caused by Ralstonia solanacearum and bacterial soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum. Expression of c-lyzozyme gene plays an important role in increasing the resistance of potato plants to bacterial diseases.
This study was performed to know the effects of stress induced by the daily fluctuation of water temperture from 18$^{\circ}C$ to 25$^{\circ}C$ up and down for 30 days on the defence mechanism of olive flounder. Puralichthys olivaceus. To make clear the temperature stress on the defense mechanism of the tested fish. several factors of immune response such as counting of leucocyte appearance in peripheral blood, phagocytic activity in whole blood cells, nitroblue tetrazolium(NBT) reduction, chemiluminescence(CL) response, and lysozyme activity were investigated at 28 days after giving the change of water temperature. The fish was controlled under the none feeding condition during experimental period. Mortality of the tested fish was rapidly increased up to 22% within the first one week of the experimental period without any additional stress factors. The number of neutrophil of peripheral blood in the tested group was significantly higher than the control group at the 2nd week. but the number of lymphocyte was significantly lower than the control group at the 1st and 3rd day of the experimental period. respectively. In the NBT reduction test, the activity of macrophage in the control group fish was the highest on the 7th day while that in the tested group was on the 3rd day. Also. the phagocytosis of tested group against formalin killed cells was retarded compared with the control. CL response of the tested group was significantly lower from 2nd to 5lh day of the experimental period than the control. 'The lysozyme activity of tested group was remained higher during the experimental period than the control. Even though the tested fish showed different results in some non-specific factors of immune respceses between tested and control group fish, olive flounder seems highly adaptable in repealed water temperature change in condition after one week under the given temperature fluctuation range.
Protein conjugation of curdlan belonging to $\beta$-1, 3-glucan was carried out to improve it surface functionalities. The glucan was mixed with phosvitin, {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, lysozyme or ovalbumin, respectively. The mixture was freeze-dried, and he resulting powder was incubated at 6$0^{\circ}C$ and 79% relative humidity for 12 days in order to generate a controlled Maillard reaction between curdlan and proteins. conjugation with unfolding proteins, i.e., phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, drastically increased the solubility of the glucan, whereas lysozyme and ovalbmin did not. The solubility in water of curdlan was 3.44% for the phosvitin conjugate and 1.09% for the {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein conjugate. SDS-slab polyacrylamide gel electrophoresis showed that curdlan was solubilized due to covalent binding with phosvitin. Emulsifying properties of curdlan were substantially improved by the conjugation with phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein. Emulsion stability of the curdlan-phosvitin conjugate was about 2.9 times greater than that of the curdlan-phosvitin mixture.
This study describes isolation and identification of a soil bacterium which is degradable of phosphinothricin and improvement of the isolated strain by using mutagenesis and spheroplast fusion. The experiment was performed to search for a possibility of development of a new strain which is both PPT-degradable and glyphosate-resistant by using interspecies cell fusion between the PPT-degrading bacterium. Pseudornonu.\ puucimohlis and a glyphosate -resistant strain, Pseudornonu.~ cc,pucicl. Auxotrophic mutants were obtained by the treatement of P. puucimohili.\ with ethylmethanosulfate, and used to cell fusion. Lysozyme and EDTA were used to spheroplast formation and regeneration rates :)f the spheroplast were 6.5'%1 in P. pauc.irnohili.\ and 8.8% in P.ci,j~u[,i(lr, espctively. Polyethylenglycol 5.000 was used to cell fusion as fusogen. The fusant\ulcorner F1. F2. F\ulcorner and F4 werc- obtained by the intra- and interspecies cell fusion. The fusant Fl of intraspecies cell fusion was higher to the wild type by 1 I'%l in PPT degrading ability, and the fusant F3 of inierspesis cell fusion developed plyphosatc-resistant and PPI-dcgrading ability which were propertics of two parental strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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