Park, Hee-Bin;Kim, Yun-Ji;Lee, Seong-Min;Park, James S.;Kim, Keun-Sik
대한의생명과학회지
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제25권2호
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pp.159-169
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2019
Breast cancer stem cells (BCSCs) in breast cancer cells have self-renewal ability and differentiation potential. They are also resistant to drugs after chemotherapy. To overcome this resistance, we designed negatively charged 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoglycerol (DMPG)-based liposomes for drug delivery. These liposomes have enhanced the therapeutic effects of a range of antitumor therapies by increasing the cellular uptake and improving drug delivery to targets sites. In this study, we investigated whether DMPG-POPC liposomes, including the neutral lipid 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholin (POPC), can specifically bind to MCF-7 breast cancer cells and increase cellular uptake compared with that by CHOL-POPC liposomes. We also estimated the cytotoxicity of DMPG-POPC liposomes encapsulated with both metformin (Met) and sodium salicylate (Sod) against breast cancer cells and BCSCs compared with that of the free drugs. Our results demonstrated that these dual drug-encapsulated liposomes significantly enhanced the cytotoxic and anti-colony formation abilities compared with individual drug-encapsulated liposomes or free drugs in BCSCs. Overall, our results suggest that DMPG-POPC liposomes containing two drugs (Met + Sod) show promise for synergistic anti-cancer therapy of breast cancer by increasing drug delivery efficiency into breast cancer cells and BCSCs.
This study was carried out to examine in vitro first whether the storage proteins, which the fat bodies of last larvae from Hyphantria cunea secrete into haemolymph, can be uptaked by the fat body cells of prepupa and then how the uptaked storage proteins can be accumulated in the fat body cells, if uptaken. The fat bodies which had been isolated from last instar larvae were cultured in 1 ml of Grace's insect medium containing $50{\mu}l$ of $^{3}H$-leucine (5.0 mCi/mol, Dupont) at $28{\pm}2^{\circ}C$ for 6 hrs. After the homogenates of the cultured fat bodies were centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes, the proteins included in the supernatant were separated by polyacrylamide gel electrophoreses (non-SDS, 6%). The next treatment of the electrophoresed gel was followed by rinsing. A storage protein band of several bands in the rinsed gel was sliced off. With elution of sliced storage protein bands in Tris-glycine buffer, the purification of radioactive storage proteins from fat bodies was finished. After the purified radioactive storage proteins were added in Grace's insect midis containing fat bodies of the prepupae, they were cultured for the randomly following minutes given as 3, 5, 7, 10, 15, 20 and 30 and for the randomly following hours given as 1, 2, 3 and 4 respectively. The double fixations of the cultured fat bodies in aldehyde and $OsO_4$, were followed by preparation of ultrathin sections from Epon-Araldite blocks through dehydration and embedding. The electron microscope autoradiographic treatment of all prepared sections were performed by the dipping method (Kim et al., 1987). The finally prepared specimens were examined with electron microscope. The fat body cells of the prepupa could be found to uptake the storage preteins of the last instar larvae, which were included in the culture medium, mostly by formation of coated vesicles. The in vitro uptake of the storage proteins actively occurred by 30 minutes after the addition of purified storage proteins in the culture medium. After culture for 7 minutes with the storage proteins, the uptaked radioactive storage proteins labelled a number of lysosomal granules. After culture for 20 minutes with the storage proteins, the radioactive storage proteins were finally incorporated and accumulated in lipid droplets and protein granules. The frequency in the fat body cell of radiolabelled lipid droplets occurs approximately 60%, while the frequency, in which the radiolabelled protein granules occurs in a fat body cell, is approximately 40%.
