• 한국약용작물학회지
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• 제12권2호
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• pp.141-148
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• 2004

Two compounds from Gomisin N and Gomisin A were isolated from the fruits of Schizandra chinensis Baillon. The highest extraction yield as 21.36% was observed in the ethanol extract, compared to the yield obtained form the water extract. The extraction yields of the single compounds were measured to be 0.13 and 0.014 Gomisin A and Gomisin N, respectively. Approximately, 90% of the growth of human stomach adenocarcinoma cancer cells was inhibited after adding 1.0 g/l of the ethanol extract. The growth of the human normal lung cell was limited to 24% after adding the ethanol extract. The water extract lowered the specific secretion of $TNF-\acute{a}$ and IL-6 from T cells, $10.3{\times}10^{-4}\;pg/cell\;and\;12.1{\times}10^{-4}\;pg/cell$, respectively, compared to the ethanol extracts. On the other hand, a treatment with the ethanol extract increased the specific secretion of $TNF-\acute{a}$ and IL-6 from human T cells, to $11{\times}10^{-4}\;pg/cell\;and\;14.3{\times}10^{-4}\;pg/cell$, respectively. The crude ethanol extract had the highest effect on the differentiation of human promyelocytic leukemia cells compared to the other extracts and Gomisin A and N. In general, the biological activities of the extracts gradually decreased as the purification process proceeded, which suggests that higher immunostimulatory activities can be maintained by adding the crude extracts of the fruits rather than by adding a single compound.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제15권6호
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• pp.397-403
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• 2011

The proliferation, migration, cytokine release, and contraction of airway smooth muscle cells are key events in the airway remodeling process that occur in lung disease such as asthma, chronic obstruction pulmonary disease, and cancer. These events can be modulated by a number of factors, including cigarette smoke extract (CSE). CSE-induced alterations in the viability, migration, and contractile abilities of normal human airway cells remain unclear. This study investigated the effect of CSE on cell viability, migration, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ secretion, and contraction in normal human bronchial smooth muscle cells (HBSMCs). Treatment of HBSMCs with 10% CSE induced cell death, and the death was accompanied by the generation of reactive oxygen species (ROS). CSE-induced cell death was reduced by N-acetyl-l-cysteine (NAC), an ROS scavenger. In addition, CSE reduced the migration ability of HBSMCs by 75%. The combination of NAC with CSE blocked the CSE-induced reduction of cell migration. However, CSE had no effect on TNF-${\alpha}$ secretion and NF-${\kappa}B$ activation. CSE induced an increase in intracellular $Ca^{2+}$ concentration in 64% of HBSMCs. CSE reduced the contractile ability of HBSMCs, and the ability was enhanced by NAC treatment. These results demonstrate that CSE treatment induces cell death and reduces migration and contraction by increasing ROS generation in normal HBSMCs. These results suggest that CSE may induce airway change through cell death and reduction in migration and contraction of normal HBSMCs.

• 미생물학회지
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• 제42권1호
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• pp.47-53
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• 2006

한국 토양에서 방선균주를 분리하고 화학 분류 및 16S rDNA 염기서열을 통하여 Streptomyces 속 균주임을 알아내고 Streptomyces sp. AO-0511로 명명하였다. 이 균주가 생산하는 herbimycin A 및 dihydroherbimycin A의 몇 가지 이화학적 성질과 생물 활성을 측정하였다. 두 물질은 모두 산성 조건에서 안정성을 나타냈으며, dihydroherbimycin A는 herbimycin A에 비해 상대적으로 높은 열 안정성을 지니며 극성 또한 높은 물질로서 TLC 상의 Rf간이 낮았다. Herbimycin A와 dihydroherbimycin A는 모두 Bacillus subtilis ATCC 6633 및 Micrococcus luteus ATCC 9341에 대하여 약한 저해 활성을 나타내었고, 다른 미생물에 대해서는 저해 활성을 나타내지 앓았다. 항암 활성에 있어서 두 물질은 폐암 세포인 AS49세포와 백혈병 세포인 HL-60세포에 대해서 강력한 중식 저해 활성을 나타내었다. L5178Y및 P388세포를 사용하여 세포 독성을 측정하였다. 그 결과 두 물질은 대조 물질인 camptothecin에 비해서 항암 활성을 가지면서도 비교적 안전한 물질임을 알려 주고 있다.

