Lactobacillus salivarius KLW001, a species of lactic acid bacteria (LAB), was isolated from a weaning piglet in a swine farm, South Korea, to develop an antimicrobial probiotic strain for piglets. Herein, we report the draft genome sequence of the strain. The genome contains 2,326,706 bp with a G+C content of 33.0% in 166 contigs (${\geq}500bp$). From the genome, we found out 4 genes related to antibiotic resistance, 36 genes for phages, 3 genes for bile hydrolysis, and 27 CRISPR spacers.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.5
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pp.1003-1009
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1999
For the isolation of probiotics which may be used for the human beings and animals, we have screened the microorganisms from chicken intestines which have acid and bile tolerance and the growth inhibition of pathogenic E. coli and Salmonella typhimurium. Among them, a strain which was identified as Lactobacillus salivarius had around 66% of survival after 2h incubation in the artificial gastric juice and 9% of survival after 24h incubation in the presence of 0.3% bile salts, and showed complete inhibition against both path ogenic E. coli and Salmonella typhimurium after 24 h coincubation. Its storage stability after lyophilization could be improved by adding polyvinylpyrrolidone.
Lactobacillus salivarius subsp. salivarius CNU27 possessed a high level of ${\alpha}$-galactosidase activity. Purified ${\alpha}$-galactosidase was obtained after sonication of harvested cell pellet followed by DEAE-Sephadex A-50 and Mono Q anion exchange chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 8,994 units/mg protein which is 17.09 times higher than that in crude extract. The native enzyme was a monomer with a molecular mass of 56,397.1 dalton. The optimum temperature and pH for the enzyme were $40^{\circ}C$ and 6.0, respectively. The enzyme was stable between 25 and $50^{\circ}C$. However, ${\alpha}$-galactosidase activity was lost rapidly below pH 4.5 and above pH 8.5. The enzyme activity decreased to 6.73% and 4.30% of the original activity by addition of $Cu^{2+}$ and $Hg^{2+}$, respectively. Other metal compounds did not affect the enzyme activity significantly. The enzyme liberated galactose from melibiose, raffinose, and stachyose. The rate of substrates hydrolysis was measured by HPLC. Raffinose, stachyose and melibiose were completely decomposed after 24 hr at $40^{\circ}C$.
Lactobacillus salivarius subsp. salivarius Nam27 with a high ${\beta}$-galactosidase activity was selected for enzymatic characterization. For purification, cell pellet was disrupted by Bead Beater, by DEAE-Sepharose and Mono-Q chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 5,312 units/mg. The molecular weight of native monomeric ${\beta}$-galactosidase was estimated to be 30,000 dalton (monomer) by the SDS-PAGE. The optimum temperature and optimum pH were $50^{\circ}C$ and 5.0, respectively. This enzyme was stable between 35 and $55^{\circ}C$. ${\beta}$-galactosidase activity was lost rapidly above pH 7.0. But ${\beta}$-galactosidase was more stable at pH 4.0 (acidic conditions). And ${\beta}$-galactosidase activity was lost rapidly above $65^{\circ}C$ after 10 min incubation. $Ca^{2+}$ and $Zn^{2+}$ metal ions enhanced ${\beta}$-galactosidase activity by 164.09% and 127.37% while $Cu^{2+}$, $Fe^{3+}$ and $Mn^{2+}$ lowered ${\beta}$-galactosidase activity by 58.29%,85.10% and 77.66% respectively. Other metal ions didn't affect ${\beta}$-galactosidase activity significantly.
The aim of this study was to isolate and characterize bacteriocin-producing bacteria from the intestine of duck to use as probiotics for livestock. A total of 416 strains were isolated from the small intestine and cecum of ducks and 13 isolates were finally selected after determinging inhibitory activity against pathogenic indicators by spot-on-lawn method. The selected strains were identified as Lactobacillus salivarius JWS 58, Lactobacillus plantarum JWS 1354, Pediococcus pentosaceus JWS 939, 7 strains of enterococci, and 3 strains of Escherichia coli. Lact. salivarius JWS 58, Ent. faecium JWS 833, and Ped. pentosaceus JWS 939 showed a strong inhibitory activity against Listeria monocytogenes. E. coli JWS 108 inhibited the growth of E. coli and Staphylococcus aureus. Lact. salivarius JWS 58 strain survived almost 50% in pH 2.5 phosphate buffer for 2 hr. Ped. pentosaceus JWS 939 and Lact. plantarum JWS 1354 showed strong amylolytic activity. These results suggest that a combination of bacteriocins or multispecies probiotics of the selected strains has a strong potential of alternative to antibiotics in livestock production.