본 연구는 복분자 미숙과 물 추출물이 in vivo에서 지질대사 및 산화적 스트레스에 미치는 영향을 살펴보고, 기능성 식품으로서의 가능성을 알아보기 위하여 수행되었다. 실험동물은 C57BL/6J mouse를 사용하였으며, 12주 동안 고지질 식이를 급이하면서, 복분자 미숙과 물 추출물을 경구 투여하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 고지질대조군과 비교하였을 때, 복분자 미숙과 첨가군에서 체중증가량, 식이효율이 모두 감소되었고, 혈중 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤의 농도를 유의성 있게 감소시켰을 뿐만 아니라 간 조직에서 총콜레스테롤의 함량이 유의적으로 감소됨을 확인하였다. 콜레스테롤 합성의 가장 중요한 기작인 LDL receptor와 SREBP2의 활성을 증가시킴으로써, 세포 안으로의 LDL 흡수를 촉진하였고, HMG-CoA reductase의 유전자 발현이 증가되면서 체내 콜레스테롤을 조절하며, ABCA1의 활성화로 인해, 콜레스테롤의 배출을 증가시키는 결과를 도출하였다. 또한, 간조직의 지질산화수준(TBARS)을 유의적으로 감소시켰으며, ox-LDL관련 유전자인 CD36을 억제함으로써, 동맥경화를 예방할 것으로 기대한다. 간의 형태학적 변화를 관찰해본 결과, 고지질대조군에 비하여 지방형성이 현저히 줄어들었음을 확인하였다. 결과적으로 복분자 미숙과 물 추출물이 콜레스테롤의 생합성과 배출 및 산화적 스트레스를 조절하여 고지질 및 동맥경화 질환 예방에 긍정적인 효과를 미치는 것으로 사료된다.
This study was to evaluate the biological activity of flavor components extracted from E. ciliata and E. splendens in order to survey the possibility applicable to tobacco and food industry. Flavor components were extracted with dividing into three parts; essential oil, absolute, oleoresin. In the nonenzymatic lipid peroxidation system, the inhibition rate($\%$) of essential oil were $67.3\;\pm\;20.7\%,\;58.1\;\pm\;19.3\%$ at the concentration of 50 ${\mu}g/mL$ of E. ciliata and E. splendens, respectively. The inhibition rate($\%$) of the oleoresin in E. ciliata was higher than one in E. splendens. In the enzymatic lipid peroxidation system, the inhibition rate($\%$) of essential oil and oleoresin was$14.28\;\pm\;2.38\%,\;and\;65.93\;\pm\;0.01\%,\;and\;was\;22.58\;\pm\;2.84\%\;and\;40.73\;pm\;6.04\%$. The oleoresin of two species were showed above $90\%$ of the inhibition rate($90\%$) against autooxidative lipid peroxidation system. $EC_{50}$ values in neutral red uptake assays 24 h of exposure times were $23.3\;{\mu}g/mL,\;341.0\;{\mu}g/mL\;and\;17.2\;{\mu}g/mL$ in essential oil, absolute and oleoresin from E. ciliata respectively, and were $46.4\;{\mu}g/mL,\;681.7\;{\mu}g/mL\;17.6\;{\mu}g/mL$ in three extractions of E. splendens. Oleoresin of two species showed high rate in the cytotoxic effect by neutral red uptake assay. Absolute and oleoresin did not show antibiotic and mutagenic activity. On the contrary, essential oil with over 500 ug/plate showed antibiotic and mutagenic activity in Ames test. Essential oil and oleoresin have a prolongating effect the ciliostasis of rat trachea. This results indicate that flavor components extracted from E. ciliata and E. splendens can be considered to be toxicological safe and to be the possibility applicable the cigarette, food and drug industry as a flavor for expectoration.
