The physico-chemical properties of fresh milt of marbled sole, Limanda yokohamae, brown sole, Limanda herzensteini, starry flounder, Platichthys stellatus and olive flounder, Paralichthys olivaceus among flatfishes, and the fine structure of their cryopresserved spermatozoa were investigated. The highest concentration of sperm among these four species was $3.60\pm1.35\times10^{10}/mL$ in marbled sole. Osmolality and pH of seminal plasma in four flatfish species were approximately 330 mOsm/kg and 7.6-8.1, respectively. Seminal plasma compositions showed interspecific differences. The sperm heads of marbled sole, brown sole and starry flounder were ellipsoidal and that of olive flounder was round. The numbers of mitochondria of these four species were eight in marbled sole, seven in brown sole and starry flounder, and six in olive flounder. Cross-sectional view of flagellum showed typical 9+ 2 structure in all species. Most of sperms cryopreserved with a proper method had no visible ultrastructural changes after freeze-thawing, compared with the fresh sperm, but in a few cases, swelling of their heads and midpiece regions were observed.
Ultrastructures on the integumentary epidermis of the marbled sole, Limanda yokahamae, were examined by means of the light and transmission electron microscope. Epidermal layer consists of supporting cells, unicellular glands and accessory cells. The supporting cells were classified into superficial cell, intermediated cell and basal cell. The cytoplasm of supporting cells is divided into cortex and medullar part. In the cortex and medullar part, microfilaments and cell organelles are well developed, respectively. Gland cells are present in the superficial and middle epidermis. The cytoplasm of mucous cell reacted to blue in AB-PAS (pH 2.5). Club cell has a roundish central vacuole and well-developed microfilaments in the cytoplasm. Granular cells are occurs in the middle and basal epidermis , and the cytoplasm is occupied with membrane-bounded granules of electron dense. Chloride cells are present in the superficial epidermis , and the cytoplasm is occupied with tubular mitochondria. Three types of pigment cells can be distinguished by electron density of cytoplasmic inclusions.
Limanda yokohamae was studied on its growth, age at maturity, fecundity and survivorship, based on the specimens off the southeastern coast of Korea from December 1983 to November 1984. The total lengths at the formation of annulus on the otolith were back-calculated. The age at the first reproduction is 2yrs in both sexes. Fecundity was estimated to be $121{\times}10^3{\sim}429{\times}10^3$. Annual survival rate is 0.435 in female and 0.335 in male.
Changes in stress-associated biomolecules can be used as an important criterion for assessing the levels of environmental pollution because living organisms demonstrate contamination-stimulated stress responses. This study was conducted to determine the environmental status of Masan-Jinhae Bay, Korea, and its effects on marine organisms by investigating the endoplasmic reticulum (ER) dysfunction in the organs of the flat fish, Limanda yokohamae. ER dysfunction was evaluated via Western blot analysis of the ER stress proteins, immunoglobulin heavy chain binding protein (BiP) and C/EBP-homologous protein (CHOP), and the ER stress-associated protein caspase-12. The results showed that the amount of BiP and CHOP immunoreactivity in the flat fish from the bay area was much greater than that from the Gangneung, as a reference site. Similar to the ER stress proteins, the immunoreactivity of caspase-12 was also found to be elevated in the bay area when compared with that of Gangneung. These data suggest that the environmental status of Masan-Jinhae Bay induces the ER stress response, which is able to lead to phenotypic changes in marine organisms including fish.
Kim, Soo-Woon;Kim, Sam-Moon;Lee, Dong-Kun;Moon, Hyo-Bang;Choi, Hee-Gu;Kang, Chang-Keun;Choe, Eun-Sang
Ocean Science Journal
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v.42
no.2
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pp.129-134
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2007
Increasing industrial development in the Masan Bay area of Korea over the past decades increased the risk for the survival of marine organisms in the bay area by the deterioration of the water quality. Since living organisms have the ability to adapt contamination-associated stimuli by the alteration of gene expression, changes in proteins can be used as an important criterion for assessing the levels of environmental conditions. In this study, therefore, alterations of the expression of proteins in the muscle of Limanda yokohamae from Dukdong and Dotsum in the bay area were surveyed and characterized as compared with Haegumgang, which served as a control site. The results demonstrated that the twenty spots detected from Dukdong and Dotsum were similar to each other. Fifteen proteins were found to be predicted or undefined proteins, while five proteins were identified as heavy polypeptide 11 of myosin, apolipoprotein A-I, fibroblast growth factor 17b precursor, G protein-coupled receptor kinase 1 b and bonnie and clyde. These data suggest that local fish in the bay area have dysfunction in muscle physiology including contraction, lipid metabolism, proliferation and differentiation and nervous system.