Choi, Hyun Jong;Kim, Ji Ye;Shin, Myeong Su;Lee, Sang Myeong;Lee, Wan Kyu
Korean Journal of Veterinary Research
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v.51
no.4
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pp.281-288
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2011
Lactobacillus salivarius JWS 58 (JWS 58) and Lactobacillus plantarum JWS 1354 (JWS 1354) are isolated from duck intestine and have ability to produce bacteriocin. The objective of this study was to evaluate the immunomodulatory effects of JWS 58 and JWS 1354. The nitric oxide (NO) and cytokines (IL-$1{\beta}$ and TNF-${\alpha}$) were measured in C57BL/6 mouse peritoneal macrophages to determine immune enhancing effects of JWS 58 and JWS 1354. A Listeria (L.) monocytogenes challenge mice model was used to evaluate immune enhancement ability of JWS 58 and JWS 1354 in vivo. The results showed that JWS 58 and JWS 1354 increased the production of NO or cytokines by peritoneal macrophages and that oral administration of viable probiotic strains in mice elicited the immuno-modulatory effect upon L. monocytogenes challenge. JWS 1354 showed stronger immune enhancing effects than JWS 58. Collectively, this study demonstrated that Lactobacillus strain JWS 58 and JWS 1354 possess immune enhancing effect. Furthermore, two stains are expected to use feed supplement to prevent diseases by pathogenic bacteria through releasing bacteriocin and enhancing host immune responses in animal.
Kim, Mi-Hyung;Choi, Nam-Ki;Kim, Seon-Mi;Oh, Jung-Suk;Yang, Kyu-Ho
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.32
no.2
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pp.344-356
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2005
There are normal inhabitants doing medically useful functions in the body. There are many kinds of bacteria performing specific functions in the oral cavity. Two strains of lactic acid bacteria were isolated from inhabitants of caries-free children's oral cavity, which inhibited the formation of artificial plaque by Streptococcus mutans and the production of volatile sulfur compounds by anaerobic bacteria. The isolates were identified by the test using API 50 CHL medium kit and 16S rDNA partial sequencing. 1. Two isolates were Gram-positive bacilli and produced hydrogen peroxide. 2. When Streptococcus mutans was cultured in the media, the mean weight of formed artificial plaque on the orthodontic wires was $124.4{\pm}30.4\;mg$, whereas being reduced to $5.2{\pm}2.0mg$ and $10.6{\pm}6.6mg$ in the media cultured with Streptococcus mutans and each isolate, respectively (p<0.05) 3. The number of viable cells of Streptococcus mutans was $3.4{\times}10^9$ per ml in the cultured solution, whereas those of Streptococcus mutans in the combined culture with each of isolates were $4.6{\times}10^8\;and\;2.4{\times}10^8$ per ml. 4. The optical density was 1.286 in the supernatant of Fusobacterium nucleatum after vortexing for 30minutes, whereas in the supernatant of combined Fusobacterium nucleatum and each isolate, they were reduced to 0.628 and 0.497, which the percentages of coaggregation between them were 29.4% and 57.8%, respectively 5. The optical density of Fusobacterium nucleatum precipitate was 1.794 in the culture media containing cysteine and $FeSO_4$, being reduced to 1.144 and 0.915 in the coaggregated precipitates of Fusobacterium nucleatum and each isolate. The optical density of Porphyromonas gingivalis precipitate was 1.932 in the culture media, being reduced to 1.170 and 1.266 in the coaggregated precipitates of Porphyromonas gingivalis and each isolate. 6. When two isolates were tested with API 50 CHL medium kit, those were identified Lactobaciallius salivarius and Lactobaciallius delbrueckii subsp. lactis. 7. The similarity values of 16S rDNA sequence between each of isolates and Lactobaciallius salivarius subsp. salicinius were 99.60% and 99.73%, respectively, meaning that isolates were Lactobaciallius salivarius subsp. salicinius. These results indicated that two strains isolated from caries-free children's saliva, which inhibited the formation of artificial plaque and the production of volatile sulfur compounds, were identified as Lactobaciallius salivarius subsp. salicinius.
