The objective of this study was to screen single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the chicken lipoprotein lipase gene (LPL), using 545 F1 hybrids developed from $4{\times}4$ diallel crossing of four chicken breeds, and to analyze the associations between polymorphisms of the LPL and chicken fat deposition traits. PCR-SSCP was used to detect SNPs in LPL. Fifteen sets of primers were designed to amplify DNA fragments covering the 5'flanking and coding regions of LPL. It showed that there existed 5 polymorphic loci in the 5'flanking region and coding region, respectively. Association analysis was carried out between 10 polymorphic loci and intermuscular fat width, abdominal fat weight, and thickness of subcutaneous fat using ANCOVA, respectively. The results indicated that, in the 5'flanking region, the loci d and e significantly affected thickness of subcutaneous fat (p<0.05), abdominal fat weight (p<0.01) and subcutaneous fat (p<0.05), while in the coding region, synonymous mutation in exon 8 was significantly associated with intermuscular fat width (p<0.05), however, the non-synonymous mutations in exon 7 and exon 9 did not show statistically significant effects on fat deposition traits in this study.
Objective: This study investigated the effects of dietary n-6:n-3 polyunsaturated fatty acid (PUFA) ratio on growth performance, blood indexes, tissue fatty acid composition and the gene expression in finishing pigs. Methods: Seventy-two crossbred ([Duroc×Landrace]×Yorkshire) barrows (68.5±1.8 kg) were fed one of four isoenergetic and isonitrogenous diets with n-6:n-3 PUFA ratios of 2:1, 3:1, 5:1, and 8:1. Results: Average daily gain, average daily feed intake and gain-to-feed ratio had quadratic responses but the measurements were increased and then decreased (quadratic, p<0.05). The concentrations of serum triglyceride, total cholesterol and interleukin 6 were linearly increased (p<0.05) with increasing of dietary n-6:n-3 PUFA ratio, while that of high-density lipoprotein cholesterol tended to decrease (p = 0.062), and high-density lipoprotein cholesterol:low-density lipoprotein cholesterol ratio and leptin concentration were linearly decreased (p<0.05). The concentration of serum adiponectin had a quadratic response but the measurement was decreased and then increased (quadratic, p<0.05). The proportion of C18:3n-3 was linearly decreased (p<0.05) in the longissimus thoracis (LT) and subcutaneous adipose tissue (SCAT) as dietary n-6:n-3 PUFA ratio increasing, while the proportion of C18:2n-6 and n-6:n-3 PUFA ratio were linearly increased (p<0.05). In addition, the expression levels of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) and lipoprotein lipase in the LT and SCAT, and adipocyte fatty acid binding protein and hormone-sensitive lipase (HSL) in the SCAT had quadratic responses but the measurements were increased and then decreased (quadratic, p<0.05). The expression of HSL in the LT was linearly decreased (p<0.05) with increasing of dietary n-6:n-3 PUFA ratio. Conclusion: Dietary n-6:n-3 PUFA ratio could regulate lipid and fatty acid metabolism in blood and tissue. Reducing dietary n-6:n-3 PUFA ratio (3:1) could appropriately suppress expression of related genes in PPARγ signaling, and result in improved growth performance and n-3 PUFA deposition in muscle and adipose tissue in finishing pigs.
Lee, H.J.;Lee, S.H.;Cho, Y.M.;Yoon, H.B.;Jeon, B. K.;Oh, S.J.;Kwon, M.S.;Yoon, D.H.
Journal of Animal Science and Technology
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v.46
no.6
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pp.947-956
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2004
The primary role of lipoprotein lipase(LPL) is the hydrolysis of triglycerides(TG) from the core of triglyceride-rich lipoproteins such as chylomicrons and very low density lipoproteins in plasma. Fatty acids liberated by LPL on capillary endothelial surfaces are available for tissues as energy sources especially in muscles or for storage in the form of TG in adipose tissues. Therefore, as the candidate gene related to the carcass traits of the beef cattle, we have directly sequenced the exon 5${\sim}$exon 6 region in the bovine LPL gene for discovery of single nucleotide polymorphism(SNP) with 24 unrelated Hanwoo(Korean cattle). Novel eight sequence variants were detected: three loci on exon 5, three on intron 5 and two on exon 6. All SNPs identified were strongly linked each other, and one hundred twenty eight Hanwoo samples were genotyped one SNP on intron 5 using PCR-restriction fragment length polymorphism method by digestion with Hae III restriction enzyme. The allele frequency of the polymorphism was 0.76 and 0.24. The effects of this polymorphism on the breeding values of the carcass weight, loin muscle area, back fat thickness and marbling score were analyzed using least square methods of SAS GLM. The marbling score of BB genotype was significantly higher than those of AA and AB genotypes(P<0.05). This result indicates that this polymorphism may be associated with the variation of marbling score. Further study is warranted to investigate the phenotypic association in Hanwoo.
