Bacteria from the genus Lactobacillus are important for the production of fermented food and dairy products, and as symbionts in human and animals. Lactobacillus acidophilus has widely been used in the production of yogurt, health foods, and even medicines. The efficacy of L. acidophilus has been proven with regards to the reduction of cholesterol, prevention and treatment of diarrhea, modulation of the immune system, suppression of cancer, etc. Using molecular biology tools, Lactobacillus acidophilus has now been reclassified into six species: L. acidophilus, L. amylovorus, L. crispatus, L gallinarium, L. gasseri, and L. johnsonii. Thus, since L. acidophilus has now been marked as a newly defined species, caution is advised when reading future publications regarding this bacterium. In this article, the results of the reclassification of L. acidophilus are mentioned after an analysis of its field inheritance was performed by my research team. Especially, L. amylovorus KU4 (formerly named as L. acidophilus KU4; KCCM 10975P) is a novel probiotic strain that is isolated from humans; it has the ability to reduce cholesterol. It has also been reported as a microorganism that effectively inhibits the growth of pathogenic E. coli. However, this Korean patent (No 10-1541280) refers to a strain obtained from calves; the origin of this strain was incorrectly labeled. Furthermore, after the discovery of L. acidophilus in 1900, its role in intestinal microbiological research was described and its utilization as a probiotic was presented.
Two lactic acid bacteria (LAB) with high ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA)-producing capacity were isolated from naturally aged cheese. Examination of the biochemical features using an API kit indicated that the two strains belonged to Lactobacillus. They were gram positive, rod-type bacteria, and fermented arabinose, melezitose, melibiose and xylose, but did not utilize cellobiose or trehalose. 16S rDNA sequencing analysis confirmed that they were Lactobacillus buchneri and Lactobacillus sp. They were accordingly named as Lactobacillus buchneri OPM-1 and Lactobacillus sp. OPM-2, and could produce GABA from MRS broth supplemented with 10 g/L of monosodium glutamate (MSG) at a productivity of 91.7 and 116.7 mg/L/hr, respectively. Cell extracts of L. buchneri OPM-1 and Lactobacillus sp. OPM-2 showed glutamate decarboxylase (GAD) activity, for which the optimum pH and temperature were 5.5 and $30^{\circ}C$, respectively.
본 연구는 유산간균 및 유산구균으로부터 plasmid DNA를 신속하고 간편하게 분리하기 위한 방법에 관한 것이다. 세포벽 형성 억제 인자인 glycine을 0.5% 첨가한 TCM 배지에서 유산균을 배양하였고 plasmid DNA는 mutanolysin을 처리한 cells로부터 alkaline-detergent lysis 법으로 분리되었다. 유산간균은 효소 처리 때 mutanolysin의 농도를 30$\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 하고 37$^{\circ}C$에서 5-10분간 반응되었을 때 plasmid DNA가 아주 잘 추출되었다. 유산구균의 경우는 그 최적 조건이 조금 달랐다. 본 방법은 L. casei, L. acidophilus, L. helveticus, S. lactis, S. faecalis, S. faecium과 S. cremoris 균주로부터 plasmid DNA를 신속하게 분리하는데 사용할 수 있었다. 본 방법을 이용하여 배양액 $1.5m\ell$로부터 분리된 plasmidsDNA가 gel상에서 쉽게 확인될 수 있었다.
