본 연구에서는 야관문 추출물의 마우스 대식세포에 대한 항염증 활성과 창상유발 동물실험 모델을 통한 창상치유 효과를 조사하였다. RAW264.7 세포에서 야관문 추출물은 0.2 mg/mL 이하 농도에서 세포생존에 영향을 주지 않았으며, 염증반응이 활성화된 대식세포에 대해 농도 의존적으로 유의적인 NO 생성 감소를 나타내었다. 창상유발 동물실험 모델에서 야관문 추출물을 함유한 화장품 조성물의 창상치유효과에 대해 육안적으로 관찰한 결과, SCO군과 CCO군보다 야관문 추출물을 함유한 SSP군에서 약 20~30% 빠른 상처면적 감소 효과를 나타내었으며, 반흔 크기 역시 약 12% 작게 형성되었다. 또한 SSP군 조직의 외피와 진피 재생회복속도가 빨라진 것을 Masson's trichrome 염색을 통해 확인할 수 있었으며, VEGF 및 TGF-${\beta}1$ 유전자 발현이 SCO군과 비교 시 각각 감소 및 증가하였다. 이러한 결과는 야관문 추출물이 항염증 및 교원질 생성 유도를 통한 조직재생 활성에 기여하여 창상치유 속도를 가속화하고 반흔 면적을 감소시킬 수 있는 피부 창상치유와 관련한 코스메슈티컬 소재로써 산업적 활용이 가능함을 보여준다.
In order to verify the efficacy of Lespedeza cuneata G. Don which have been used as a folk traditional herb medicine from ancient times, the test of antioxidant activity and the analysis of constituents were carried out. Methanol extracts from L. cuneata G. Don showed a radical scavenging activity corresponding to that of (+)-catechin as positive control at 250 ${\mu}g$/mL (ca 90% inhibition), and inhibited more than 30% of DPPH radical at low concentration of 10${\mu}g$/mL. In the present study, as a fundamental study for the specification of antioxidant components from L. cuneata G. Don, the analysis for constituents for L. cuneata with HPLC was preformed although there was no results to identify functional flavonoids such as quercetin.
야관문의 항산화 활성과 항주름 활성을 조사하기 위하여 30% 에탄올 추출물과 각종 용매 분획물을 이용하여 DPPH 및 ABTS radical 소거활성과 matrix metalloproteinase MMP1과 MMP3 생성억제 효과를 조사하였다. 에탄올 추출물과 각종 용매 분획물 중 에틸아세테이트 분획물에서 페놀 및 플라보노이드 함량이 가장 높았다. 야관문 추출물의 항산화 활성과 피부 주름을 유발하는 MMP1, MMP3의 생성을 억제 효과는 페놀 및 플라보노이드 함량과 높은 상관관계를 보였으며, 페놀과 플라보노이드 함량이 가장 높은 에틸아세테이트 분획물의 항산화 활성과 MMPs 생성 억제 효과가 가장 높았다.
Seong, Joon Seob;Xuan, Song Hua;Park, So Hyun;Lee, Keon Soo;Park, Young Min;Park, Soo Nam
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권11호
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pp.1961-1970
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2017
Lespedeza cuneata G. Don is a traditional herb that has been associated with multiple biological activities. In this study, we investigated the antioxidative/antiaging activities and performed an active component analysis of the non-fermented and fermented (using Lactobacillus pentosus) extracts of Lespedeza cuneata G. Don. The antioxidative activities of the fermented extract were higher than those of non-fermented extracts. The elastase inhibitory activity, inhibitory effects on UV-induced MMP-1 expression, and ability to promote type I procollagen synthesis were investigated in Hs68 human fibroblasts cells. These tests also revealed that the fermented extract had increased antiaging activities compared with the non-fermented extract. A component analysis of the ethyl acetate fractions of non-fermented and fermented extracts was performed using TLC, HPLC, and LC/ESI-MS/MS to observe changes in the components before and after fermentation. Six components that were different before and after fermentation were investigated. It was thought that kaempferol and quercetin were converted from kaempferol glucosides and quercetin glucosides, respectively, via bioconversion with the fermentation strain. These results indicate that the fermented extract of L. cuneata G. Don has potential for use as a natural cosmetic material with antioxidative and antiaging effects.