Large quantity of eggs fail to be fertilized and many of fertilized eggs are unable to hatch in the eel, Anguilla japonica. Larvae of eel absorb egg yolk up to 8 days after hatching but the majority of hatched larvae die before they reach the stage of first feeding in this species. Genes of key enzymes for yolk processing (cathepsin B, D, L and lipoprotein lipase - abbreviated as ctsb, ctsd, ctsl and lpl, respectively) could be associated with egg quality. In this study, we investigated differences in the expression of these genes between floating eggs and sinking eggs, and also the relationship between the gene expressions of the enzymes and fertilization rates in the fertilized eggs obtained from artificially matured female eels. Expressions of yolk processing enzyme genes did not show significant difference between floating and sinking egg groups. Expression of ctsb decreased when fertilization rate was high. Expression of ctsd, ctsl and lpl, however, did not show any significant differences. These results suggest that ctsb expression could be an indicator of egg quality, and that some proteins prone to be digested by ctsb could be very important in the process of fertilization and normal cleavage in this species. Further study should identify these critical proteins to improve our understanding on the quality of fish eggs.
Kim, Minjeong;Yun, Jun-Won;Shin, Kyeho;Cho, Yejin;Yang, Mijeong;Nam, Ki Taek;Lim, Kyung-Min
Biomolecules & Therapeutics
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v.25
no.2
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pp.112-121
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2017
Drug-induced liver injury (DILI) is the serious and fatal drug-associated adverse effect, but its incidence is very low and individual variation in severity is substantial. Acetaminophen (APAP)-induced liver injury accounts for >50% of reported DILI cases but little is known for the cause of individual variations in the severity. Intrinsic genetic variation is considered a key element but the identity of the genes was not well-established. Here, pre-biopsy method and microarray technique was applied to uncover the key genes for APAP-induced liver injury in mice, and a cause and effect experiment employing quantitative real-time PCR was conducted to confirm the correlation between the uncovered genes and APAP-induced hepatotoxicity. We identified the innately and differentially expressed genes of mice susceptible to APAP-induced hepatotoxicity in the pre-biopsied liver tissue before APAP treatment through microarray analysis of the global gene expression profiles (Affymetrix $GeneChip^{(R)}$ Mouse Gene 1.0 ST for 28,853 genes). Expression of 16 genes including Gdap10, Lpl, Gabra3 and Ccrn4l were significantly different (t-test: FDR <10%) more than 1.5 fold in the susceptible animals than resistant. To confirm the association with the susceptibility to APAP-induced hepatotoxicity, another set of animals were measured for the expression level of selected 4 genes (higher two and lower two genes) in the liver pre-biopsy and their sensitivity to APAP-induced hepatotoxicity was evaluated by post hoc. Notably, the expressions of Gabra3 and Lpl were significantly correlated with the severity of liver injury (p<0.05) demonstrating that these genes may be linked to the susceptibility to APAP-induced hepatotoxicity.
G protein-coupled receptor 43 (GPR43) is a newly-discovered short-chain free fatty acid receptor and its functions remain to be defined. The objective of this study was to investigate the function of GPR43 on lipolysis. We successfully cloned the GPR43 gene from the pig (EU122439), and measured the level of GPR43 mRNA in different tissues and primary pig adipocytes. The expression level of GPR43 mRNA was higher in adipose tissue and increased gradually with adipocyte differentiation. Then we examined GPR43 mRNA level in different types, growth-stages and various regions of adipose tissue of pigs. The results showed that the expression level of GPR43 mRNA was significantly higher in adipose tissue of obese pigs than in lean pigs, and the expression level also gradually increased as age increased. We further found that the abundance of GPR43 mRNA level increased more in subcutaneous fat than visceral fat. Thereafter, we studied the correlation between GPR43 and lipid metabolism-related genes in adipose tissue and primary pig adipocytes. GPR43 gene had significant negative correlation with hormone-sensitive lipase gene (HSL, r = -0.881, p<0.01) and triacylglycerol hydrolase gene (TGH, r = -0.848, p<0.01) in adipose tissue, and had positive correlation with peroxisome proliferator-activated receptor $\gamma$ gene ($PPAR_{\gamma}$, r = 0.809, p<0.01) and lipoprotein lipase gene (LPL, r = 0.847, p<0.01) in adipocytes. In addition, we fed different concentrations of docosahexaenoic acid (DHA) to mice, and analyzed expression level changes of GPR43, HSL and TGH in adipose. The results showed that DHA down-regulated GPR43 and up-regulated HSL and TGH mRNA levels; GPR43 also had significant negative correlation with HSL (low: r = -0.762, p<0.01; high: r = -0.838, p<0.01) and TGH (low: r = -0.736, p<0.01; high: r = -0.586, p<0.01). Our results suggested that GPR43 is a potential factor which regulates lipolysis in adipose tissue, and DHA as a receptor of GPR43 might promote lipolysis through down-regulating the expression of GPR43 mRNA.
