• 제목/요약/키워드: Leucine

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사람 암세포주들에서 아미노산 수송체 LAT1 mRNA 발현과 아미노산 L - Leucine 수송의 상관관계 (Correlation Between the Expression of Amino Acid Transporter LAT1 mRNA and the Amount of L - Leucine Transport in Human Cancer Cell Lines)

  • 김도경;송수근;김인진;국중기
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권9호
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    • pp.1451-1456
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    • 2004
  • 사람의 여러 암세포주들에서 아미노산 수송체 LAT1 및 그 보조인자 4F2hc mRNA의 발현과 LAT1의 대표적 기질인 L-leucine 수송을 조사하여 이들 사이의 상관관계를 밝히기 위해, 암세포주들에서 northern blot analysis 및 uptake 실험 등을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 조사한 26 종류의 사람 암 유래 세포주들에서 LAT1 mRNA의 뚜렷한 발현을 확인할 수 있었으나 그 발현양에는 차이가 있었다. 조사한 26종류의 사람 암 유래 세포주들에서 4F2hc mRNA의 뚜렷한 발현을 확인할 수 있었으며, LAT1의 경우에서와 같이 발현하는 정도가 조금씩 다름을 확인할 수 있었다. 사람의 암 유래 세포주들에서 아미노산 transporter에 의한 L-[$^{14}C$]leucine 수송을 확인할 수 있었다. 사람의 암세포주들에서 LAT1 mRNA의 발현정도가 높을수록 L-[$^{14}C$]leucine의 수송능력이 증가함을 알 수 있었다. 사람의 암세포주들에서 4F2hc mRNA의 발현정도가 높을수록 L-[$^{14}C$]leucine 수송 능력이 증가하는 경향은 보였으나, 통계적인 유의성은 없었다. 본 연구의 결과에 의해 사람 암세포주들에서 아미노산 transporter LAT1의 발현과 아미노산 L-leucine의 수송 사이와의 상관관계를 확인할 수 있었으며, 아미노산 transporter LAT1의 특이적 억제에 의한 암세포의 성장 억제에 관한 또 하나의 방향성을 제시할 수 있을 것으로 사료된다.

Bacillus sp. N2 유래 leucine aminopeptidase의 가수분해활성에 대한 NaCl의 영향 (Effect of NaCl on Hydrolytic Activity of Leucine Aminopeptidase from Bacillus sp. N2)

  • 정동민;이강덕;전성식;정영철;전효곤
    • 생명과학회지
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    • 제21권5호
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    • pp.761-765
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    • 2011
  • 효소의 염에 대한 안정성은 식품산업 응용에 있어서 중요한 인자이다. 이전에, leucine aminopeptidase (LAP)은 Bacillus sp. N2에서 정제되었다. 본 연구에서는, LAP효소의 염 효과에 관한 연구를 수행했다. LAP은 고농도의 NaCl (4 M)에서 L-leucine-${\rho}$-nitroanilide의 가수분해활성을 가지고 있지만, 다른 중성 염들(LiBr, LiCl, NaBr, KBr, KCl)에서는 활성이 없었다. 그 효소는 0-4 M NaCl 농도에서 C-말단 Xaa쪽에 소수성 아미노산과 친수성 아미노산을 가진 여러 di-peptide 합성 기질들을 가수분해하였는데, 이러한 결과는 LAP의 가수분해성은 기질의 Scissile bond에 있는 아미노산 사이드 체인의 소수성과는 관련이 없다라는 것을 의미한다. 또한, LAP의 가수분해활성은 4.5 M NaCl 농도에서 다른 LAP와 Aminopeptidase의 활성 보다 1-3배가 높다라는 것을 보여주었다. 이러한 결과들은 NaCl에 내성을 지닌 LAP을 치즈와 멸치 젓갈과 같은 식품 산업에 응용될 수 있다는 것을 보여준다.

