• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권5호
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• pp.522-530
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• 1994

Bacteriocin-producing lactic acid bacteria, Lactococcus sp. HY 449, was isolated from dairy products. Using response surface methodology, the various concentrations of medium compo- nents (tryptone, glucose, yeast extract, tween 80, and initial pH) were tested to find the optimum conditions for maximum bacteriocin production and growth of Lactococcus sp. HY 449. Central composite design was used to control the concentrations of medium components in the experiment. Bacteriocin production and cell growth of Lactococcus sp. HY 449 were most affected by glucose and yeast extract. Estimated optimum growth conditions of Lactococcus sp. HY 449 were as follows; tryptone 1.08%, glucose 1.129%, yeast extract 0.674%, tween 80 0.11%, and initial pH 7.19. Also estimated optimum conditions for bacteriocin production were tryptone 0.937%, glucose 1.108%, yeast extract 0.163%, tween 80 0.09%, and initial pH 6.98.

• 생명과학회지
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• 제9권1호
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• pp.111-120
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• 1999

우리 고유의 전통 발효 음식인 김치로부터 bacteriocin 생성능이 우수한 Lactococcus sp. J-105균주를 분리하였다. Lactococcus sp. J-105의 생육 및 bacteriocin 생성에 대한 최적 조건을 검토한 결과 bacteriocin 생성은 대수 증식기 말기에서 정지기 초기에 가장 많이 생성되었다. Lactococcus sp. J-105의 생육 및 bacteriocin 생성 최적 탄소원 및 질소원은 각각 maltose와 polypeptone이었다. 균의 생육 및 bacteriocin 생성 최적 온도는 $25^{\circ}C$였으며 생육 최적 pH는 pH 8 부근이었다. bacteriocin 생성 또한 pH 8에서 최고를 나타내었다. 한편 NaCl은 오히려 균체 증식과 bac-tericoin 생성을 저해하였다. Lactococcus sp. J-105가 생산하는 bacteriocin의 pH 및 열에 대한 안정성을 검토한 결과 pH 2~4, $121^{\circ}C$ 15분에서 각각 안정하였다. 또한 J-105의 항균 spectrum을 검토한 결과 Lactobacillus sp. Leuconostoc s 그리고 Bacillus subtilis 등의 Gram 양성균에 대해서 항균활성 나타내었으며 Gram 음성균인 Acetobacter acid에 대해서도 항균 활성을 나타내었으나 E. coli에 대해서는 항균 활성을 나타내지 않았다. 본 bacteriocin은 trypsin, protease와 같은 peptide 분해효소에 대해서는 안정한 반면, pepsin에 의해서는 활성이 상실되는 특이한 성질을 나타내었다

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권3호
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• pp.259-265
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• 1994

A bacteriocin-producing lactic acid bacteria was isolated from contaminated milk products, which was identified by using the API50 CH kit as Lactococcus lactis subsp. lactis with reliability of 98%. Fatty and analysia of the cell membrane showed that this strain contained same fatty acids profiles as type strain, Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 19435. The bacteriocin of Lactococcus sp. HY 449 showed relatively wide range of inhibition spectrum against gram positive and some gram negative bacteria such as Escherichia coli and maintained the inhibitory activity between pH2.0 and pH9.0 The thermostability of this bacteriocin was higher in acidic solution than in distilled water and was stable at 60$\circ $C for 1 hour.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제6권1호
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• pp.27-33
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• 2003

A lactic acid bacterium showing antimicrobial activity against fish pathogen was isolated from gastrointestinal tract of flounder for the purpose of use as an aquaculture probiotics. From the analysis of morphological and physiological characteristics, the isolated strain was named as Lactococcus sp. HM58. Antimicrobial substance (AMS) from Lactococcus sp. HM58 showed strong growth inhibitory activity against Streptococcus sp., which is a fish pathogenic bacterium. AMS was presumed a proteinaceous compound with stability in heat and wide pH range from 2 to 10. It was started to produce in exponential growth phase and was not produced any more in stationary phase. It showed comparatively broad antimicrobial spectrum against most of gram positive bacteria used for this study. About $84\%$ of Lactococcus sp. HM58 was able to survive in the artificial gastric juice though it was low to the extent in the artificial bile juice. In the sensitivity test for various antibiotics, this strain was highly sensitive for doxycycline, erythromycin, amoxicillin clavu1anic acid and ampicillin.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권3호
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• pp.209-214
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• 1991

Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 bacteriocin을 정제하고 특성을 조사하였다. CM-sephadex ion exchange column chromatography, Sephadex G-50 gel filtration, SDS-PAGE를 행함으로서 수율 16.2 정제도 123배의 단일물질을 얻었다. 이 물질은 열에 비교적 안정하여 $60^{\circ}C$에서 60분간 열처리 할 때 38의 잔존활성을 유지하였으며 알카리쪽에서는 비교적 불안정하여 pH 8.0에서 48시간 처리시 77의 활성을 소실하였다. 이 물질은 26개의 아미노산 잔기를 이루고 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권2호
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• pp.183-189
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• 1992

Bacteriocin 생산균주인 Lactococcus sp. 111-2의 최적 배양조건과 배양 특성을 검토하였다. 탄소원은 glucose 20g/l, 질소원은 casein acid hydrolyzate 15g/l, 무기염류는 sodium acetate 3g/l와 ammonium citrate 2g/l가 bacteriocin 생성에 많은 영향을 주는 것으로 타났으며, 배지 pH는 6.2, 발효온도는 $35^{\circ}C$일 때 높은 생성수율을 보였다. 선발균주는 증식 및 항균물질의 생성에 riboflavin과 pantotheinc acid의 비타민을 요구하였다. 회분식 발효시 항균성물질의 생산패턴은 배양 12시간에 3,894IU/ml로 최대를 나타냈으며 균체생성은 배양 8.5시간에 정상기에 도달하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권3호
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• pp.266-270
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• 1994

A bacteriocin was isolated from the supernatant fluid of M17G broth culture of Lactococcus sp. HY 449 strain, which showed strong inhibitory activity against the growth of selective indicator strain, Lactobacillus fermentum IFO3023. When the bacteriocin wasa added to the growing indicator cells or cell suspensions, viable cells and optical density were density were decreased, indicating bacteriolytic mode of action. Electron microscopic observation of indicator cells treated with bacteriocin revealed apparent damages on the cell surface and eventual lysis of cell walls.

• 생명과학회지
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• 제25권2호
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• pp.180-188
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• 2015

김치로부터 분리한 L. sp. KD 28은 펩타이드성 항균물질인 박테리오신을 생산하였다. 이 박테리오신은 ${\alpha}$-chymotrypsin, proteinase K, lipase, ${\alpha}$-amylase, carboxypeptidase A 효소에 대해서 매우 민감한 반응을 보였다. 낮은 pH 2.0에서 약 염기성의 pH 8.0까지는 항균활성을 온전히 유지하였으나 pH 8.0 이상에서는 항균활성이 감소하기 시작하여 pH 12.0에서는 25%로 감소하였다. L. sp. KD 28는 16S rRNA 분자계통학적 분석을 한 결과 L. lactis와 99% 상동성을 보였다. 또한 김치에서 분리한 L. sp. KD 28이 생산하는 박테리오신은 acetonitrile, isopropanol, methanol, chloroform 및 acetone 등의 유기용매 최종 농도 50%에서 항균활성은 영향을 받지 않았다. 열 안정성의 경우 $80^{\circ}C$까지 한 시간의 열처리에 안정하였으나 $100^{\circ}C$에서는 20분 이상의 열처리에 의해 항균활성이 감소하여 50분간 열처리할 경우 항균활성이 나타나지 않았다. 또한 이 박테리오신은 그람 음성보다는 양성 세균인 M. luteus IAM 1056, L. delbrueckii subsp. lactis KCTC 1058, E. faecium KCTC 3095, B. cereus KCTC 1013, B. subtilis KCTC 1023, S. aureus subsp. aureus KCTC 1916, B. megaterium KCTC 1098, B. sphaericus KCTC 1184 및 L. ivanovii subsp, ivanovii KCTC 3444 등에 대해서 항균활성을 보였다. 박테리오신을 SP-Sepharose 이온교환크로마토그래피로 부분 정제한 후 RP-HPLC 를 통해서 최종적으로 정제하여 tricine-SDS-PAGE를 통해 분자량을 확인한 결과 약 3.4 kDa로 나타났다.