• Molecules and Cells
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• 제38권5호
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• pp.396-401
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• 2015

Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) is an important redox-sensitive transcription factor that regulates the expression of several cytoprotective genes. More recently, genetic analyses of human tumors have indicated that Nrf2 may cause resistance to chemotherapy. In this study, we found that the expression levels of Nrf2 and its target genes GCLC, HO-1, NQO1 were significantly higher in cisplatin-resistant A549 (A549/CDDP) cells than those in A549 cells, and this resistance was partially reversed by Nrf2 siRNA. 3,4,5,5,7-Pentamethoxyflavone (PMF), a natural flavon extracted from Rutaceae plants, sensitized A549/CDDP to CDDP and substantially induced apoptosis compared with that of CDDP alone treated group, and this reversal effect decreased when Nrf2 was downregulated by siRNA. Mechanistically, PMF reduced Nrf2 expression leading to a reduction of Nrf2 downstream genes, and in contrast, this effect was decreased by blocking Nrf2 with siRNA. Taken together, these results demonstrated that PMF could be used as an effective adjuvant sensitizer to increase the efficacy of chemotherapeutic drugs by downregulating Nrf2 signaling pathway.

• Nutrition Research and Practice
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• 제11권2호
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• pp.83-89
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• 2017

BACKGROUND/OBJECTIVES: Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is involved in not only cancer development and metastasis but also non-cancerous conditions. Hypoxia is one of the proposed critical factors contributing to formation of chronic rhinosinusitis or nasal polyposis. Wheatgrass (Triticum aestivum) has antioxidant, anti-aging, and anti-inflammatory effects. In this study, we analyzed whether wheatgrass has an inhibitory effect on the EMT process in airway epithelial cells. MATERIALS/METHODS: A549 human lung adenocarcinoma cells were incubated in hypoxic conditions ($CO_2$ 5%/$O_2$ 1%) for 24 h in the presence of different concentrations of wheatgrass extract (50, 75, 100, and $150{\mu}g/mL$) and changes in expression of epithelial or mesenchymal markers were evaluated by immunoblotting and immunofluorescence. Accordingly, associated EMT-related transcriptional factors, Snail and Smad, were also evaluated. RESULTS: Hypoxia increased expression of N-cadherin and reduced expression of E-cadherin. Mechanistically, E-cadherin levels were recovered during hypoxia by silencing hypoxia inducible factor (HIF)-$1{\alpha}$ or administering wheatgrass extract. Wheatgrass inhibited the hypoxia-mediated EMT by reducing the expression of phosphorylated Smad3 (pSmad3) and Snail. It suppressed the hypoxia-mediated EMT processes of airway epithelial cells via HIF-$1{\alpha}$ and the pSmad3 signaling pathway. CONCLUSION: These results suggest that wheatgrass has potential as a therapeutic or supplementary agent for HIF-1-related diseases.

• 한국식품과학회지
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• 제35권1호
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• pp.132-137
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• 2003

국내에서 생산된 거봉 및 캠벨 포도의 씨, 줄기 및 껍질 추출물에 대하여 항산화 작용, 염증 관련 인자 생성에 미치는 활성 및 암세포 성장에 대한 영향 등을 resveratrol과 비교하여 평가하였다. 그 결과 포도 추출물 중 거봉줄기, 캠벨줄기, 캠벨씨 및 거봉씨 추출물들이 항산화 능력을 나타내었고 그 중 거봉씨 추출물은 vitamin C와 효력이 유사하게 나타나 항산화 효능이 우수함을 알 수 있었다. 또한 마우스 대식세포주인 RAW 264.7 cell을 이용하여 포도 추출물들의 LPS처리에 의한 $PGE_2$ 및 NO 생성을 저해 여부를 확인한 결과, 거봉줄기, 거봉씨, 및 캠벨씨 추출물이 $50\;{\mu}g/mL$에서 $PGE_2$ 및 NO 생성을 50% 가량 저해하는 효능을 나타내었다. 또한 사람 폐암 및 대장암 세포주를 이용하여 포도 추출물들이 암세포 성장 저해 효과를 나타내는지를 확인하였는데 거봉줄기 및 씨 추출물 $50\;{\mu}g/mL$에서 30% 정도의 암세포 성장 저해 작용을 나타내었다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제45권1호
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• pp.119-125
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• 2021

Background: Korean Red Ginseng (KRG) is a natural product with antiinflammatory and anticarcinogenic effects. We have previously reported that the endocrine-disrupting compound bisphenol A (BPA)-induced cyclooxygenase-2 (COX-2) via nuclear translocation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) and activation of mitogen-activated protein kinase and promoted the migration of A549. Here, in this study, we assessed the protective effect of KRG on the BPA-induced reactive oxygen species (ROS) and expression of COX-2 and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in A549 cells. Methods: The effects of KRG on the upregulation of ROS production and COX-2 and MMP-9 expression by BPA were evaluated by fluorescence-activated cell sorting (FACs) analysis, quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, and western blotting. Antimigration ability by KRG was evaluated by migration assay in A549 cells. Results: KRG significantly suppressed the BPA-induced COX-2, the activity of NF-κB, the production of ROS, and the migration of A549 cells. These effects led to the downregulation of the expression of MMP-9. Conclusions: Overall, our results suggest that KRG exerts an antiinflammatory effect on BPA-treated A549 cells via the suppression of ROS and downregulation of NF-κB activation and COX-2 expression which leads to a decrease in cellular migration and MMP-9 expression. These results provide a new possible therapeutic application of KRG to protect BPA-induced possible inflammatory disorders.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제51권5호
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• pp.437-447
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• 2001