There are normal inhabitants doing medically useful functions in the body. There are many kinds of bacteria performing specific functions in the oral cavity. Two strains of lactic add bacteria were isolated from normal inhabitants of children's oral cavity, which inhibited the production of volatile sulfur compounds by anaerobic bacteria. The authors identified the isolates by 16S rDNA partial sequencing. 1. Two isolates were Gram-positive bacilli and produced hydrogen peroxide. 2. When Streptococcus mutans was cultured in the media, the mean weight of formed artificial plaque on the orthodontic wires was $124.4{\pm}30.4$ mg, whereas being reduced to $5.2{\pm}2.0$ mg and $10.6{\pm}6.6$ mg in the media cultured with Streptococcus mutans and each isolate, respectively(p<0.05). 3. The number of viable cells of Streptococcus mutans was $3.4{\times}10^9$ per ml in the cultured solution, whereas those of Streptococcus mutans in the combined culture with each of isolates were $4.6{\times}10^8$ and $2.4{\times}10^8$ per ml. 4. The optical density was 1.286 in the supernatant of Fusoacterium nucleatum after vortexing for 30 minutes, whereas in the supernatant of combined Fusoacterium nucleatum and each isolate, they were reduced to 0.628 and 00497, which the percentages of coaggregation between them were 2904% and 57.8%, respectively. 5. The optical density of Fusoacterium nucleatum precipitate was 1.794 in the culture media containing cysteine and $FeSO_4$ being reduced to 1.144 and 0.915 in the coaggregated precipitates of Fusoacterium nucleatum and each isolate. 6. The similarity values of 16S rDNA sequence between each of isolates and Lactobacillus salivarius subsp. salicinius were 99.60% and 99.73%, respectively, meaning that isolates were Lactobacillus salivarius subsp. salicinius. These results indicated that two strains isolated from children's saliva, which inhibited the formation of plaque and the production of volatile sulfur compounds, were identified as Lactobacillus salivarius subsp. salicinius.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.12
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pp.1811-1814
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2009
The effect of fermentation with mixed cultures of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus salivarius subsp. thermophilus on the microbiological characteristics of oat extract was investigated. Changes in pH, titratable acidity and viable cell populations indicated that growth was better in mixed cultures of L. delbrueckii subsp. bulgaricus and S. salivarius subsp. thermophilus. Growth of S. salivarius subsp. thermophilus in oat extract was more rapid than growth of L. delbrueckii subsp. bulgaricus. Cooperative interaction between two cultures during fermentation of oat extract as in yogurt from cow's milk was observed, but the intensity was relatively weak.
This experiment was carried out to examine the fennentation properties of yogurts with or without Lyeii fructus, Lyeii folium and Lyeii cortex extract as additives at concentrations of 1.0%. The effects on promoting the fermentation by Lycii fructus, Lycii folium and Lycii cortex additives were higher and pH was below 4.06 when Streptococcus salivarius ssp. thermophilus and Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus cosei, and Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium longum and Streptococcus salivarius ssp. thermophilus were used. The acid production was higher when S. salivarius ssp. thermophilus and L. delbrueckii ssp. bulgaricw were used. The average lactic acid bacteria counts was 2.62 ${\times}$$10^9$ cfu/ml in the yogurt added with Lycii fructus extract and fermentation with S. salivarius ssp. thermophilus and L. delbrueckii ssp. bulgaricw. The lactose hydrolysis ratio was higher in the milk added with Lycii fructus extract(36.11%), Lycii folium extract(37.76%) and Lycii cortex extract(32.70%) when S. salivarius ssp. thermophilus and L. delbrueckii ssp. bulgaricus were used. The isobutylic acid concentration was(34.39 to 37.72 mM) with S. salivarius ssp. thermophilus and L. delbrueckii ssp. bulgaricus. The viscosity of yogurt was 1,615 to 2,030 cP in yogurts added with skim milk and L. acidophilus; B. longum and S. salivarius ssp. thermophilus were used. The sensory scores of colors, tastes and overall acceptability of yogurt with Lycii cortex extract were shown 3.34 to 3.77 when fermented by L. cosei, L. acidophilus, B. longum and S. salivarius ssp. thermophilus. The cholesterol reducing effects were 17.38${\sim}$32.08% in all the yogurts and especially, greater effect(25.75 to 32.08%) for yogurts fermented with L. acidophilus KCTC3150 and L. salivarius subsp. salivarius CNU27. The inhibitory effects on the pathogenic bacteria by lactic acid bacteria added with Lycii fructus, Lycii folium and Lyeii cortex lower on S. typhimurium M-15, but higher on E. coli KCTC1021 and L. monocytogenes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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