Egg consumption has been limited to avoid cardiovascular diseases such as atherosclerosis and hyperlipidemia, because the yolk contains high levels of cholesterol. This study was conducted to evaluate the effect of the water-soluble component of egg-yolk on the growth efficiency, immune modulation, and changes in serum lipid levels in BALB/c mice. A total 5 wk old 120 BALB/c male mice were divided into 4 groups and were fed 0, 2, 10, and 20 mg/d water-soluble egg yolk extract (WSEYE) for 5 wk. Water-soluble egg yolk extract (WSEYE) uptake resulted in a significant reduction in daily weight gain and feed efficiency rate (FER). The mouse groups treated with 2 and 20 mg/d WSEYE showed a significant increase in populations of monocytes at the third wk and B-lymphocyte activity at the fifth wk. In addition, WSEYE uptake did not influence serum immunoglobulin E levels. In serum lipid-profile studies, treatment of WSEYE did not alter total cholesterol and low-density lipoprotein levels; however, blood triglyceride levels were significantly diminished in mice treated with 2 mg/d at the third wk (p<0.05), and the level of high-density lipoprotein was significantly increased in the mice group treated with 2 and 10 mg/d WSEYE after 5 wk (p<0.05). Taken together, the data demonstrate the beneficial effects of WSEYE in the diet on immune modulation and serum lipid profiles in mouse models; therefore, this study suggests that ingestion of water-soluble fraction of egg yolk might not be related to the increased risk of heart disease, but can be an excellent candidate for maintaining health.
Kim, Jisu;Beak, Suji;Ahn, Sanghyun;Moon, Byung Seok;Kim, Bom Sahn;Lee, Sang Ju;Oh, Seung Jun;Park, Hun-Young;Kwon, Seung Hae;Shin, Chul Ho;Lim, Kiwon;Lee, Kang Pa
Nutrition Research and Practice
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제16권1호
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pp.33-45
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2022
BACKGROUND/OBJECTIVES: Ginseng extract (GSE) and taurine (TR) are widely used antifatigue resources in functional foods. However, the mechanism underlying the antifatigue effects of GSE and TR are still unclear. Hence, we investigated whether GSE and TR have synergistic effects against fatigue in mice. MATERIALS/METHODS: L6 cells were treated with different concentrations of TR and GSE, and cell viability was determined using 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium. Oxidative stress was analyzed by immunocytochemistry using MitoTrackerTM Red FM and an anti-8-oxoguanine antibody. Respiratory gas analysis was performed to investigate metabolism. Expression of an activated protein kinase was analyzed using immunohistochemistry. Gene expression of cluster of differentiation 36 and pyruvate dehydrogenase lipoamide kinase isozyme 4 was measured using reverse transcription-polymerase chain reaction. Mice were orally administered TR, GSE, or their combination for 30 days, and then fatigue-related parameters, including lactate, blood urea nitrogen, and glycogen, were measured after forced swimming. RESULTS: TR and GSE reduced oxidative stress levels in hydrogen peroxide-stimulated L6 cells and enhanced the oxygen uptake and lipid metabolism in mice after acute exercise. After oral administration of TR or GSE for 30 days, the fatigue-related parameters did not change in mice. However, the mice administered GSE (400 mg/kg/day) alone for 30 days could swim longer than those from the other groups. Further, no synergistic effect was observed after the swimming exercise in mice treated with the TR and GSE combination for 30 days. CONCLUSIONS: Taken together, our data suggest that TR and GSE may exert antifatigue effects in mice after acute exercise by enhancing oxygen uptake and lipid oxidation.
The effect of inabenfide was investigated in rice seedlings subjected to salt stress in relation to changes in chlorophyll fluorescence(${\Delta}F/Fm'$), lipid peroxidation, salicylic acid(SA) content, and catalase(CAT) activity. A reduction in shoot growth of rice seedlings by 120 mM NaCl treatment was significantly alleviated by pretreatment with 30 ${\mu}M$ inabenfide. Sodium ion content was not affected by pretreatment with inabenfide, suggesting that alleviation was not due to a reduction in sodium ion uptake by the rice seedlings. At three days after NaCl treatment, the rice seedlings pretreated with inabenfide showed a higher ${\Delta}F/Fm'$(30%) and lower lipid peroxidation(28%) compared with the rice seedlings treated with NaCl alone. After NaCl treatment, CAT activity in the third leaf of rice seedlings decreased significantly but alleviated by pretreatment with inabenfide. Furthermore, pretreatment with inabenfide also reduced the level of SA which accumulated drastically in the third leaf of rice seedlings within a day after exposure to salt stress. These results suggest that inabenfide prevents SA accumulation in rice seedlings under salt stress which eventually induces the alleviation of salt stress damage.