Kim Dae-Jung;Jung Jee-Hyun;An Cheul-Min;Jee Young-Ju;Min Kwang-Sik;Kim Yoon;Han Chang-Hee
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.8
no.4
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pp.213-219
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2005
Vitellogenin (VTG) was purified from the blood plasma of estradiol-17$\beta$ ($E_2$)-treated male marbled sole (Limanda yokohamae) using gel filtration and anion exchange chromatography. The purity of the marbled sole VTG (msVTG) was confirmed by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and N-terminal amino acid sequencing. The purified msVTG was used to produce monoclonal and polyclonal antibodies in mice and rabbits, respectively, and the specificity of the polyclonal antisera for msVTG was confirmed by Western blot analysis. The antibodies crossreacted with a protein of molecular mass approximately 160 kDa in the plasma samples of mature female marbled sole. No cross-reactivity was observed with the plasma of male fish. A direct non-competitive sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed using the monoclonal anti-msVTG and polyclonal anti-msVTG antibodies, with purified msVTG as the standard protein. The values of the intra- and inter-assay variations were within the ranges of $8.l-9.8\%$ and $8.5-12.2\%$, respectively. The sensitivity was about 0.3 ng/mL. Serial dilutions of plasma from mature female sole reacted with the msVTG-antibodies in the sandwich ELISA, whereas the plasma from male fish did not. The results indicate that the maturation status of female marbled sole can be identified using a sandwich ELISA for msVTG.
Artificial fertilization (dry method) of mature right-eye flounder, Limanda yokohamae (female : 25.1~30.4 cm in total length (TL), male : 24.5~28.5 cm in TL), obtained from the fish market in Dolsan-do, Yosu was performed in the Fisheries Exhibition. Hatched larvae and juveniles were reared to describe their morphological development. Newly hached larvae attained 3.13~3.42 mm in TL. Their eyes were yellowish brown and their mouth and anus were not yet opened. Three to six days after hatching the larvae attained 3.35~4.61 mm in TL. Their mouth and anus were open and the yolk sac was almost absorbed. Feeding activity increased as the mouth became larger. At 25 days, the larvae attained 5.47~5.91 mm in TL. The caudal notocord was flexed $45^{\circ}$ upward. At 35 days, the larvae attained 6.83~7.60 mm in TL. Rays of the dorsal and anal fins were formed, and the left eye was moved slightly to the right side of the head. At 55 days, the juveniles attained 9.38~11.73 mm in TL. The left eye was moved completely onto the right side. All of the fins had complete set of the fin rays, and the juveniles spent most of the time on the bottom resting on their blind side (D. 68~70 : A. 50~52 : P. 11: V. 6 : C. 18~19).
The reproduction of marbled sole Limanda yokohamae, caught near around the southeastern coast of Korea, from December 1983 to November 1984, was investigated based on such annual variations as gonadosomatic index(GSL), gametogenesis, reproductive cycle, spawning number, hepatosomatic index (HSI), and fatness. GSI began to increase in the autumn season with the onset of shorter day length and colder water temperature, and reached the maximum value in December with the shortest day length and the lowest temperature over the year. The gonad activated the proliferation of oogonia and spermatogonia in June, reached the mature stage in October, ripe in December, and spawning from the end of December to January. After spawning, it showed the resting stage which gonad remained regressive and suppressive from February to May. In addition, the adult individuals observed discharged eggs only once during their spawning period. At yolk globular stage, the substance of vitellogenin synthesized from the liver was considered to participate in the active yolk accumulation of oocytes. Marbled sole was concluded to be a typical winter spawning species in that such environmental factors as short day length and low water temperature were closely related with the gametogenesis, the stimulation of oocyte maturation, and were also affecting the ovulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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