Objective: This study examined the influence of dietary supplementation of Nigella sativa seeds, Rosmarinus officinalis leaves and their combination on carcass attributes, fatty acid (FA) composition, gene expression, lipid oxidation and physicochemical properties of longissimus dorsi (LD), semitendinosus (ST), and supraspinatus (SS) muscles in Dorper lambs. Methods: Twenty-four Dorper lambs ($18.68{\pm}0.6kg$, 4 to 5 months old) were randomly assigned to a concentrate mixture containing either, no supplement (control, T1), 1% Rosmarinus officinalis leaves (T2), 1% Nigella sativa seeds (T3), or 1% Rosmarinus officinalis leaves+1% Nigella sativa seeds (T4) on a dry matter basis. The lambs were fed the treatments with urea-treated rice straw for 90 days, slaughtered and the muscles were subjected to a 7 d postmortem chill storage. Results: The T2 lambs had greater (p<0.05) slaughter and cold carcass weights than the control lambs. Dietary supplements did not affect (p>0.05) chill loss, dressing percentage, carcass composition, intramuscular fat and muscle pH in Dorper lambs. Meat from supplemented lambs had lower (p<0.05) cooking and drip losses, shear force, lightness, and lipid oxidation and greater (p<0.05) redness compared with the control meat. The impact of dietary supplements on muscle FA varied with muscle type. Diet had no effect (p>0.05) on the expression of stearoyl-CoA desaturase and lipoprotein lipase genes in LD and ST muscles in Dorper lambs. The T2 and T3 diets up regulated the expression of AMP-activated protein kinase alpha 2 gene in LD and ST muscles and up regulated the expression of sterol regulatory element-binding protein 1 in ST muscle in Dorper lambs. Conclusion: Dietary supplementation of Nigella sativa seeds and Rosmarinus officinalis leaves had beneficial effects on meat quality in Dorper lambs.
We created a cDNA microarray representing approximately 3,500 pig genes for functional genomic studies. The array elements were selected from 6,494 cDNA clones identified in a large-scale expressed sequence tag (EST) project. These cDNA clones came from normalized and subtracted porcine adipose tissue cDNA libraries. Sequence similarity searches of the 3,426 ESTs represented on the array using BLASTN identified 2,790 (81.4%) as putative human orthologs, with the remainder consisting of "novel" genes or highly divergent orthologs. We used the gene microarray to profile transcripts expressed by adipose tissue of fatty Chinese Xiang pig (XP) and muscley Large White (LW). Microarray analysis of RNA extracted from adipose tissue of fatty XP and muscley LW identified 81 genes that were differently expressed two fold or more. Transcriptional differences of four of these genes, adipocyte fatty acid binding protein (aP2), stearyl-CoA desaturase (SCD), sterol regulatory element binding transcription factor 1 (SREBF1) and lipoprotein lipase (LPL) were confirmed using SYBR Green quantitative RT-PCR technology. Our results showed that high expression of SCD and SREBF1 may be one of the reasons that larger fat deposits are observed in the XP. In addition, our findings also illustrate the potential power of microarrays for understanding the molecular mechanisms of porcine development, disease resistance, nutrition, fertility and production traits.
Dlx3 and Dlx5 are homeobox domain proteins and are well-known regulators of osteoblastic differentiation. Since possible reciprocal relationships between osteogenic and adipogenic differentiation in mesenchymal stem cells exist, we examined the regulatory role of Dlx3 and Dlx5 on adipogenic differentiation using human dental pulp stem cells. Over-expression of Dlx3 and Dlx5 stimulated osteogenic differentiation but inhibited adipogenic differentiation of human dental pulp stem cells. Dlx3 and Dlx5 suppressed the expression of adipogenic marker genes such as $C/EBP{\alpha}$, $PPAR{\gamma}$, aP2 and lipoprotein lipase. Adipogenic stimuli suppressed the mRNA levels of Dlx3 and Dlx5, whereas osteogenic stimuli enhanced the expression of Dlx3 and Dlx5 in 3T3-L1 preadipocytes. These results suggest that Dlx3 and Dlx5 exert a stimulatory effect on osteogenic differentiation of stem cells through the inhibition of adipogenic differentiation as well as direct stimulation.
This study was carried out to investigate the potential effects of Gardenia jasminoides (GJ) extracts, on hepatic steatosis and lipid metabolism in mice fed with high-fat diet (HFD). GJ extracts (100 mg/kg, ${\times}10$ weeks) fed mice showed reduced body weight, adipose tissue weight, reduced aminotransferase level in plasma and hepatic lipid (triglyceride, total cholesterol) content. These effects were accompanied by decreased expression of lipogenic genes, sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), liver X receptor (LXR), fatty acid synthase (FAS), acetyl-CoA carboxylase (ACC), cluster of differentiation 36 (CD36), lipoprotein lipase (LPL) and decreased lipogenic enzyme FAS and HMG-CoAR enzyme activities while elevating carnitine palmitoyltrasferase-1 (CPT) activity. Based on these results, we speculated that the inhibitory effect on hepatic steatosis of GJ extract containing geniposide is the result of suppression of lipid synthesis in mice fed with HFD, suggesting that GJ extract may be beneficial in preventing hepatic steatosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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