In this study, we investigated the antioxidant activity of hesperidin and hesperetin, which are the active compounds from Citrus junos, in the cellular system. Under cellular model of oxidative damage using LLC-$PK_1$ renal epithelial cell, the oxidative damage induced by 2,2'-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) led to the loss of cell viability, while treatment of hesperidin and hesperetin increased significantly the cell viability as dose-dependent manner. In addition, NO-induced cellular oxidative damage by sodium nitroprusside were significantly recovered by the treatment of hesperidin and hesperetin, showing the increase of cell viability. But hesperidin and hesperetin showed no significant protective effect on $O_2{^-}$-induced cellular oxidative damage. The present study indicates that hesperidin and hesperetin protect against free radical, especially AAPH-induced peroxyl radical. In particular, hesperetin has stronger protective effect against oxidative stress than hesperidin.
The protective effect of chungkukjang from Sunchang province against oxidative stress was evaluated in the cellular system using LLC-$PK_1$ renal epithelial cells. The LLC-$PK_1$ cells showed decrease in cell viability and elevation in lipid peroxidation by the treatment with the generators of nitric oxide (NO) and superoxide anion ($O_2^-$) produced by sodium nitrouprusside and pyrogallol, respectively. However, the methanol extract of chungkukjang significantly inhibited cellular loss and lipid peroxidation in a dose-dependent manner; in particular K chungkukjang (KC) exerted the strongest protective effect. In addition, the protective effect of chungkukjang from 3-morpholinosydnonimine, as a source of peroxynitrite, with simultaneous generations of NO and $O_2^-$, was also studied. Treatment with chungkukjangs significantly preserved the cell viability and inhibited lipid peroxidation caused by SIN-1 with dose-dependence. The present study suggests that chungkukjang from Sunchang province, especially KC, would have protective potential from oxidative stress induced by free radicals under cellular oxidative damage.
The protective activity of seolitae chungkukjang added with green tea against oxidative stress was investigated under the cellular systems using LLC-$PK_1$ cells. The treatment of 2,2'-azobis(2-aminopropane) dihydrochloride (AAPH) showed increase in lipid peroxidation, and decrease in endogenous antioxidant enzymes activity and cell viability. However, the methanol extract of seolitae chungkukjang inhibited lipid peroxidation by 58.3%, and increased cell viability up to more than 60%. In addition, it enhanced superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activities. Seolitae chungkukjang improved oxidative stress-induced cellular injury through the radical scavenging activities. In particular, the addition of green tea in seolitae chungkukjang showed stronger effect against oxidative stress induced by AAPH. The more addition of green tea resulted in the greater antioxidative effect through elevation in activities of SOD and GSH-Px, and inhibition of lipid peroxidation, eventually leading to increase in cell viability. Theses results suggested that seolitae chungkukjang added with green tea have protective effects from cellular oxidative damage and could be considered as an application for the development of chungkukjang with functionality.
We have previously shown that determination of glucose uptake using ${\alpha}$-methylglucose(${\alpha}$-MG) is very sensitive and rapid parameter for the assessment of loss of cellular fu nction in renal cell line($LLC-PK_1$). The present study was designed to elucidate the mechanism of inhibition of ${\alpha}$-MG uptake and the intracellular site of toxic action of cisplatin(CIS). $LLC-PK_1$ cells were exposed to various concentrations(5 ${\mu}$M-l00 ${\mu}$M) of CIS for 5 hrs or 24 hrs and ${\alpha}$-MG uptake was determined. Mitochondrial function was evaluated by measuring intracellular ATP content and MTT reduction. The activities of marker enzymes for the basolateral membrane(Na$^+$-K$^+$ ATPase) and brush border membrane (alkaline phosphatase: ALP) were also measured. CIS treatment significantly inhibited the ${\alpha}$-MG uptake in a time- and dose-dependent manner above 25 ${\mu}$M for 5 hrs. Intracellular ATP content and MTT reduction were affected by 24 hr-treatment of 50 ${\mu}$M CIS. The activities of Na$^+$-K$^+$ ATPase and ALP were significantly decreased at 10 ${\mu}$M and 5 ${\mu}$M of CIS for 24 hrs, respectively. The incubation with CIS for 5 hrs had no effects on the intracellular ATP content, MTT reduction and the activities of marker enzymes up to 100 ${\mu}$M. These results partly indicate that inhibition of ${\alpha}$-MG uptake by CIS may not be attributed to the disturbance of mitochondrial function or inhibition of the activity of Na$^+$-K$^+$ ATPase and can be resulted from direct effect of CIS on the Na$^+$/glucose cotransporter in brush border membrane. This study shows that additional mechanistic information, indicating the intracellular site of nephrotoxic action, can be gained by coupling the ${\alpha}$-MG uptake and ATP content or the activity of Na$^+$-K$^+$ ATPase.