Although honeybees (Apis mellifera) are crucial for maintenance of the ecosystem, population of honeybee has been steadily decreasing due to diseases including nosemosis. Nosemosis is a disease caused by Nosema ceranae and is now considered as a major threat to honeybees. N. ceranae is a microsporidian that stays in form of spore even before the infection, which makes it harder to control than other pathogens. People are now aware of this parasite, however, cure and preventive candidates for nosemosis are hardly found until today. In this study, in vitro experiment of Lespedeza cuneata treatment to prevent nosemosis were done using Trichoplusia ni cell line, BTI-TN5B1-4. Normal T. ni cells exhibited round shape without abnormal size. On the other hand, when N. ceranae were treated, cells deteriorated and some cells abnormally enlarged due to N. ceranae infection. Interestingly, treatment of T. ni cells with L. cuneate extract protected abnormal cell shape induced by N. ceranae infection to normal shape. Some N. ceranae spores were observed outside of the cells. Effective concentration range for N. ceranae control were experimented. Lowest concentration which can control nosemosis were 50 ㎍/mL. When the concentration of L. cuneata extract was exceeded 200 ㎍/mL, cytotoxicity started to show up.
Quilantang, Norman;Lee, Ju Sung;Yun, Young-Sok;Limbo, Carlo;Yoo, Sang Woo;Lee, Seong;Lee, Sanghyun
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2018년도 춘계학술발표회
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pp.62-62
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2018
Inhibition of aldose reductase (AR) has been shown to prevent the onset and progression of many diabetic complications wherein several AR inhibitors were isolated from plants abundant in polyphenolic compounds. Lespedeza cuneata (Fabaceae), a perennial plant indigenous in East Asian countries, is shown to be abundant in these polyphenolic substances such as flavonoids and tannins. However, there are no studies to date regarding its effects on AR. In this study, the inhibitory activity of the methanol extract and stepwise polarity fractions of Lespedeza cuneata on AR was investigated. The bioactive compounds purified from L. cuneata by repeated column chromatography were also tested for AR inhibition. Results show that the ethyl acetate and n-butanol fractions of L. cuneata exhibited potent inhibition against AR with $IC_{50}$ values of 0.57 and $0.49{\mu}g/mL$, respectively. Further analysis led to the isolation of acacetin (1), afzelin (2), astragalin (3), kaempferol (4), and scutellarein 7-O-glucoside (5). The AR inhibitory effects these five compounds were also determined in which compounds 2, 3, and 5 showed potent AR inhibitory effects with $IC_{50}$ values of 2.20, 1.91, and $12.87{\mu}M$, respectively. Quantitative analysis of astragalin (3) by HPLC-UV was also performed in the leaves and roots of L. cuneata (0.626 and 0.671 mg/g, respectively). This study reports that the flavonoids isolated from L. cuneata show promising AR inhibitory activities which can be further developed as natural therapies for treating and managing diabetic complications.
본 연구에서는 야관문 에탄올 추출물의 인체 대장암세포 성장억제 효능 및 그 기전을 연구하였다. 야관문 에탄올 추출물을 0, 200, 400, $600{\mu}g/mL$ 농도로 48시간 처리하여 암세포 증식억제 효과를 측정한 결과 농도 의존적으로 감소하는 것으로 확인하였다. HT-29 세포에 대한 야관문 추출물의 $IC_{50}$ 값은 $554.26{\pm}8.81{\mu}g/mL$로 확인되었다. 또한 야관문 에탄올 추출물을 처리한 HT-29 세포에 대한 세포 성장 억제 기전을 확인한 결과 pro-caspase 3의 발현이 감소함에 따라 PARP의 분절 및 DNA 분절을 확인하고 anti-apoptotic단백질인 Bcl-2를 감소시켰으며 pro-apoptotic 단백질인 Bax의 수준을 증가시키는 것으로 확인하였다. 염증 관련 유전자 $TNF-{\alpha}$, IL-6 그리고 그의 전사인자인 $NF-{\kappa}B$는 야관문 에탄올 추출물 처리농도에 의존적으로 감소하는 것으로 확인하였고 유전자 SIRT1의 발현량도 증가하는 것으로 확인하였다. 그 결과 야관문 에탄올 추출물 처리에 따라서 HT-29의 세포 성장억제가 확인되어 apoptosis를 유도하는 것으로 확인되었고, 이러한 연구 결과는 야관문이 기능성 소재로서 기초적 데이터베이스로 활용될 수 있을 것으로 생각되며 앞으로 더욱더 야관문의 질병에 대한 효능 및 기전연구가 지속하여야 할 것으로 생각된다.
