• 한방재활의학과학회지
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• 제26권1호
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• pp.33-40
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• 2016

Objectives Despite the increasing use of Ja-ha-guh (Hominis-placenta ) pharmacopuncture in rehabilitative medicine field, its standard compound has yet to be investigated. The purpose of this study is to provide standardization for future studies and increase satisfaction of patients by utilizing standard pharmacopuncture. Methods Alanine and leucine were selected as potential standard compounds. LC/MS was used to devise an analytic method. This analytic method was subject to validation. According to validation guideline of Korea Food and Drug Administration, the specificity, linearity, precision, range, quantitative limits, detection limits and accuracy were measured. With this analysis, 3 lots of Ja-ha-guh pharmacopuncture were analyzed. Results Because the specificity, linearity, precision, range, quantitative limits, detection limits and accuracy meet criteria of the guideline, the analytic method was validated. It was found that Ja-ha-guh pharmacopuncture contained $211.02{\pm}7.28ug/ml$ of alanine and $372.03{\pm}7.58ug/ml$ of leucine. Conclusions Both alanine and leucine appear to be suitable standard compounds. These results are likely to contribute to further standardization of Ja-ha-guh for medical use.

• 생명과학회지
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• 제29권1호
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• pp.84-89
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• 2019

신규 항세균물질을 탐색하는 사전조사에서 몇몇 분리균주들이 그람양성 세균과 그람음성 세균 모두에 항균활성을 보이며, 심지어 methicillin내성 Staphylococcus aureus (MRSA)에도 항균활성을 나타내었다. 이들 균주 중에서 한 균주가 표현형과 계통분석을 이용하여 특히 16S 리보좀 RNA 유전자 염기서열에 기초하여 Pseudomonas aeruginosa로 동정되었다. BCNU 1204 균주의 항균물질은 King's medium B (pH 7.0)에서 $35^{\circ}C$의 온도 조건으로 4일 배양 후 가장 최대로 생산되었다. 항균물질을 각종 유기용매로 분획한 결과, P. aeruginosa BCNU 1204의 dichloromethane (DCM)분획과 ethylacetate (EA) 분획이 그람 양성 세균에 강력한 항균활성을 보였으며, 특히 ethylacetate (EA) 분획이 methicillin내성 Staphylococcus aureus (MRSA)에 대하여 강한 항균활성을 나타내었다. Recycling preparative LC와 preparative TLC 로 활성물질 하나(분획 5-2)를 분리하여 GC-MS 분석한 결과 phenazine 화합물에 속하는 phenazine-1-carboxylic acid 로 동정하였다. 그리고 MRSA 균주에 대한 최소저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)가 MRSA균주인 CCARM 3089, 3090, 3091 그리고 3095 균주에 대하여 각각 $25{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$, ${\geq}25{\mu}g/ml$ 그리고 ${\geq}50{\mu}g/ml$ 임을 확인하였다. 그러므로 P. aeruginosa BCNU 1204 분리균주는 항 MRSA 항생물질을 개발하기 위한 잠재 가치가 높은 생물자원으로 기대되며, P. aeruginosa BCNU 1204 균주로부터 리더 화합물을 획득하기 위한 보다 많은 연구가 요구된다.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제22권2호
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• pp.326-335
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• 2021

