Studies on the optimum conditions for dextran production and the properties of dextransucrase (DS) were performed with Leuconostoc mesenteroides from Sikhae and Leuconostoc mesenteroides NRRL B-512(F). Dextransucrases were partially purified by lyophilization of the culture supernatant and subsequent gel chromatography on Bio-Gel A-5(m). The storage stabilities of Sikhae DS and B-512(F) DS were decreaed by the addition of dextranase. The optimum conditions for the enzyme stability were pH 5 and below $30^{\circ}C$. The B-512(F) DS lost the activity at pH 4, while Sikhae DS had 30% of the activity at the same pH. The activity of DS was decreased by EDTA. confirming the metalloprotein character of the enzymes, and was restored by the addition of calcium ions. Concanavalin A completely removed the activity of DSs, confirming the glycoprotein character of the enzymes.
Studies on the changes in rheological properties, molecular weight distribution and dextran yield after being reacted in lO%(w/w) sucrose concentration were performed with crude dextransucrase produced from Leuconostoc mesenteroides isolated from Sikhae. The reaction rate of dextran formation was monitored by sugar analysis with HPLC and by the changes in apparent viscosity. According to the periodate oxidation test, the dextran produced in this experiment was estimated to have 89% $\alpha$-(1->6) main linkages and 11% $\alpha$-(1->) side linkages. The rheological properties of the dextran solution formed changed with reaction time, and it was related to the changes in molecular weight distribution of dextran as determined by GPC analysis. As the reaction proceeded, the rheological behavior changed from Newtonian to non-Newtonian, showing Binghampseudoplastic and thixothropic flow behavior. The apparent viscosity of dextran formed solution increased with increasing reaction time, reached a maximum value of 2680 cP ($\gamma$=$33.75s^{-1}$, $25^{\circ}C$) by enzyme reaction for 8 hours, and then decreased. The temperature dependency of dextran formed solutions was well expressed by the Arrhenius equation and the activation energy reached a maximum value of 1.69 kcal/mole by enzyme reaction for 8 hours.
Eun-Yeong Bae;Gi-Un Cho;Ji-Hye Kim;Sung-Keun Jung;Young-Je Cho;Byung-Oh Kim
Journal of Life Science
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v.33
no.4
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pp.334-342
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2023
Forty species of lactic acid bacteria isolated from gajami sikhae were identified as Lactobacillus plantarum, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus brevis, and Weissella paramesenteroides. 10 of the 40 strains were selected and used for the test. In this study, experiments such as those using acid and artificial gastric juice resistance, bile acid resistance, autoaggregation, coaggregation, and cell surface hydrophobicity were conducted to utilize lactic acid bacteria separated from gajami sikhae as probiotics. The separated lactic acid strains showed high survival rates through displaying resistance to acidic and artificial gastric juices; L. plantarum GS11 showed the best resistance. Also, as a result of a measurement of bile acid resistance, all lactic acid bacteria stocks showed survival of more than 100% with a probiotic number of 108 to 109 log CFU/ml. After evaluating cohesion to indirectly measure cell surface adhesion, autoaggregation ability was shown to be more than 46%. Measurement of xylene adhesion for cell surface hydrophobicity evaluation revealed better cell adhesion than B. subtilis, which has 32.2% hydrophobicity in isolated lactic acid strains. Antibacterial force measurement found antibacterial activity in lactic acid bacteria, excluding L. plantarum GS12 and L. plantarum GS13. Therefore, it was judged that lactic acid bacteria separated from gajami sikhae could be used as probiotics with various probiotic properties.
Eun-Yeong Bae;Gi-Un Cho;Sung-Keun Jung;Young-Je Cho;Byung-Oh Kim
Journal of Life Science
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v.33
no.3
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pp.260-267
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2023
Helicobacter pylori infects the mucosa, induces chronic inflammation and ulcers, and is known as a biological carcinogen. Antibiotics are used as therapeutic agents for H. pylori, but there are problems such as resistance. Thus, research is being conducted on the use of lactic acid bacteria (LAB) as an alternative therapeutic agent. There have been many studies on LAB related to kimchi. However, studies related to Gajami Sikhae, a traditional fermented seafood in Korea, are insufficient. In this study, we investigated the inhibitory effect of LAB isolated from Gajami Sikhae on H. pylori and its use as a probiotic. Forty species of LAB isolated from Gajami Sikhae were identified as Lactobacillus plantarum, Lactobacillus brevis, Leuconostoc mesenteroides, and Weisella paramesenteroides, and 10 strains of 40 species were selected through liquid inhibition assay of H. pylori. The selected LAB supernatant at 1%, 5%, and 10% had a growth inhibitory effect on H. pylori 52, 51, e-53, and 309. The adjusted pH of 7.0 was used for the LAB culture supernatant, in reference to a study that the growth of H. pylori is affected by acid. All 10 strains of LAB at 5% and 10% concentration suppressed the growth of H. pylori 52, and 7 strains of LAB at 10% concentration suppressed the growth of H. pylori e-53. LAB also had the effect of suppressing the activity of urease. Finally, LAB isolated from Gajami Sikhae is expected to be useful for eradicating and preventing H. pylori.
