In the screening process of organic solvent tolerant bacteria showing good growth in media containing several kinds of organic solvents, one strain was isolated and identified as Bacillus sp. BCNU 5006. The strain was able to tolerate many organic solvents including benzene, toluene, xylene, octane, dodecane, butanol and ethylbenzene. Likewise, it could also utilize these solvents as the sole source of carbon with significant enzyme production. The lipolytic enzyme stability of Bacillus sp. BCNU 5006 was studied in the presence of several kinds of solvents at a 25% (v/v) concentration. The highest enzyme stability was observed in the presence of octane (107%), followed by ethylbenzene (88%), decane (86%), and chloroform (85%). Especially, BCNU 5006 lipase was determined to be more stable than immobilized enzyme (Novozyme 435) in the presence of octane, chloroform and xylene. This organic solvent tolerant Bacillus sp. BCNU 5006 could be expected as a potential bioremediation agent and biocatalyst for biodegradation and provide on organic-solvent-based enzymatic synthetic method in industrial chemical processes.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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제8권1호
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pp.55-58
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1991
Biosurfactant have a low toxicity, good biodegradable, various structure. It can be used for a broad range of purposes in a large variety of different applications. Sorbitol mono alkyl ester synthesized by the Porcine Pancreatic lipase catalyzes transesterification reaction between a sugar alcohol and plant oils. We are examined the surface tension, emusion stability and critical micelle concentration were evaluated. Consequently It has a good properties of biosurfactant.
A new functional lipolytic enzyme (AT4) has recently been found from Agrobacterium tumefaciens C58 Cereon using a genome-wide approach. The enzyme has some sequence similarity to E. coli acetyl hydrolase, Emericella nidulans lipase, Moraxella sp. lipase, Acinetobacter lwoffii esterase, and Streptomyces hygroscopicus acetyl hydrolase. However, the sequence similarities are very low (less than $25\%$), suggesting that it is a new lipase/esterase enzyme. ill the present study, intact cell of the A. tumefaciens strain was shown to have lipolytic activity on a tributyrin-LB plate. The AT4 gene was then expressed at a high level in E. coli BL21 (DE3) cells and the enzyme was purified simply by Ni-NTA column chromatography. The purified enzyme showed hydrolytic activity toward p-nitrophenyl caproate, but not toward olive oil, suggesting that the AT4 enzyme was a typical esterase rather than lipase. AT4 esterase had a maximum hydrolytic activity at $45^{\circ}C$ and pH 8.0, when p-nitrophenyl caproate was used as a substrate. It was relatively stable up to $40^{\circ}C$ and at pH 5.0-9.0. Calcium ion and EDT A did not affect the activity and thermal stability of the enzyme. As for substrate specificity, AT4 enzyme could rapidly hydrolyze acetyl and butyl groups from p-nitrophenyl esters and 1-naphthyl esters. In addition, it also released acetyl residues from acetylated glucose and xylose substrates. Therefore, this new esterase enzyme might be used as a biocatalyst in acetylation and deacetylation reactions performed in the fine chemical industry.
Interspecific hybrids between Aspergillus niger and Penicillium notatum (Tyr-), hyperlipolytic enzyme-producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Maximum production of protoplasts was obtained by 1% Novozyme 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hrs and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6 M KCl. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were $3.8{\times}10^{-3}{\sim}1.3{\times}10^{-3}$. From the observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear stain, it was suggested that their karyotypes are aneuploid. The hybrids showed $1.2{\sim}1.7$ fold higher lipase activities than parental strains. It was strongly supported by results of this study that nuclear transfer technique is much more efficient in the formation of intergeneric hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of strains.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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제41권4호
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pp.566-570
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2012
Inhibitory activity of $Sargassum$$thunbergii$ (ST) against porcine pancreatic lipase was assessed after heat treatment, pH changes, and gamma irradiation. This analysis revealed that the ST ethanol extract exhibited high lipase inhibitory activity (37.37%) at 5 mg/mL. The ST ethanol extract was treated with heat at $60^{\circ}C$ for 10, 30, and 60 min; 80 and $100^{\circ}C$ for 10 and 20 min; and $121^{\circ}C$ for 15 min, pH (2, 4, 6, 8 and 10) and ${\gamma}$-irradiation (3, 7 and 20 kGy). The lipase inhibitory activity of the ST ethanol extract increased in all heat treatments, especially at $121^{\circ}C$ for 15 min (51.55%) compared with the control. With regard to pH stability, the ST ethanol extract showed no significant changes at pH 4~8, but somewhat decreased inhibitory activity was revealed at pH 2 (26.25%) and 10 (29.93%). On the other hand, the ST ethanol extract was not affected by ${\gamma}$-irradiation treatment conditions used in this study. These results suggest that ST has a potential role as a functional food agent.