The objective of this study was to identify lactic acid bacteria (LAB) isolated from kimchi and to evaluate its characteristics and functional properties for application in fermented dairy products as a probiotic or commercial starter culture. Eight stains isolated from kimchi were selected through an investigation of phenotypic characteristics. Two strains (DK211 and DK303) were identified as Lactobacillus plantarum, another two (DK207 and DK215) as Lactobacillus paracasei, and one (DK301) as Lactobacillus sakei. The remaining three strains were identified as species of Weissella. All selected Lactobacillus strains had acid and bile tolerance, even though there was wide variation in the ability of each strain. DK303 showed a remarkably higher proteolytic activity. There were no significant differences in β-galactosidase activity among the tested strains, except that DK301 showed no activity. Auto-aggregation varied between 82.1 and 90.0%, and hydrophobicity values ranged from 0.5 to 51.6%.The strongest auto-aggregation and hydrophobicity were observed in DK211. All selected strains showed better 1,1-diphenyl-2-picrylhydrzyl (DPPH) scavenging activity than commercial strains. DK211, DK215, DK301, and DK303 had effective inhibitory activity against all pathogens tested except E. coli. When selected strains were used for yogurt preparation as a single starter culture, the time required to reach target titratable acidity (0.9) was 11-12 h. The yogurt fermented with DK211 had favorable panelists ratings for most sensory attributes, which were comparable with yogurt fermented with a commercial strain. The results suggest that strains isolated from kimchi could be potential probiotic and starter cultures for use in yogurt manufacturing.
This study aimed to identify lactic acid bacteria isolated from eight fermented milk products in Iran. We enumerated Lactobacillus species using De Man-Rogosa-Sharpe (MRS)-maltose and MRS agar with pH adjusted to 5.2, as well as assessment at 37℃ for 48 hr, studied Streptococcus spp. using M17 agar at 43℃ for 24 hr, and assessed Bifidobacterium species using nalidixic acid, paromomycin sulfate, neomycin sulfate, and lithium chloride (BL-NPNL) agar at 37℃ for 48 hr. The total viable Streptococcus spp. cell in fermented milk varied at 4.73-8.83 log CFU/mL. However, Bifidobacterium spp. were not detected in any of the tested samples. Lactobacilli were not detected in four of the eight samples, and viable Lactobacilli cells in the remaining four samples ranged 2.48-3.85 log CFU/mL. The pH of the tested samples ranged 3.53-4.19, and soluble solids (Brix measurement) ranged 7.5%-17.9%. A total of 130 isolates of gram-positive catalase-positive bacteria were characterized at the species level using 16S rRNA sequencing. Sequence analysis identified six species: Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii subsp. sunkii, Lactobacillus delbrueckii subsp. indicus, Lactiplantibacillus plantarum, Lacticaseibacillus rhamnosus, and Levilactobacillus brevis.
갓김치로부터 분리된 유산균 5종(Lactobacillus acidophilus GK20, Lactobacillus brevis GK55, Lactobacillus paracasei GK74, Lactobacillus plantarum GK81, 및 Leuconostoc mesenteroides GK104)의 활성산소종에 대한 저항성 및 항산화 활성을 조사하였다. Hydrogen peroxide (0.5 mM)와 반응 5시간후 L. acidophilus GK20, L. brevis GK55, L. paracasei GK74 및 L. plantarum GK81들은 50% 이상의 생존율을 보였으며, superoxide anions에 의한 저해율은 L. acidophilus GK20와 L. paracasei GK74가 가장 낮았고, hydroxyl radical과의 반응에서는 L. paracasei GK74와 L. plantarum GK81이 가장 안정하였다. 한편, L. plantarum GK81는 실험 균주 중 가장 높은 DPPH 소거능($70.8{\pm}10.1%$)을 나타내었는데, 세포(IC)보다는 세포추출물(ICFE)의 활성이 더 높았다. 또한 L. plantarum GK81의 ICFE는 다른 균주들에 비해 높은 superoxide radical 소거능을 보였고, 이 균주의 IC와 ICFE에 의한 환원력은 BHA와 vitamin C보다 유의적으로 더 높게 나타났으며, L.paracasei GK74 IC의 환원력도 vitamin C와 비슷한 수준으로 나타났다. L. brevis GK55, L. paracasei GK74 및 L.mesenteroides GK104 IC의 $Fe^{2+}$-chelating 활성은 30% 이상이었고, L. plantarum GK81의 ICFE는 45% 이상의 활성을 나타내었다. 따라서 실험 균주 중 L. plantarum GK81은 다른 균들에 비해 ROS에 대해 비교적 안정하고, 항산화 활성도 가장 높은 것으로 확인되었다.