배 경 : TNF-$\alpha$는 UIP 환자의 폐 섬유화에 관계하는 cytokine으로 잘 알려져 있지만, 폐 섬유화를 일으키는 기전에 대해서는 알려져 있지 않다. TNF-$\alpha$에 의해 AP-1(c-jun N-terminal kinase, JNK의 하부 신호 전달체계) 같은 전사 인자가 활성화되고 이들에 의해서 PDGF 나 IGF-I fibrogenic cytokines의 전사가 관계있을 것으로 추측된다. 더구나 방사선에 의한 폐 섬유화 과정에서 JNK가 활성화되어 있는 것이 확인되었다. 본 연구의 목적은 UIP 환자에서 JNK의 활성도를 확인하고자 하였다. 방 법 : UIP 환자의 폐 조직과 대조군으로 이용된 폐암 환자의 정상 폐조직에서 phosphorous JNK (p-JNK), 대식세포의 표현자인 CD68, 그리고 cytokeratin을 이용하여 면역화학검사를 시행하였다. JNK의 in vitro kinase assay는 UIP 환자와 호흡기 증상이 없는 정상인에서 기관지 폐포세척술로 획득한 대식세포를 이용하였다. 결 과 : 면역조직화학검사에서 UIP 환자의 대부분의 폐포 대식세포는 p-JNK를 발현하였지만, 폐암 환자의 정상조직에서는 UIP 환자보다는 p-JNK 발현이 거의 없었다. 그러나 폐포 대식세포를 이용한 in vitro JNK kinase assay에서는 UIP 환자와 정상인 모두에서 JNK 활성도를 관찰할 수 없었다. 더구나 10 ng/mL의 TNF-$\alpha$로 자극하여도 JNK 활성도는 관찰할 수 없었다. 결 론 : UIP 환자의 폐 조직에서 JNK가 활성화되어 있음을 간접적으로 확인하였고, 추후 이들 활성화된 JNK와 fibrogenic cytokines과의 관계는 더 연구되어져야 할 과제로 생각된다.

• 한국조리학회지
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• 제20권6호
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• pp.115-127
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• 2014

본 연구에서는 방울토마토 라이코펜 품종의 기능성 식품 또는 식품 소재로서의 효용성을 알아보기 위하여 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량, 항산화 활성, 암세포 생육억제 효과를 검증하여 보았다. 방울토마토 라이코펜 품종의 폴리페놀 함량은 건조물 1 g당 $12.28{\pm}1.78mg$으로 국내산 일반 토마토와 유사하였으며, 플라보노이드는 건조물 1 g당 $3.89{\pm}0.54mg$이 함유되어 있어, 일반 토마토에 비해 4~6배 가량 높았다. 방울토마토 라이코펜 품종의 항산화 활성을 알아보기 위해 DPPH radical scavenging activity(DSA), ABTS radical scavenging activity(ASA) 및 Ferric reducing antioxidant power(FRAP)를 측정하였다. DSA와 ASA를 측정한 결과, 추출물의 농도가 증가함에 따라 유의적으로 라디칼 소거 활성이 증가하였으며, $IC_{50}$은 각각 $328.64{\pm}4.190{\mu}g/mL$, $350.61{\pm}3.30{\mu}g/mL$이었다. 또한, FRAP값은 $26.92{\pm}0.68{\mu}mol$ $Fe^{2+}/g$으로 밝혀져 방울토마토 라이코펜 품종은 항산화 활성이 있음이 확인되었다. 방울토마토 라이코펜 품종의 세포독성과 암세포 생육억제 효과를 검증한 결과, 폐암세포(A549)에 대해 강한 생육 억제 효과를 확인할 수 있었다. 방울토마토 라이코펜 추출물은 처리 농도가 증가함에 따라 유의적으로 A549 세포의 생육을 억제하였다. 추출물을 $500{\mu}g/mL$ 농도로 처리하였을 경우, 67.39%의 암세포 억제 효과를 보였으며, $IC_{50}$은 $375.46{\pm}33.67{\mu}g/mL$이었다. 또한, 방울토마토 라이코펜 추출물은 자궁경부암세포(HeLa)와 간암세포(HepG2)에 대해서도 약한 생육억제 효과를 보임을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 통해 방울토마토 라이코펜 품종은 기능성 식품 또는 식품 소재로서의 가치가 매우 높음이 확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제32권1호
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• pp.72-77
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• 2004

