백합(Lilium longiflorum)으로부터 수집한 화분에 대하여 기내배양, Agrobacterium 및 vacuum infiltration과정을 이용한 형질전환 그리고 kanamycin배지에서의 선별배양을 통하여 PCR에 의하여 증폭된 1.7 kb의 human tissue plasminogen activator(tPA) cDNA의 발현을 분석하였다. 16시간 정도 배양한 신장화분관의 western blotting결과, human standard와 유사한 크기로의 발현을 확인하였다. 이로써 백합화분은 신속한 단백질발현의 분석을 위한 일회성 생산숙주로서의 가능성을 제시하고 있다.
Transient uidA expression was used to optimize parameters required for biolistic transformation of suspension cells of Easter lily, Lilium longiflourm. Maximum uidA expression occurred following bombardment with gold particles as compared to tungsten. A 3hr pre-treatment of suspension cells with 0.125M osmoticum resulted in a 1.5X increase in uidA expression. A helium pressure of 1550 psi combined with a particle travelling distance of 6cm resulted in maximum uidA expression as compared to either 1100, 1200, or 1800 psi. Transient transformation resulted in up to 493 uidA expressing cells/Petri plate. For stable transformation suspension cells of Lilium longiflorum, were co-bombarded with plasmid DNA containing cucumber mosaic virus (CMV) replicase under the rice actin (Act1) promoter and either the bar or PAT genes under the cauliflower mosaic virus (CaMV 355) promoter. Ten regenerated plants contained the transgene as analyzed by PCR, and two of the ten plants were confirmed to contain the transgene by Southern hybridization. The two transgenic plants were independent transformants, one containing the bar gene and the other both the CMV replicase and bar genes. Plants were sprayed at the rosette stage and found to be resistant to 1000 mg/L of phosphinothricin (Trade name-Ignite) indicating expression of the bar gene throughout the leaves when bar was under control of the CaMV 35S promoter.
본 실험에서 Lilium oriental hybrid 'Casa Blanca'. asiatic hybrid 'Mona'와 longiflorum hybrid 'Hinomoto'의 기내 인편으로부터의 자구 형성 및 비대를 위해 MS 배지 내 무기물 농도를 0.5∼2배로, 배지 내 총 질소 농도를 30∼120 mM로 달리하여 자구 형성과 생장을 조사한 결과 인편으로부터의 자구 형성수는 0.5와 1배의 MS 배지 무기물 농도 또는 30 mM의 총 질소 농도에서 'Mona' 품종이 다른 품종에 비해 가장 많았다. 'Casa Blanca'와 'Hinomoto'에서는 0.5배 MS 무기물 농도 또는 30 mM의 질소 농도가 자구 형성에 가장 효과적이었다. 자구 비대는 2배 MS 무기물 농도 또는 120 mM 총질소 농도에서 3품종 모두 양호하였다.
Ji-Eun Eom;Gun-Dong Kim;Young In Kim;Kyung min Lim;Ju Hye Song;Yiseul Kim;Hyeon-Ji Song;Dong-Uk Shin;Eun Yeong Lim;Ha-Jung Kim;Sung Hoon Kim;Deuk Sik Lee;So-Young Lee;Hee Soon Shin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권5호
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pp.634-643
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2023
Chronic obstructive pulmonary disease (COPD), one of the leading causes of death worldwide, is caused by repeated exposure to harmful matter, such as cigarette smoke. Although Lilium longiflorum Thunb (LLT) has anti-inflammatory effects, there is no report on the fermented LLT bulb extract regulating lung inflammation in COPD. Thus, we investigated the protective effect of LLT bulb extract fermented with Lactobacillus acidophilus 803 in COPD mouse models induced by cigarette smoke extract (CSE) and porcine pancreas elastase (PPE). Oral administration of the fermented product (LS803) suppressed the production of inflammatory mediators and the infiltration of immune cells involving neutrophils and macrophages, resulting in protective effects against lung damage. In addition, LS803 inhibited CSE- and LPS-induced IL-6 and IL-8 production in airway epithelial H292 cells as well as suppressed PMA-induced formation of neutrophil extracellular traps in HL-60 cells. In particular, LS803 significantly repressed the elevated IL-6 and MIP-2 production after CSE and LPS stimulation by suppressing the activity of the nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B (NFκB) in mouse peritoneal macrophages. Therefore, our results suggest that the fermented product LS803 is effective in preventing and alleviating lung inflammation.
백합과 화훼작물의 품종구분을 위하여 RAPD 방법이 사용되어졌다. Operon사에서 구입한 10개의 10-mer random primer를 이용한 RAPD 실험결과 모두 107개의 밴드가 관찰되었고, 관찰된 밴드는 300bp 에서 2kb의 범위에 속했으며, 같은 계통 내에서는 동일한 밴드양상을 나타내었다. 그러나 Casa Blanca와 Adelina는 동일계통 내 다른 품종들과 다른 밴드 양상을 보였다. L. longiflorum내의 품종들은 서로 다른 밴드 양상을 나타내었다. Random primers, OPA-02, 03, 04, 14, 16 그리고 17로 형성된 DNA 밴드들은 Lilium의 서로 다른 cultivar와 hybrid를 구분하는 marker로도 이용이 가능하리라 생각된다.