Silage making has become a significant method of forage conservation worldwide. To determine how tomato pomace (TP) may be used effectively as animal feed, it was ensilaged for 90 days and microbiology counts, fermentation characteristics and chemical composition of tomato pomace silage (TPS) were evaluated at the 30th, 60th, and 90th days, respectively. In addition, 103 lactic acid bacteria were isolated from TPS. Based on the phenotypic and chemotaxonomic characteristics, 16S rDNA sequence and carbohydrate fermentation tests, the isolates were identified as 17 species namely: Lactobacillus coryniformis subsp. torquens (0.97%), Lactobacillus pontis (0.97%), Lactobacillus hilgardii (0.97%), Lactobacillus pantheris (0.97%), Lactobacillus amylovorus (1.9%), Lactobacillus panis (1.9%), Lactobacillus vaginalis (1.9%), Lactobacillus rapi (1.9%), Lactobacillus buchneri (2.9%), Lactobacillus parafarraginis (2.9%), Lactobacillus helveticus (3.9%), Lactobacillus camelliae (3.9%), Lactobacillus fermentum (5.8%), Lactobacillus manihotivorans (6.8%), Lactobacillus plantarum (10.7%), Lactobacillus harbinensis (16.5%) and Lactobacillus paracasei subsp. paracasei (35.0%). This study has shown that TP can be well preserved for 90 days by ensilaging and that TPS is not only rich in essential nutrients, but that physiological and biochemical properties of the isolates could provide a platform for future design of lactic acid bacteria (LAB) inoculants aimed at improving the fermentation quality of silage.
Twenty seven strains of Lactobacillus acidophilus among 92 isolated from fecal contents of humans, pigs, calves, chickens, rodents and turkeys demonstrated inhibitory attributed to bacteriocin(s). The bacteriocin(s) were heat stable and nondialyzable proteinous compounds and exhibited narrow inhibitory spectra of activity. Neither hydrogen peroxide nor low pH were responsible for inhibitory action. All of the producer strains were resistant to their own bacteriocin or bacteriocin(s) produced by other strains. The bacteriocins from several strains from different host species were purified for further characterization. The bacteriocin(s) all exhibited similar characteristics.
This report was concerned with the isolation and identification of bacterial flora in the human dental plaque and the dextransucrase activity of isolated species. The results were obtained as follows: 1. The bacterial flora, isolated from the human dental plaque, was identified as 3 species of resembling streptococci, Streptococcus salivarius strain SD-1, Streptococcus bacilli, Lactobacillus brevis strain SD-3, Lactobacillus acidophilus strain SD-2 and SD-7, resembling Staphylococcus sp, and one species of resembling Leuconostoc mesenteroides strain SD-6. 2. The dextransucrase activites of resembling Streptococcus mitis strain SD-9 and Streptococcus salivarius strain SD-1 were exhibited the highest among the isolated species of human dental plaque.
A Lactobacillus isolate was collected from the feces of a healthy Korean individual and named as Lactobacillus ruminus SPM0211. It was further characterized by subjecting it to an antibiotic resistance test and genetic analysis. In the antibiotic resistance test, all tested Lactobacillus spp. were classified as 'high resistance' for multiple antibiotics, such as isoniazid, ethambutol, cycloserine, and vancomycin. L. ruminus SPM0211 was classified as 'high resistance' for streptomycin also, while the other tested Lactobacillus spp. were classified as low resistance. This suggests that the antimicrobial spectra may be a good indicator in the discrimination of this strain among the tested Lactobacillus spp. In a polymerase chain reaction-random amplified polymorphic DNA (PCR-RAPD) analysis using the Microbial Uniprimer kit, L. ruminus SPM0211, and L. suebicus were clustered as a group with a 74.3% similarity level, suggesting that these two species are genetically related. Thus, our data suggest that the PCR-RADP method using the Microbial Uniprimer kit may be valuable in discriminating L. ruminus SPM0211 from other Lactobacillus spp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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