The effect of organic solvents on the stability and catalytic activity of the microbial lipase from Rhizopus arrhizus for interesterification of fats and oils has been examined. The reaction system used was nonaqueous solvent system (two phase system). The solvents examined were 5 hydrocarbons (n-hexane, n-heptane, n-octane, isooctane, and cyclohexane) and 3 ethers (diethylether, diisopropylether, di-n-butylether). The results revealed that diisopropylether and isooctane are superior to the other solvents examined for interesterification of fats and oils in two phase systems.
It has been observed that water, which is absolutely essential for enzyme activity, can induce the agglomeration of enzyme particles in organic media. Although enzyme agglomeration is significant in that it usually reduces enzyme activity and stability, little attention has been paid to the quantitative analysis of enzyme agglomeration behavior in nonaqueous biocatalytic systems. In this study, the effect of water and silica gel on enzyme agglomeration were investigated using Candida rugosa lipase and cyclohexane as a model enzyme and an organic medium. The extent of enzyme agglomeration was quantified by sieve analysis of freeze-dried agglomerates. Increasing the water content of the medium increased the size of the enzyme agglomerates, and it was found that water produced during the esterification reaction could also promote the agglomeration of enzyme particles suspended in organic media. On the other hand, the size of the enzyme agglomerates was remarkably reduced in the presence of silica gel at the same water content. We also show that this increase in the size of enzyme agglomerates results in lower reaction rates in organic solvents.
Mono-and diacylglycerol-enriched oil was produced from corn oil through enzymatic glycerolysis using 1,3-specific immobilized lipase in solvent-free system and stirred-tank batch reactor. HPLC analysis revealed enriched oil was respectively composed of: 45.05, 16.27, 23.05, and 14.98% triacylglycerol, 1,3-diacylglycerol, 1,2-diacylglycerol, and monoacylglycerol; 13.21, 0.15, 2.02, 34.36, 49.12, and 1.14 mol% palmitic, palmitoleic, stearic, oleic, linoleic, and linolenic acids; and 0.014, 0.029, 0.010 and 0.053% ${\alpha},\;{\gamma},\;{\delta}-$, and total tocopherols. Physiochemical and melting properties of enriched oil were evaluated. Oxidative stability study revealed enriched oil showed higher peroxide and p-anisidine values than corn oil. Rosemary extracts (100 to 300 ppm) reduce oxidation.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제27권2호
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pp.329-332
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2013
In present preliminary report, we showed the possibility of silk sericin (SS) in enzyme immobilization. SS beads were prepared and enzymes were immobilized on it. The specific activity of immobilized a-chymotrypsin retained more than 87% compared to the free enzyme. The immobilized a-chymotrypsin has better stability against ethanol especially those immobilized on SS beads coagulated in methanol. Immobilized trypsin and lipase had also comparable apparent activity compared to free enzyme. Our result indicates that SS could be a good candidate for enzyme immobilization support due to its hydrophilicity.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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제35권10호
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pp.1399-1404
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2006
Structured lipid (SL) containing conjugated linoleic and caproic acid was produced from soybean oil through lipase-catalyzed reaction, and its oxidative stability was compared. When heated at $60^{\circ}C\;or\;150^{\circ}C$, soybean oil as control was more susceptible to oxidation than SL. When the antioxidants, such as ascorbyl palmitate, tea polyphenol, alpha-tocopherol, and rosemary extract, were added in SL, the induction periods of each antioxidant treats in SL were increased. The tea polyphenol showed the most effective antioxidant activity among them. When the emulsion form with SL was heated from oxidation, its oxidation stability was reduced compared to SL. The oxidation stability were also observed in photooxidation of SL.
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