본 연구는 대두 단백질을 효소(pepsin) 분해 및 미생물(Lactobacillus Rhamnosus) 발효를 통해 생성된 저분자 생리활성 펩티드로 제조하여 인간 유래 피부세포에서 세포활성에 미치는 효과를 확인하고, 천연유래 기능성 미용소재로서의 이용 가능성을 확인하고자 하였다. 연구를 수행하기 위해 대두발효물을 제조하였고, 대두발효물에 대해 LC-MS 분석을 하였으며, WST-1 assay의 방법을 통해 cell viability를 측정하였다. 세포독성을 측정한 결과, 0~2,000 ㎍/mL의 모든 농도 구간에서 세포독성이 나타나지 않았다. 특히 800 ㎍/mL의 농도에서는 대조군에 비해 160~180 %, 양성대조군으로 사용한 EGF(epidermal growth factor)에 비해 120 %에서는 세포증식 효과가 나타나 피부노화 억제 및 피부세포 재생 소재로서의 뛰어난 가능성을 보여주었다. 또한 대두발효물과 그 분획물의 상처 치유 능력을 확인하기 위해 세포이동 실험을 수행한 결과, 대두발효물과 분핵물 중 F4와 F5가 대조군에 비해 우수한 세포이동능을 보여주었고, EGF와는 유사하거나 그 이상의 효과를 보여주었다. 결론적으로 대두발효물과 분핵물(F4 and F5)의 피부개선효과가 유사하게 나타나 피부미용 소재 및 피부 질환 치료의 소재로의 활용이 기대된다.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제38권6호
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• pp.1568-1576
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• 2021

본 연구에서는 인체에 보다 안전한 천연 화장품보존제 발굴을 목표로 하여 인간유래 항균펩타이드 LL-37의 짧은 유사체인 FK-13을 화장품보존제로 사용하고자 연구를 진행하였다. 이를 위해 13개의 아미노산으로 구성된 FK-13 펩타이드를 고상 펩타이드 합성법로 합성하였고 reversed phase-high performance liquid chromatography (RP-HPLC)로 정제 후 liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS)를 이용하여 순도와 분자량을 확인하였다. 합성된 FK-13을 이용하여 미생물에 대한 방부력을 검정하였고 화장품에 적용 가능성을 살펴보았다. FK-13은 3개의 그람-양성균 (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis)과 3개의 그람-음성균 (Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa), 그리고 진균인 Candida glabrata 에서도 높은 항균 활성을 보였으며 넓은 항균활성 스펙트럼을 나타내었다. 이를 바탕으로 화장품보존제로서의 적합성을 확인하였다. 또한 FK-13은 고온에서 분자의 열안정성을 보였으며 기존의 천연 한방화장품 방부제 및 화학보존제들과의 항균활성 비교 실험에서도 보다 월등한 항균활성 효능을 나타내었다. 따라서 FK-13 펩타이드는 인체 친화적이고 효과적인 항균활성을 나타내므로, 기존 화학보존제를 대체할 새로운 천연 화장품보존제로 적용이 가능할 것으로 판단된다.

• 한국자원식물학회지
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• 제37권2호
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• pp.110-119
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• 2024

본 연구는 꼬리진달래의 자원식물 개발을 위한 정보를 제공하고자 수행되었다. 꼬리진달래 신초 추출물의 폴리페놀 프로파일링을 통해 유용성분을 선발하고, 추출용매에 따른 유용성분 함량과 항산화 활성을 비교하였다. 꼬리진달래 신초 추출물에서 37개의 폴리페놀 화합물을 확인하였으며, chlorogenic acid, astragalin, myricetin, afzelin의 추출용매별 함량을 비교한 결과, chlorogenic acid의 함량은 에탄올 추출물에서 6.57±0.12 mg/g이었고, astragalin의 함량은 에탄올 추출물에서 2.29±0.02 mg/g, myricetin의 함량은 메탄올 추출물에서 4.77±0.06 mg/g, afzelin의 함량은 메탄올 추출물에서 0.10±0.01 mg/g이었다. 꼬리진달래 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량은 80.01±2.36 mg/g, 총 플라보노이드 함량은 78.08±3.44 mg/g이었다. 또한 꼬리진달래 메탄올 추출물의 DPPH radical 소거활성 IC₅₀값은 943.57±10.68 mg/L였으며, ABTS radical 소거활성 IC₅₀은 641.60±7.58 mg/L였다. 꼬리진달래는 유기용매 추출 시 유용성분과 항산화 활성이 높았고, 동일 속의 종들과 비교하여 높은 함량의 chlorogenic acid, astragalin, myricetin, afzelin을 함유하고 있어 향후 건강기능성 소재로의 개발이 가능할 것으로 판단된다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제30권4호
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• pp.716-728
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• 2023