• 생명과학회지
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• 제14권4호
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• pp.636-643
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• 2004

김치에서 분리된 Lactococcus sp. JK-8 균주에 의해 생산되는 D-xylose isomerase를 17배 정제하여 물리 화학적인 특성을 조사하였다 D-Xylose isomerase의 N 말단 아미노산 서열을 결정한 결과 Ala-Tyr-Phe-Asn-Asp-Ile-Ala-Pro-Ile-Lys로 확인되었고 이것은 Lactococcus 속의 D-xylose isomerase와는 유사하지 않았다. 정제된 효소의 분자량은 gel filtration의 경우 180 kDa, subunit의 분자량은 SDS-PAGE에서 45 kDa으로 측정되었고 이 효소는 4개의 subunit으로 구성된 homotetramer였다. 최적 반응 pH는 pH 7부근이었고 pH 6∼8 사이에서 안정하였다. 최적 반응온도는 7$0^{\circ}C$였고 1 mM $Mn^{2+}$의 존재 하에서는 7$0^{\circ}C$ 이상에서도 안정하였다. 이 효소도 다른 D-xylose isomerase처럼 활성과 열 안정성을 위해서 $Mg^{2+}$, $Co^{2+}$또는 $Mn^{2+}$와 같은 2가의 양이온을 필요로 하였으며, 이중 $Mn^{2+}$가 효소 활성에 가장 효과적이었다. 기질 특이성에 관한 연구에서는 D-xylose를 사용했을 때 높은 활성을 가짐을 알 수 있었다. 이 효소의 pI 값은 4.8이었고, D-xylose에 대한 Km 값은 5.9 mM이었다.

• 한국어병학회지
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• 제14권2호
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• pp.71-80
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• 2001

본 연구는 우리 나라의 해산 양식어류 양식장에서 발생하는 연쇄구균증 원인균의 종 조성과 미생물학적 연쇄구균증 원인균의 종 조성과 미생물학적 특성을 밝히고자 하였다. 안구 백탁, 안구 출혈, 아가미뚜껑 출혈 및 복부 팽만 등의 증상이 관찰되는 해산 양식어류에서 분리된 연쇄상구균의 여러 균주들을 Lactococcus garvieae와 생리학적, 생화학적, 혈청학적 특성을 비교하였다. 또한 polymerase chain reaction(PCR)assay로 분리 균주들과 L.garvieae의 연관성을 조사하였으며 연쇄구균증 원인균들의 분포 특성을 조사하였다. 연쇄구균증을 나타내는 3종의 해산 양식어류로부터 연쇄상구균 35균주를 분리하였으며, 이 균주들의 생리, 생화학적 특성을 L.garvieae와 비교해 본 결과 15 균주가 L.garvieae에 속하는 것을 알 수 있었다. 분리균주를 참조균주인 ATCC49156토끼 향혈청으로 슬라이드 응집 시험한 결과 L.garvieae $KG^+$ type과 응집하는 균주가 7균주로 관찰되었다. 또한 L.garvieae의 특이 primers, pLG-1(5`-CATAACAATGAGATCGC-'3)와 pLG-2(5'-GCACCCTCGCGGGTTG-3')를 사용한 16S rRNA의 PCR 시험 결과 분리균주 중 21 균주가 예상 band를 형성하여 L.garvieae로 판단하였다. 이상의 결과에 따르면 35종의 분리균주 중 L.garvieae가 21 균주, Enterococcus sp.rk 5 균주, Streptococcus sp.가 9종으로 조사된 지역에서 연쇄구균에 의한 질병 발생은 L.garvieae가 우점을 차지함을 알 수 있었다.