The protective role of phloroglucinol against oxidative stress and stress-induced premature senescence (SIPS) was investigated in vitro and in cell culture. Phloroglucinol had strong and concentration-dependent radical scavenging effects against nitric oxide (NO), superoxide anions ($O_2{^-}$), and hydroxyl radicals. In this study, free radical generators were used to induce oxidative stress in LLC-PK1 renal epithelial cells. Treatment with phloroglucinol attenuated the oxidative stress induced by peroxyl radicals, NO, $O_2{^-}$, and peroxynitrite. Phloroglucinol also increased cell viability and decreased lipid peroxidation in a concentration-dependent manner. WI-38 human diploid fibroblast cells were used to investigate the protective effect of phloroglucinol against hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced SIPS. Phloroglucinol treatment attenuated $H_2O_2$-induced SIPS by increasing cell viability and inhibited lipid peroxidation, suggesting that treatment with phloroglucinol should delay the aging process. The present study supports the promising role of phloroglucinol as an antioxidative agent against free radical-induced oxidative stress and SIPS.
In this study, the antioxidative effect and protective potential against oxidative damage of extract and fractions from broccoli were investigated under in vitro and cellular system. The methanol (MeOH) extracts of broccoli flowers and sprouts were partitioned as dichloromethane, n-butanol (BuOH) and aqueous fractions. The comparison of antioxidative effect of broccoli flowers and sprouts showed that broccoli sprouts exerted the more effective protective activity from 2,2'-azobis (2-aminopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in LLC-$PK_1$ porcine renal epithelial cell. In addition, the extract and fractions from broccoli sprouts showed strong scavenging effect of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical and the BuOH fraction exerted the strongest activity. Therefore, the BuOH fraction was evaluated as the most active fraction with strong radical scavenging activity among the fractions of broccoli flowers and sprouts. The present study suggests the antioxidative potential against free radical-induced oxidative damage of flowers and sprouts of broccoli. In addition, the BuOH fraction of broccoli is considered as the active fraction with antioxidative effect.
채소류의 산화방지 지표로서 ORAC측정결과 산화방지 능력이 우수하다고 보고되어진 13가지 채소류를 선정하여 DPPH 라디칼 소거능을 관찰하고 이들의 phenol 함량을 분석한 결과, 비트, 가지, 케일의 DPPH 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났으며, 이들은 총 phenol 함량 또한 높아 이들 사이의 양의 상관관계가 있음을 알 수 있었다 반면, 알팔파 스프라우트(alfalfa sprout), 브로컬리, 시금치 등에서는 phenol 함량은 높은 것에 비해 DPPH 라디칼 소거능은 그다지 우수하지 못했다. 또한 세포모델에서 LLC-$PK_{1}$ 세포에 radical generator인 AAPH 처리를 함으로써 채소류의 산화적 스트레스에 대한 개선효과 살펴본 결과, 가지와 컬리플라워가 높은 세포 생존율을 보여 가장 우수한 산화적 스트레스 개선 효과를 가진 것으로 나타났으며, 그 다음으로 비트,당근 등의 산화적 스트레스 개선효과가 높은 것으로 나타났다. 특히 가지는 총 phenol 함량도 높을 뿐 아니라, DPPH 라디칼 소거능과 세포모델에서의 산화적 스트레스에 대한 개선효과도 뛰어나 우수한 항산화기능성을 지닌 채소류로 사료된다.