감초의 항비만 소재로서 가능성을 확인하기 위해 고지방 식이로 유도된 마우스 모델과 3T3-L1 지방 전구세포의 지방세포 분화과정에 GUE의 효과를 평가하였다. GUE의 섭취는 고지방 식이로 인해 증가한 마우스 체중을 유의하게 감소시켰다. 또한, GUE 처리로 인해 3T3-L1 지방 전구세포의 지방세포 분화과정에 의해 증가한 지방구 형성이 효과적으로 감소하는 것을 확인하였다. 이런 억제 효과는 GUE가 지방세포 분화과정에서 증가한 PPARγ 및 C/EBPα의 발현을 효과적으로 억제하기 때문이며, 이는 지방 대사 조절 인자들의 발현억제에도 영향을 주었다. 또한, LC-Q-TOF-MS 분석을 통해 GUE 주요 생리활성 물질을 분석한 결과, liquiritigenin 배당체 및 licorice saponins를 포함한 12종의 주요 생리활성 물질들이 동정되었다. 이러한 결과들을 종합하여 볼 때, GUE의 항비만 효과는 우수한 생리활성을 가지는 phytochemical들에 의한 지방 대사 조절 인자들의 발현조절과 관련이 깊다고 판단되며, 감초의 비만을 포함한 대사성질환 예방 소재로서 활용 가치를 높이는데 유용할 것으로 생각된다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제30권3호
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• pp.191-199
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• 2000

Genomics is providing targets faster than we can validate them and combinatorial chemistry is providing new chemical entities faster than we can screen them. Historically, the drug discovery cascade has been established as a sequential process initiated with a potency screening against a selected biological target. In this sequential process, pharmacokinetics was often regarded as a low-throughput activity. Typically, limited pharmacokinetics studies would be conducted prior to acceptance of a compound for safety evaluation and, as a result, compounds often failed to reach a clinical testing due to unfavorable pharmacokinetic characteristics. A new paradigm in drug discovery has emerged in which the entire sample collection is rapidly screened using robotized high-throughput assays at the outset of the program. Higher-throughput pharmacokinetics (HTPK) is being achieved through introduction of new techniques, including automation for sample preparation and new experimental approaches. A number of in vitro and in vivo methods are being developed for the HTPK. In vitro studies, in which many cell lines are used to screen absorption and metabolism, are generally faster than in vivo screening, and, in this sense, in vitro screening is often considered as a real HTPK. Despite the elegance of the in vitro models, however, in vivo screenings are always essential for the final confirmation. Among these in vivo methods, cassette dosing technique, is believed the methods that is applicable in the screening of pharmacokinetics of many compounds at a time. The widespread use of liquid chromatography (LC) interfaced to mass spectrometry (MS) or tandem mass spectrometry (MS/MS) allowed the feasibility of the cassette dosing technique. Another approach to increase the throughput of in vivo screening of pharmacokinetics is to reduce the number of sample analysis. Two common approaches are used for this purpose. First, samples from identical study designs but that contain different drug candidate can be pooled to produce single set of samples, thus, reducing sample to be analyzed. Second, for a single test compound, serial plasma samples can be pooled to produce a single composite sample for analysis. In this review, we validated the issue whether the second method can be applied to practical screening of in vivo pharmacokinetics using data from seven of our previous bioequivalence studies. For a given drug, equally spaced serial plasma samples were pooled to achieve a 'Pooled Concentration' for the drug. An area under the plasma drug concentration-time curve (AUC) was then calculated theoretically using the pooled concentration and the predicted AUC value was statistically compared with the traditionally calculated AUC value. The comparison revealed that the sample pooling method generated reasonably accurate AUC values when compared with those obtained by the traditional approach. It is especially noteworthy that the accuracy was obtained by the analysis of only one sample instead of analyses of a number of samples that necessitates a significant man-power and time. Thus, we propose the sample pooling method as an alternative to in vivo pharmacokinetic approach in the selection potential lead(s) from combinatorial libraries.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제34권9호
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• pp.2760-2764
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• 2013