Leucine의 섭취가 고지방 식이를 섭취한 흰쥐의 체중 감소에 미치는 영향 (Effect of Leucine Intake on Body Weight Reduction in Rats Fed High Fat Diet)

  • 박훈정;이은주;김주희;김지연;권오란;김미경
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제42권8호
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    • pp.714-722
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    • 2009
  • The principal objective of this study was to determine the effects of leucine on body weight reduction in high fat diet-induced overweight rats. To induce overweight, six-month-old male Sprague-Dawley rats (n = 80) were divided into 8 groups; one group of 10 rats was fed on a normal fat diet and the remaining 70 rats were fed on a high-fat diet (40% of energy as fat) for 14 weeks. Then, 10 rats fed on the normal fat diet and another 10 rats fed on the high fat diet were sacrificed to identify overweight induction. The remaining 60 rats were divided randomly into 6 groups according to body weight and fed on one of the diets with different dietary fat levels (9.6% or 40% of energy as fat) and leucine levels (0, 0.6 or 1.2 g/kg BW) for the following 5 weeks of experiments. The body weight loss in the Leu-administered groups (0.6 g, 1.2 g/kg BW) was significantly higher than those of Leu non-administered groups. The perirenal fat pad weights in the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. Of the hepatic enzymes, glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) activities were reduced significantly in the Leu-administered groups than in the Leu non-administered groups. With the oral glucose tolerance test (OGTT), the incremental areas under the curve of the glucose response (IAUC) of the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. The fasting glucose concentration and HOMA-IR of the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. In conclusion, the results of this study suggest that one of the possible mechanisms of leucine in the observed body weight reduction might involve the inhibition of lipogenic enzyme activities such as glucose-6-phosphate dehydrogenase, rather than the activation of lipolysis enzymes. Additionally, leucine adminstration resulted in improved glucose metabolism.

Corynebacterium glutamicum 아미노산 유사체 저항성 돌연변이 균주에 의한 L-로이신의 생산 (L-Leucine Production using Amino Acid Analogues-resistant Mutants of Corynebacterium glutamicum)

  • 김용욱;신현철;성진석;전영중;고중환;이재흥
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.45-49
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    • 1998
  • Corynebacterium glutamicum ATCC13032를 모균주로 한 아미노산 유사체들에 저항성을 지닌 돌연변이 균주들로부터 두 종류의 L-로이신 생산균주를 개발하였다. 그 중 하나인 C. glutamicum LT26은 4-azaleucine과 $\alpha$-amino-$eta$-hydroxyvaleric acid에 저항성을 지니는 균주이며, 다른 한 균주는 C. glutamicum LT3811-70로서 C. glutamicum LT26을 모균주로한 DL-4-tiaisoleucine 저항성 돌연변이 균주이다. 이들 두 돌연변이 균주들의 배양액내에서의 L-로이신의 축적은 이들이 비영양요구성 균주임에도 불구하고 모균주보다 획기적으로 높았으며 이를 해명하고자 L-이소로이신과 L-발린 그리고 L-로이신 생합성 과정의 주반응 효소인 $\alpha$-acetohydroxy acid synthase(AHAS)와 $\alpha$-isopropylmalate synthase(IPMS)의 분석을 수행하였다. C. glutamicum LT26과 LT3811-70에서 AHAS와 IPMS는 모두 L-로이신에 대해 효소활성저해와 효소합성저해가 거의 해제되었고, C. glutamicum LT3811-70 균주의 경우 모균주인 C. glutamicum LT26 균주보다 IPMS의 L-로이신에 대해 효소 합성저해가, AHAS는 L-이소로이신과 L-발린등에 대해 효소활성저해가 10% 이상 더 해제되었음을 알 수 있었다.