본 연구진은 토양미생물의 배양액으로부터 cyclin-dependent kinase 저해활성의 Toyocamycin을 분리하였으며 〔16〕, 화학적 전합성을 통하여 활성이 개선된 유도체인 신물질 MCS-5A를 합성하였다〔3〕. 이 MCS-5A를 이용한 항암 기전규명을 위한 연구를 통하여 , human promyelocytic leukemia cell(HL-60)에서 MCS-5A에 의해 cyclin-dependent kinase inhibitor p16$^{INK4A}$ 단백질의 발현증가가 암세포의 세포주기 억제와 동시에 HL-60 cell희 세포사멸을 유도하는 것을 확인하였다(data not shown). 그러나 HL-60 cell의 경우와는 달리 non small cell lung cancer cell(NSCLC)인 A549 cell(p16$^{INK4A}$ 결핍 세포주)에 MCS-5A를 처리할 경우에는 전혀 세포사멸이 유도되지 않았다. 따라서 MCS-5A에 의한 HL-60 cell에서의 세포사멸 유도는 발암억제 유전자인 P16$^{INK4A}$의 세포 내 발현 및 존재 여부에 의해 좌우되는 것으로 판단되었다. 이러한 배경에서 본 연구는 p16$^{INK4A}$.의 기존에 알려진 세포주기 억제를 유발하는 cyclin-dependent kinase inhibitor(CKI)로서의 역할 뿐 아니라, p16$^{INK4A}$ 유전자가 세포사멸을 유도할 수 있다는 새로운 기능을 규명하기 위하여 다음의 연구를 시도하였다. 즉 $p^{INK4A}$ 결핍 세포주인 A549(-p16/+p53)와 H1299(-pl6/-p53) 그리고 p16$^{INK4A}$ 함유 세포주인 HeLa(+p16/+p53)세포에 외부로부터 p16$^{INK4A}$ 유전자를 도입시켜, 각 세포주에서의 세포사멸 유도 여부를 비교하고자 하였다. 우선 wild-type p16$^{INK4A}$ 유전자를 가진 HeLa cell에서 총 RNA를 추출하여, 역전사 반응으로 cDNA를 만들고, PCR을 통해 p16$^{INK4A}$ 유전자를 증폭하였다. pcDNA3.1/His is A vector에 p16$^{INK4A}$ 유전자를 끼워 넣고 competent cell (XL1-Blue)에 형질 전환하여 cloning한 후, p16$^{INK4A}$ clone을 다량으로 추출하였다. 위에 언급한 각각의 cell line에 p16$^{INK4A}$유전자를 농도(0, 1, 5, 10$\mu\textrm{g}$)별로 transfection 시킨 후, p16 단백질을 일정 시간 동안(12시간) 발현시킨 뒤, TUNEL등의 분석을 통해 세포사멸이 유도되는지를 확인하였으며, 또한 Western blot 분석을 통하여 p16단백질과 세포사멸 유도 인자인 caspase 3의 발+현 양상을 확인하였다. 연구 결과, Western blot을 통해 transfection시킨 p16/INK4A/유전자의 농도에 따라 각각의 cell line에서 Pro-caspase 3의 감소함을 관찰할 수 있었고, TUNEL분석을 통해 A549및 HeLa cell에서 세포사멸이 유도됨을 확인할 수 있었다 특히 A549(-p16/+p53)와 HeLa cell(+p16/+p53)에서는 TUNEL 분석 및 Western blot을 통한 pro-caspase 3의 caspase 3로의 전환 등을 통해 세포사멸이 발생하였음을 확연하게 확인할 수 있었으나, 반면 H1299(-pl6/-p53) cell에서는 단지 Western blot을 통한 pro-caspase 3의 활성화만을 통해 간접적으로 세포사멸을 확인 할 수 있었다. 또한 p53이 결핍된 H1299(-pl6/-p53)세포주에서의 $^{INK4A}$ 에 의한 세포사멸 유도는 p53 비의존적으로 작용한다는 사실을 확인할 수 있었다. 결론적으로 발암억제 유전자인 $^{INK4A}$ 는 CKI로서의 기능뿐 아니라, 세포사별 유도와도 밀접하게 관련되어 있으며, 이 기능은 발암 억제 유전자인 p53과는 독립적으로 작용한다는 사실을 확인하였다. 세포사멸 유도 기전연구에서 $p16^{INK4A}$ 가 세포사멸을 유도하는 기전에 대해서는 아직 명확하게 밝혀진 바는 없으며, 현재 본 연구실에서 다양한 실험을 통해 연구가 진행 중이다.