Geniposide is a biologically active ingredient of gardenia fruit. A liquid chromatography-tandem mass spectrometric method was developed and validated for the determination of geniposide in rat plasma. The plasma samples were pretreated by solid-phase extraction and introduced into a BDS Hypersil $C_{18}$ column ($50{\times}2.1mm$, $5{\mu}m$) for chromatographic separation. The mobile phase consisted of 0.1% formic acid and 0.1% formic acid in acetonitrile, and gradient elution was performed at a flow rate of 0.25 mL/min. For mass spectrometric detection, multiple reaction monitoring was performed via an electrospray ionization source in positive mode. The calibration curve for geniposide was linear ($r^2=0.997$) in the concentration range of $0.005-1{\mu}g/mL$. The intra- and inter-day accuracies and precisions fulfilled the required criteria (${\pm}15%$). The developed method was subsequently used for pharmacokinetic analysis of geniposide after oral administration to rats at a dose of 50 mg/kg. The mean maximum plasma concentration of geniposide was $0.68{\pm}0.29{\mu}g/mL$ at $0.44{\pm}0.13h$, and the mean area under the plasma concentration versus time curve was $1.46{\mu}g{\cdot}h/mL$.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제17권4호
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• pp.430-437
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• 2009

Metabolites of Soyasaponin I, a major constituent of soybean, by human intestinal microflora were investigated by LC-MS/MS analysis. We found four peaks, one parental constituent and three metabolites: m/z 941 [M-H]$^-$, m/z 795 [M-rha-H]$^-$, m/z 441 [aglycone-$H_2O$+H]$^+$, and m/z 633 [M-rha-gal-H]$^-$, which was an unknown metabolite, soyasapogenol B 3-$\beta$-D-glucuronide. When soyasaponin I was incubated with the human fecal microbial fraction from ten individuals for 48 h, soyasaponin I was metabolized to soyasapogenol B via soyasaponin III and soyasapogenol B 3-$\beta$-D-glucuronide or via soyasaponin III alone. Both soyasaponin I and its metabolite soyasapgenol B exhibited estrogenic activity. Soyasaponin I increased the proliferation, mRNA expression of c-fos and pS2, in MCF7 cells more potently than soyasapogenol B. However, soyasapogenol B showed potent cytotoxicity against A549, MCF7, HeLa and HepG2 cells, while soyasaponin I did not. The cytotoxicity of soyasapogenol B may prevent its estrogenic effect from increasing dose-dependently. These findings suggest that orally administered soyasaponin I may be metabolized to soyasapogenol B by intestinal microflora and that soyasapogenol B may express a cytotoxic effect rather than an estrogenic effect.

• 한국임상약학회지
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• 제21권3호
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• pp.224-227
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• 2011

Entecavir is a potent and selective guanosine analogue that has demonstrated a significant antiviral efficacy against hepatitis B virus (HBV). The aim of this study was to evaluate the safety and pharmacokinetic profile after a single dose of entecavir 1 mg administration in Korean healthy male subjects. Eight volunteers were enrolled. After a single dose of 1 mg entecavir was orally administered, blood samples were collected at specific time intervals from 0-168 hours. The plasma concentrations of entecavir were determined by LC-MS/MS. The pharmacokinetic parameters were determined from the plasma concentration-time profiles. The mean values for $AUC_{last}$ and $AUC_{inf}$ were $14.84{\pm}7.81ng{\cdot}hr/mL$ and $20.71{\pm}8.80ng{\cdot}hr/mL$, respectively. The mean value for $C_{max}$ was $9.19{\pm}4.91ng/ml$ and median value for $t_{max}$ was 0.58 hr. No adverse events were reported by subjects or found on analysis of vital signs or laboratory tests. The results are suggested to be useful in clinical trials of entecavir in Korean subject including bioequivalence study.