The antioxidative activities of the water solution of crude extract from edible mushroom enokitake Flammulina velutipes were compared with those of ascorbic acid and ascorbic acid 6-palmitate in oil-in-water (O/W) emulsions of cod liver oil. Oxidation of the emulsions was carried out at 40 and $50^{\circ}C$ in the dark. The antioxidant activities were measured by in vitro assay against oxygen uptake, 2-thiobarbituric acid value, hydroperoxide formation of the oils. Also, residual docosahexaenoic acid content was measured as indices of lipid oxidation. The cod liver oil in O/W emulsions with added enokitake crude extract (ECE) was significantly more stable against lipid oxidation than the control emulsions without the extract in terms of any oxidation indices used. Moreover, ECE provided remarkable antioxidative properties to eicosapentaenoic acid ethyl ester in emulsion system. These observations demonstrate that F. velutipes can be used as a natural antioxidant, which effectively prevents oxidation of polyunsaturated oils in emulsion system.
Yu, Seungmin;Choi, Jong Hun;Kim, Hun Jung;Park, Soo Hyun;Go, Gwang-woong;Kim, Wooki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권9호
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pp.1617-1627
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2017
Dietary approaches using structured lipids, including medium-chain fatty acids and diacylglycerols, have been adopted for the prevention of obesity-induced chronic inflammation. In an extension to previous studies, medium-chain fatty acid-diacylglycerol enriched dietary oil (MCDG) was prepared by interesterification of canola oil and medium-chain fatty acid-triacylglycerols. The consequent MCDG product was applied to RAW264.7 macrophages followed by the assessment of multiple inflammatory responses. Compared with conventionally used canola and olive oil controls, MCDG suppressed macrophage phagocytosis, as assessed by the uptake of microsphere beads. Furthermore, the production of IL-6 and $TNF-{\alpha}$, transcription of COX-2 and iNOS, and expression of CD80 on cell surfaces were downregulated by MCDG in LPS-stimulated macrophages. Subsequently, differentiated 3T3-L1 adipocytes were evaluated for proinflammatory cytokine production and lipid accumulation. IL-6 production was marginally affected and lipid accumulation was inhibited by MCDG. Taken together, these results suggest that MCDG has potential as an alternative oil for cooking in order to prevent obesity-induced inflammation.
Juglans sinensis Dode has been reported to have antioxidant activity. However, the effect of Juglans sinensis Dode aquacupuncture(JS) on reactive oxygen species(ROS)-induced alterations in membrane transport function in renal tubular cells. This study was performed to evaluate the effect of JS on the organic hydroperoxide t-butylhydroperoxide(tBHP)-induced inhibition of $Na^+$-dependent phosphate($Na^+$-Pi) uptake in opossum kidney (OK) cells, an established renal proximal epithelial cell line. tBHP inhibited $Na^+$-Pi uptake in a time-dependent manner. The inhibitory effect of tBHP was prevented by JS over concentration range of 0.05-1mg/100ml in a dose-dependent manner. Kinetic studies showed that tBHP caused an decrease in Vmax for $Na^+$-Pi uptake without any a significant change in Km. $Na^+$-dependent phosphonoformic acid binding, a irreversible inhibitor of renal $Na^+$-Pi uptake, was decreased by tBHP treatment. The reduction in Vmax and phosphonoformic acid binding by tBHP was prevented by JS. tBHP induced lipid peroxidation and its effect was completely inhibited by JS and antioxidant N,N'-diphenyl-p-phenylenediamine. These data suggest that the oxidant inhibits phosphate uptake by a reduction in the number of active carrier across the membrane. JS may prevent oxidant-induced inhibition of membrane transport function by a mechanism similar to antioxidants in renal epithelial cells. Although the precise constituents remain to be explored, JS may be employed as a useful candidate herb for drug development to prevent and treat oxidant-mediated renal failure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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