진한 붉은색을 띤 'Tiny Ghost'를 교배모본으로 Oriental group, Longiflorum group 및 Martagon group을 부본으로 하여 효율적인 종간잡종 생산과 상품성 있는 신품종을 획득하고자 실험을 수행하였다. 개화당일 채취한 화분의 발아율은 Oriental hybrid인 'Sorbonne'이 64%로 가장 높았다. 주두수분법과 화주 절단수분법을 이용하여 수분한 결과, 'Aktiva'를 부본으로 사용한 경우를 제외하고 모두 주두수분법을 사용한 교배에서 자방이 생성되었다. 또한 Longiflorum group인 'Norina'와 'Gelria' 중 화분발아율이 높은 'Norina' 가 모두 수정에 실패하여 같은 group 내에서도 종간의 유전적 친화성에 따라 수정률이 달랐다. 'Aktiva'를 부본으로 한 교배에서 1개의 embryo sac을 적출하여 1개의 구를 생성하였으며, 'Sorbonne'을 부본으로 한 교배에서는 4개의 ovule을 치상하여 1개의 구를 얻었다. 'Gelria'를 부본으로 한 교배에서는 1개의 자방에서 embryo 5개, embryo sac 15개, ovule 7개를 얻었으며 그 중 18개체가 발아하여 66.7%의 발아율을 나타내었다. Martagon group인 L. hansonii를 부본으로 한 교배에서는 5개의 ovule을 얻어 그 중 40%가 발아하였다.
근연수분인 (L. longiflorum 'Gelria'${\times}$L. ${\times}$formolongi 'Raizan')의 경우 주두수분에서 종자형성 삭과율은 93%이고 삭과당 평균 종자수는 71개였다 화주절단수분시에는 종자형성 삭과율이 53%이고 삭과당 평균 종자수는 22개로 적었다. (L. longiflorum 'Gelria'${\times}$L. ${\times}$formolongi 'Raizan')의 경우 주두수분에서 종자형성 삭과율이 47%이고 삭과당 평균 종자수는 311개를 얻었다. 그러나 화주절단수분에서는 종자형성 삭과율이 47%이고 삭과당 평균 종자수는 34개로 주두수분에 비해 11%밖에 미치지 못했다. (L. longiflorum 'Raizan'${\times}$L. ${\times}$formolongi 'Como')의 경우 주두수분은 종자형성 삭과율이 40%이고 삭과당 종자수가 14개인 반면 화주절단수분에서는 종자형성이 이루어지지 않았다. [(L. longiflorum 'Lorina'${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Chicago') ${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Chicago']의 여교잡에서 화주절단수분된 15개체 중에서 9개의 성숙삭과를 얻어 삭과 형성율은 60%,배형성 삭과수는 53%,삭과당 평균배수는 14개였다. 그러나 [(L. longiflorum 'Lorina'${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Chicago')${\times}$L. longiflorum 'Lorina']와 [L. longiflorum 'Lorina'${\times}$(L. longiflorum 'Lorina'${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Chicago')]의 교잡은 전혀 삭과가 형성되지 않았다. 또한 [(L. longiflorum 'Lorina'Lorina'L. Asiatic hyhbrid 'Corsica') ${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Corsica']의 경우도 수분된 15개체 중에서 삭과 형성률은 80.0%,배형성 삭과수는 67%,삭과당 평균배수는 11개였다. 하지만 [(L. longiflorum 'Lorina'${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Corsica')${\times}$L. longiflorum 'Lorina']와 나팔백합에 종간잡종을 교잡한 [L. longiflorum 'Lorina'${\times}$(L longiflorum 'Lorina${\times}$L. Asiatic hyhbrid 'Corsica')]의 교잡은 전혀 삭과가 형성되지 않았다. 이 결과는 종간 교잡종을 자방친으로 하고 그 자방친의 화분친을 사용할 때만 교잡이 이루어지고 있음을 나타내고 있다. 따라서 여교잡을 통한 종간잡종 품종육성 활용방안을 금후 적극 확대 검토해야 할 것이다
Some morphological character were surveyed and PR-proteinases were induced and characterized from Lilium formosanum Wallace endeimc to Cheju island . Its flower characters were similar to those of white trumpet lilies(Lilium longiflorum Thunb) although its flowering period was later than that of white trumpet lilies and it hadd a wide range of variation among individuals. Six PR-proteinases(II-2, III-1, III-2, IV-1, IV-2 and V) were induced from bulbs by 2.5mM salicylic acid and almost excreted into the intercellular spaces. These PR-proteinases were strongly activated by Ca 2+, , whereas they were strongly inhibited by Cu2+ Co2+ and Fe2+ . Three PR proteinases(II-2, IV-1 and IV-2) were strongly inhibited by 1, 10 -phenanthroline, indicating that these enzymes are metallo-proteinases. Three PR-proteinases(III-1, III-2 and V) had a high sensitivity to PMSF and required $\beta$-mercaptoethanol for their activities. These results indicate that these proteinases are cysteine proteinases.
B. N. Chung;Lee, E. J.;J. A. Jung;Kim, H. R.;Park, G. S.;Kim, J. S.
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.107.2-108
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2003
Viral disease symptoms were investigated in the field grown Longiflorum hybrid cultivars, and the damages caused by infection with Lily mottle virus (LMoV) and Cucumber mosaic virus (CMV) were assessed by comparing growth of plants produced from seeds of Longiflorum hybrid cultivar both infected by artificial inoculation and free from infection with theses viruses. Dominant symptom caused by spotaneous infection with LMoV and CMV in the field was mottle combined with chlorotic stripe on leaves. LMoV developed brownish necrotic lesion on floral leaves. The incidence of viral disease by mixed infection with LMoV, CMV or Lily symptomless virus (LSV) in the filed grown Longiflorum hybrid cultivar, cultivated for more than 6 years, was 80 to 84 percent. In comparison with virus-free plants, plants doubly infected with CMV and LMoV by artificial inoculation decreased stem length by 14 percent and fresh weight by 38 percent. In conclusion, flower quality and the stem length of Longiflorum hybrid cultivar were affected by LMoV and CMV infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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