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Effects of dietary leucine supplementation on the hepatic mitochondrial biogenesis and energy metabolism in normal birth weight and intrauterine growth-retarded weanling piglets

  • Su, Weipeng;Xu, Wen;Zhang, Hao;Ying, Zhixiong;Zhou, Le;Zhang, Lili;Wang, Tian
    • Nutrition Research and Practice
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    • 제11권2호
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    • pp.121-129
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    • 2017
  • BACKGROUND/OBJECTIVES: The study was conducted to evaluate the effects of dietary leucine supplementation on mitochondrial biogenesis and energy metabolism in the liver of normal birth weight (NBW) and intrauterine growth-retarded (IUGR) weanling piglets. MATERIALS/METHODS: A total of sixteen pairs of NBW and IUGR piglets from sixteen sows were selected according to their birth weight. At postnatal day 14, all piglets were weaned and fed either a control diet or a leucine-supplemented diet for 21 d. Thereafter, a $2{\times}2$ factorial experimental design was used. Each treatment consisted of eight replications with one piglet per replication. RESULTS: Compared with NBW piglets, IUGR piglets had a decreased (P < 0.05) hepatic adenosine triphosphate (ATP) content. Also, IUGR piglets exhibited reductions (P < 0.05) in the activities of hepatic mitochondrial pyruvate dehydrogenase (PDH), citrate synthase (CS), ${\alpha}$-ketoglutarate dehydrogenase (${\alpha}$-KGDH), malate dehydrogenase (MDH), and complexes I and V, along with decreases (P < 0.05) in the concentration of mitochondrial DNA (mtDNA) and the protein expression of hepatic peroxisome proliferator-activated receptor-${\gamma}$ coactivator $1{\alpha}$ (PGC-$1{\alpha}$). Dietary leucine supplementation increased (P < 0.05) the content of ATP, and the activities of CS, ${\alpha}$-KGDH, MDH, and complex V in the liver of piglets. Furthermore, compared to those fed a control diet, piglets given a leucine-supplemented diet exhibited increases (P < 0.05) in the mtDNA content and in the mRNA expressions of sirtuin 1, PGC-$1{\alpha}$, nuclear respiratory factor 1, mitochondrial transcription factor A, and ATP synthase, $H^+$ transporting, mitochondrial F1 complex, ${\beta}$ polypeptide in liver. CONCLUSIONS: Dietary leucine supplementation may exert beneficial effects on mitochondrial biogenesis and energy metabolism in NBW and IUGR weanling piglets.

Leucine zipper도메인의 융합에 의한 바이오시밀러 레미케이드 Single-chain Fv 항체의 항원 결합력 개선 (The Improved Antigen-binding Activity of Biosimilar Remicade ScFv Antibodies by Fusion of the Leucine Zipper Domain)

  • 김진규;김태환
    • 생명과학회지
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    • 제30권11호
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    • pp.1012-1020
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    • 2020
  • 생쥐의 가변부위가 인간의 정상부위에 연결되어 제조된 바이오시밀러 자연항체치료제인 레미케이드는 암괴사인자-알파(TNF-α)에 특이적인 항체로써 카이메릭 단일클론항체이며 류마티스 관절염치료를 위해 개발되었다. 바이오시밀러 레미케이드 항체의 생물학적 기능을 연구하기 위해 우리는 단백질 데이터 은행을 이용한 생물정보학 분석을 수행하여 레미케이드 자연항체와 암괴사인자-알파 항원간의 결합기작특징을 분석하였다. 자연항체를 생산하는 세포의 유전적 불안정성 때문에 레미케이드 항체생산이 제한되므로 우리는 중 사슬 가변부위를 다중펩타이드 링커에 의해 경 사슬 가변부위에 연결된 레미케이드 ScFv항체(Remicade)를 제조하였다. 더욱이 더 높은 생산과 더 높은 항원결합력을 위해 레미케이드 ScFv를 leucine zipper에 융합시켰다. Remicade와 RemicadeScZip ScFv는 대장균에서 발현되었고 Ni+-NTA-아가로스 컬럼으로 정제하였다. 정제된 단백질들은 예상한대로 sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide electrophoresis에서 28.80 kDa과 33.96 kDa을 나타내었다. Remicade는 ELISA, western blot에서 TNF-α 항원에 대한 결합력이 관찰되지 않았으나 RemicadeScZip은 항원결합력을 나타내었다. 추가적인 BLI분석으로 RemicadeScZip의 TNF-α 항원에 대한 결합력을 재확인시켜주었으며 이 결과는 Leucine zipper가 레미케이드 ScFv의 접힘을 안정화시키고 TNF-α 항원에 대한 결합력을 개선시켰음을 제시해주고 있다.