Lactic acid bacteria are widely known to prevent and treat intestinal health conditions, heart disease, depression, and obesity. In Korea, such bacteria are commonly consumed through various fermented foods, although most are isolated from kimchi, and research on the lactic acid bacteria in fermented seafood is insufficient. This study was therefore conducted to observe changes in bacterial flora according to the culture date of lactic acid bacteria in the fermentation of traditional Korean Gajami Sikhae produced in Pohang and to isolate the bacteria of probiotic value. The bacteria were periodically isolated and identified from date of preparation to 50 days after preparation to investigate which Lactobacillus are involved in Gajami Sikhae. As fermentation progressed, it was confirmed that Pediococcus sp. and Lactobacillus sp. participate predominantly in the early and later periods of fermentation, respectively. During the entire fermentation period, 170 isolates were screened, and the following five species were found to be involved: Pediococcus pentosaceus, Pediococcus inopinatus, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus brevis, and Lactobacillus plantarum. Five strains of these species were selected through acid and bile tolerance tests, and their coaggregation, autoaggregation, hydrophobicity, antibacterial, and antioxidant activities were then evaluated. As a result, it is thought that L. brevis GS1022, which has excellent digestive fluid resistance, and P. inopinatus GS316, which has excellent cohesiveness, may be useful as probiotic strains.
The effect of different compositions of organic acids on the flavor profile of 10% sugar solution was investigated by the response surface methodology, and the results were used to evaluate the flavor characteristics of lactic acid fermented cereal beverages. A mixture of extruded rice flour (10%) and soymilk (7.8% dry matter) was fermented with Leuconostoc mesenteroides (Sikhae). Depending on the substrate pretreatments, for example, the malt or amylase digestion and the proteolytic enzyme hydrolysis, the sugar and organic acid composition of the product varied. The organic acid composition of the fermented beverages was in the ranges of 0.44-0.55% lactic acid, 0.05-0.09% acetic acid and 0.07-0.09% citric acid, while that of commercial apple juice was 1.59% malic acid and 0.49% acetic acid. The flavor profiles of fermented beverages added with 10% sucrose were compared to those of apple juice and a model mixture containing 0.48% citric acid, 0.39% lactic acid and 0.12% acetic acid in 10% sugar solution. The QDA diagram of fermented beverages approached to that of apple juice, when the substrate was digested by amylase but not by protease.
This study investigated the probiotic properties and physiological activities of Korean fermented foods such as sikhae, young radish kimchi, and bean-curd dregs. Among the isolated lactic acid bacteria, Pediococcus inopinatus BZ4, Lactobacillus plantarum SH1, Lactobacillus brevis SH14, Pediococcus pentosaceus YMT1, and Leuconostoc mesenteroides YMT6 demonstrated a greater than 60% survival rate at pH 2.5, along with an excellent survival rate even at 0.3% bile acid. These five bacteria showed strong flocculation ability in autoaggregation and coaggregation tests, indirectly clustering useful micro-organisms and inhibiting the attachment of pathogenic bacteria. In a cell surface hydrophobicity test, these bacteria showed adhesion to three solvents (ethyl acetate, chloroform, and xylene) and high hydrophobicity, thereby indicating excellent indirect cell adhesion to intestinal cells. The cell-free supernatants and intracellular extracts of the five lactic acid bacteria showed antioxidative activity in the form of 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl and 2,2'-Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical scavenging ability and lipid peroxidation inhibition. Antimicrobial activities were also observed in four pathogenic bacteria, namely E. coli KCTC 2571, H. pylori HPKCTC B0150, L. monocytogenes KCTC 13064, and S. aureus KCTC 1916. These results demonstrate that these five lactic acid bacteria could be used as probiotics with antioxidant and antimicrobial properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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