야관문 추출물의 피부재생능력을 알아보고, 창상을 유발한 실험동물 모델에서 창상 치유 효과를 검증하고자 6개 군(NO, CO, PC, LCL, LCM, LCH)으로 나누어 5주간 실험하였다. Elastase 저해 활성을 평가한 결과 LCM군에서 항산화제인 BHA보다 2.7%($52.39{\pm}4.52$ vs $53.88{\pm}1.85$) 낮은 수치를 나타내었으며, collagenase 저해 활성을 평가한 결과 LCM군에서 BHA보다 7%($37.68{\pm}2.91$ vs $35.19{\pm}7.80$) 더 높은 활성을 나타내었다. 창상유발 21일에 LCL군, LCM군 및 LCH군의 왼쪽 창상 면적은 CO군과 비교하여 각각 54.2%, 53.5% 및 48.7% 현저한 창상면적 감소를 보였다. 이로서 야관문 추출물은 피부상피조직의 재생과 교원질의 합성을 도와 외과적 창상에 치료 효과가 있는 것으로 판단된다.
Objective: Production of ROS from glucose toxicity results in injury of pancreatic $\beta$-cells in diabetes models. This study was undertaken to examine the influence of Lespedeza Cuneata extract (LCE) on cytoprotective effects on glucose toxicity, insulin secretion and gene expression in RIN-m5F cells. Methods: First, we measured LCE's antioxidant activity by DPPH free radical-scavenging activity and SOD activity. After the various concentrations of LCE were added to the RIN-m5F cells, we measured cell viability with glucose stimulation by MTT assay and glucose-stimulated insulin secretion. We analyzed gene expression with Agilent whole mouse genome 44K oligo DNA microarray and searched for related pathways in KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes). Lastly we measured INS-1, INS-2, INS-R, IRS-1, IRS-2, IRS-3, GLP-1R, and GLP-2R mRNA expression by real time RT-PCR. Results: Free radical-scavenging activity, SOD activity and insulin secretion increased dependent on LCE concentration, but LCE did not show considerable cytoprotective effect on RIN-m5F cells. More than twice expressed gene was 6362 in Oligo DNA chip. In KEGG, the most related pathway was the metabolic pathway. In the insulin signaling pathway, up expressed genes were Irs1, Mapk8, Akt1, and Lipe and down expressed genes were Rhoq, Fbp2, Prkar2b, Gck, and Prkag1. In real time RT-PCR, IRS-2, and IRS-3 expression increased significantly compared to the control group on LCE $12{\mu}g/m{\ell}$ concentration and GCK expression decreased significantly compared to the control group. Conclusions: These results show that LCE encourages insulin secretion and insulin metabolism by complicated gene mechanisms. Further mechanism study and clinical study seem to be necessary about Lespedeza Cuneata.
전국의 산야에 자생하는 야생 초본의 하나인 비수리(Lespedeza cuneata G.Don)의 천연물 자원으로서의 유용성에 대한 기초자료를 마련하기 위하여 비수리의 물과 에탄올 추출물의 몇 가지 이화학적 특성과 항산화 활성을 측정하고, 비수리 담금주의 결과와 비교하였다. 비수리 추출물의 유리 아미노산은 phosphoethanolamine을 비롯한 22종이 검출되었으며, 백분율 함량은 phosphoethanolamine 20.36>L-proline 18.02>ammonia 14.48>L-aspartic acid 12.96>${\gamma}$-amino-n-butyric acid(GABA) 10.67 % 등의 순서로 측정되었다. 총 플라보노이드와 총 페놀성 화합물의 함량은 담금주>증류수 추출물>에탄올 추출물의 순서로 비교되었다. 항산화 활성으로서 DPPH(1,1'-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 소거능에 기준한 전자 공여능은 담금주가 ascorbic acid의 81.4%로 가장 높았으며, 에탄올 추출물>증류수 추출물의 순서로 측정되었다. 철 환원력(ferric reducing antioxidant power)과 ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 라디칼 소거능은 담금주>증류수 추출물>에탄올 추출물의 순서로서 추출물 중의 플라보노이드와 페놀성 화합물 함량에 비례하였다. 그리고 아질산염 소거능은 전자 공여능의 순서와 같이 담금주>에탄올 추출물>물 추출물의 순서로 비교되었으며, 담금주의 경우 pH 1.2에서 96.6%로서 물 추출물의 2.6배에 해당되는 높은 소거활성으로 측정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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