Homeodomain-leucine Zipper Proteins Interact with a Plant Homologue of the Transcriptional Co-activator Multiprotein Bridging Factor 1

  • Zanetti, Maria Eugenia;Chan, Raquel L.;Godoy, Andrea V.;Gonzalez, Daniel H.;Casalongue, Claudia A.
    • BMB Reports
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    • 제37권3호
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    • pp.320-334
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    • 2004
  • StMBF1 (Solanum tuberosum multiprotein bridging factor 1) is a plant member of the MBF1 family of transcriptional co-activators. In an attempt to understand the role of StMBF1, we analyzed its interaction with plant transcription factors of the homeodomain-leucine zipper (Hd-Zip) family, a group of proteins with a typical leucine zipper motif adjacent to a homeodomain. StMBF1 is able to interact in vitro with the Hd-Zip protein Hahb-4 both in the presence and absence of DNA. Upon binding, StMBF1 increases the DNA binding affinity of Hahb-4, and of another plant homeodomain containing protein from the GL2/Hd-Zip IV family, HAHR-1. The biological role of interactions is discussed in this paper.

Dietary Manipulation of Lean Tissue Deposition in Broiler Chickens

  • Choct, M.;Naylor, A.J.;Oddy, V.H.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제18권5호
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    • pp.692-698
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    • 2005
  • Two experiments were conducted to examine the effect of graded levels of dietary chromium and leucine, and different fat sources on performance and body composition of broiler chickens. The results showed that chromium picolinate at 0.5 ppm significantly (p<0.05) lowered the carcass fat level. Gut weight and carcass water content were increased as a result of chromium treatment. Body weight, plucked weight, carcass weight, abdominal fat pad weight, breast yield and feed efficiency were unaffected by chromium treatment. Leucine did not interact with chromium to effect lean growth. Dietary leucine above the recommended maintenance level (1.2% of diet) markedly (p<0.001) reduced the breast muscle yield. The addition of fish oil to broiler diets reduced (p<0.05) the abdominal fat pad weights compared to birds on linseed diets. Fish oil is believed to improve lean growth through the effects of long chain polyunsaturated fatty acids in lowering the very low-density lipoprotein levels and triglyceride in the blood, in the meantime increasing glucose uptake into the muscle tissue in blood and by minimizing the negative impact of the immune system on protein breakdown. The amount of fat in the diet (2% or 4%) did not affect body composition.

Bacillus amyloliquefaciens에서 분리된 단백질 가수분해 효소의 화학적 수식에 의한 저해양상 분석 (Characterization of Endopeptidase of Bacillus amyloliquefaciens S94 by Chemical Modificationtion)

  • 김종일
    • 미생물학회지
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    • 제39권4호
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    • pp.230-234
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    • 2003
  • Bacillus amyloliquefaciens psychrotrophic strain이 분비하는 세포 외 단백질 가수분해효소를 정제하여, endopeptidase 활성에 관한 특성을 분석하였다. Protease SE910로 명명된 효소는 단백질 내부의 leucine에 연결된 peptide 결합만을 가수분해하는 endopeptidase로 작용한다. 효소를 특이한 아미노산 잔기에 작용하는 화학수식제와 반응하였을 때 효소의 활성부위에 관여하는 아미노산 잔기가 수식되었을 때는 효소활성이 저해를 받는다. 본 효소는 serine을 수식하는 PMSF에의해 endopeptidase 활성이 완전히 저해되었으며, 카르복실 기능기를 수식하는 화학수식제에 의해 저해되었고, lysine을 화학수식하는 PLP에 의해서는 큰 영향을 받지 않았다. 이것은 본 효소의 endopeptidase 활성에 serine과 aspartic acid 잔기가 관여하는 것을 의미한다. 구조적으로 leucine을 포함하는 유도체인 bestatin은 효소의 endopeptidase 활성을 경쟁적으로 저해하였다.