Han, Myoung-Sik;Han, Im-Ho;Lee, Dahae;An, Jun Min;Kim, Su-Nam;Shin, Myoung-Sook;Yamabe, Noriko;Hwang, Gwi Seo;Yoo, Hye Hyun;Choi, Suk-Jung;Kang, Ki Sung;Jang, Hyuk-Jai
Journal of Ginseng Research
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제40권2호
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pp.135-140
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2016
Background: Nephrotoxicity is a common side effect of medications. Panax ginseng is one of the best-known herbal medicines, and its individual constituents enhance renal function. Identification of its efficacy and mechanisms of action against drug-induced nephrotoxicity, as well as the specific constituents mediating this effect, have recently emerged as an interesting research area focusing on the kidney protective efficacy of P. ginseng. Methods: The present study investigated the kidney protective effect of fermented black ginseng (FBG) and its active component ginsenoside 20(S)-Rg3 against cisplatin (chemotherapy drug)-induced damage in pig kidney (LLC-PK1) cells. It focused on assessing the role of mitogen-activated protein kinases as important mechanistic elements in kidney protection. Results: The reduced cell viability induced by cisplatin was significantly recovered with FBG extract and ginsenoside 20(S)-Rg3 dose-dependently. The cisplatin-induced elevated protein levels of phosphorylated c-Jun N-terminal kinase (JNK), p53, and cleaved caspase-3 were decreased after cotreatment with FBG extract or ginsenoside 20(S)-Rg3. The elevated percentage of apoptotic LLC-PK1 cells induced by cisplatin treatment was significantly abrogated by cotreatment with FBG and the ginsenoside 20(S)-Rg3. Conclusion: FBG and its major ginsenoside 20(S)-Rg3, ameliorated cisplatin-induced nephrotoxicity in LLC-PK1 cells by blocking the JNKep53ecaspase-3 signaling cascade.
무말랭이 및 가압볶음 무말랭이 열수 추출물의 항산화 효과를 in vitro와 LLC-$PK_1$ cellular system에서 살펴보았다. 무말랭이 열수 추출물과 가압볶음 무말랭이 열수 추출물의 라디칼 소거능을 $IC_{50}$로 비교해 보았을 때 DPPH(646.70 vs $135.45\;{\mu}g/mL$), superoxide anion(896.10 vs $566.98\;{\mu}g/mL$) 및 hydroxyl radical(722.26 vs $531.84\;{\mu}g/mL$)에 대한 가압볶음 열수 추출물의 효과가 유의적으로 높은 것으로 나타났다(p<0.001). 이러한 유리기 소거효과는 LLC-PK1 cell에서 pyrogallol, SNP 및 SIN-1 처리로 superoxide, nitric oxide 및 peroxynitrite를 생성하여 산화스트레스를 유발한 다음 무말랭이 및 가압볶음 무말랭이 열수추출물을 첨가하였을때 농도 의존적으로 세포생존율이 증가하고, 과산화물 생성량이 감소하여 세포손상을 보호하는 효과가 관찰되었다. 가압볶음 무말랭이 열수 추출물의 산화손상에 대한 보호 효과는 무말랭이 열수추출물에 비해 모든 유리기에서 유의적으로 높았다(p<0.05). 이러한 무말랭이 열수추출물의 항산화효과는 무에 함유되어 있는 함황 물질, 유리아미노산, 배당체 등에 의한 것으로 생각되며 가압볶음 무말랭이 열수 추출물의 효과가 더 높은 이유는 무말랭이에 함유된 유효성분이가압볶음에 의해 증가되고 더불어 볶음과정 중에서 생성된 maillard 생성물의 항산화성 때문으로 생각된다. 무말랭이의 환원당 및 유리아미노산 함량은 볶음 후 유의적으로 감소하였으며(p<0.05), 이에 반해 maillard 생성물의 중간산물인 5-hydroxymethyl-2-furfural(5-HMF) 함량은 무말랭이 열수 추출물에서는 검출되지 않았던 것이 가압볶음 무말랭이 열수 추출물에서는 0.57 mg/g이 측정되었다. 본 연구 결과가압볶음 무말랭이 차의 섭취는 체내 유리기에 의한 산화적손상을 보호하는 효과가 높은 것으로 사료된다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.110.1-110.1
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2003
Fumonisins are specific inhibitors of ceramide synthase in sphingolipid metabolism. Sphingolipids are biologically active lipid mediators in cellular physiology and involved in cell signaling, growth, transformation, angiogenesis and differentiation. The objective of this study was to determine the effect of fumonisin B1 on $Na^+, \;K^+$-pump activity when fumonisin B1 was exposed to LLC-PK1 cells. Fumonisin B1 elevated free sphingoid bases and their 1-phosphates, while total complex sphingolipids were depleted at 20$\mu$M fumonisin B1 during the 3 day exposure. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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