HPLC 및 electrospary mass spectrum으로부터 L-L dipeptide의 존제하에서 pepsin은 hexapeptide인 L-S-pNF-Nle-A-OMe를 가수분해하여 가수분해물외의 새로운 생성물을 합성하는 것이 확인되었다. 이 생성물은 254nm에서 p-nitro-Phe 잔기를 포함하는 peptide였다. 실험결과로부터 E(L-S-pNF)와 L-L 사이의 acyl transpeptidation에 의해 L-S-pNF-L-L가 생성됨을 뒷받침한다. 이러한 transpeptidation 결과는 product 저해실험에 의한 결과에 기초한 것과는 반대로 L-S-pNF가 해리되기전에 Nle-A-L-OMe가 먼저 한다는 것을 보여준다. 그리고, electrospray mass spectrum 으로부터 위에서 검출된 새로운 펩티드에 해당하는 peak (MW 636.1)을 얻었는데, 이는 새 펩티드의 생성을 확실히 증명하는 증거이다. 한편, Nle-A-L-OMe 생성에 대한 solvent isotope effect는 1.736$\pm$0.121이며 L-S-pNF는 2.28$\pm$0.184 그리고 L-S-pNF-L-L의 생성에는 inverse isotope effect로서 0.576$\pm$0.045였는데, 이는 상기 생성물 해리 순서를 확인시켜 준다. D$_{2}$에서 transpeptidation은 더 빠르기 때문에 isotopically-sensitive단계는 Nle-A-L-OMe해리후에 존재하는 것을 알 수 있다. 본 실험결과는, Rebholz and Northrop$^{1)}$ 및 Cho등의 $^{2)} iso-mechanism이론의 타당성을 제시한다.
고구마 경단배양에 의한 우량종묘 대량증식 과정에서 분화 및 생육에 미치는 생장조절제의 효과를 구명하기 위하여 실험을 수행하였다. 고구마 경단조직은 1 mEm/L 2,4-D 첨가된 MS배지에서 배양 40일경 배발생 캘러스가 형성되었다. 또한 형성된 배발생 캘러스는 0.1 mg/L GA$_4$ 첨가된 배지에 배양한 경우, 효과적으로 배발생 캘러스를 유지 및 증식이 가능하였으며, 배발생캘러스로부터 shoot 재분화는 0.1mg/L BA가 유효하였다. 체세포배로부터 shoot 재분화는 0.01 ngh BA와 0.01 mg/L GA$_4$ 혹은 0.1 mg/L BA와 0.01mg/L GA$_4$ 혼합배지에서 양호하였으며, 0.1-1 mg/L BA를 첨가된 배지에서는 배발생 캘러스 및 체세포배로부터 녹색의 단단한 캘러스가 형성되었다. 체세포배를 배양하여 얻어진 5 mm 크기의 shoot 정단을 재배양 시, 0.1 mg/L jasmonic acid 또는 0.01 mg/L brassnlolide가 첨가된 배지에서 소식물체의 생육이 가장 양호하였다.
상추의 자엽 조직을 GR 유전자가 도입된 A. tumefaciens LBA 4404와 2일간 공동배양후, carbenicillin 500mg/L, kanamycin 50mg/L NAA 0.1mg/L와 2iP 1.0 mg/L가 함유된 MS 재분화배지에 옳겨 약 4주후에 kanamycin 저항성 개체를 얻었다. 형질전환된 것으로 추정되는 식물체는 kanamycin 100mg/L가 함유된 MS선발배지에서 생존하였다. PCR 분석결과, GR 유전자가 형질전환체의 게놈상에 삽입되어 있음을 확인하였다. 형질전환체의 Southern blot 분석을 통하여 ECL-labelling된 GR 유전자와 동일한 것으로 판단되는 약 1.8 kb 위치에서 밴드를 확인할 수 있었다. RT-PCR 분석으로 GR 유전자가 전사됨을 확인할 수 있었다. 개화후 이들 개체의 종자를 받아 NPTII 유전자의 발현여부를 조사한 결과 R$_1$ 세대에서도 NPTII 유전자가 발현됨을 확인하였다.
The addition products of glutathione to ${\beta}$ -nitrostyrene derivatives were synthesized. ${\beta}$ -Nitrostyrene (1a), p-methyl-${\beta}$-nitrostyrene (1b), 3,4,5-trimethoxy-${\beta}$-nitrostyrene (1c), o-, m- and p-chloro-${\beta}$-nitrostyrene (1e, 1f, 1g) and o-, m- and p-methoxy-${\beta}$-nitrostyrene (1h, 1i, 1j) undergo addition reactions with glutathione to form S-(2-nitro-1-phenylethyl)-L-glutathione (5a), S-[2-nitro-1-(p-methyl)phenylethyl]-L-glutatione (5b), S-[2-nitro-1-(3', 4', 5'-trimethoxy)phenylethyl]-L-glutathione (5c), S-[2-nitro-1-(o-chloro)phenylethyl]-L-glutathione (5e), S-[2-nitro-1-(m-choro)phenylethyl]-L-glutathione (5f), S-[2-nitro-1-(p-chloro)phenylethyl]-L-glutathione (5g), S-[2-nitro-x-(o-methoxy)-phenylethyl]-L-glutathion e(5h), S-[2-nitro-x-(m-methoxy)phenylethyl]-L-glutathion e (5i), and S-[2-nitro-1-(p-methoxy)phenylethy])-L-glutathione (5j), respectively. The structure of adducts were identified by UV and IR-spectra, molecular weight measurement, and elemental analysis.
페놀수지 폐수는 41,000 mg/l 의 페놀과 2,800 mg/l 의 포름알데히드를 포함하고 있어 직접적인 생물학적 처리가 어렵다. 자연계에서 분리된 Candida tropicalis PW-51 은 100 mg/l 이하의 포름알데히드 존재하에서 1,000 mg/l 의 페놀을 분해하였으나 포름알데히드의 농도가 증가함에 따라 페놀분해는 저해되었다. 페놀수지 폐수를 1/40 희석하였을 때 페놀류 화합물 농도가 882 mg/l 이었는데, 회분배양 후 페놀농도는 81 mg/l로 약 91% 분해되었다. 폐수를 1/40, 1/20 희석한 후 C.tropicalis PW-51에 의해 생물학적으로 연속처리한 결과 페놀류 화합물은 92% 까지 분해되었다. 그러나 1/10 희석된 폐수에서는 초기 페놀류 화합물 농도가 2,875 mg/l로 높아 생물학적 처리가 이루어지지 않고 균체가 사멸하였다. 1/40, 1/20 희석된 페수의 생물학적 처리후 잔류 페놀류 화합물을 흡착처리한 결과 최종 처리수에서 페놀류 화합물의 농도는 1 mg/l 이하로 총 페놀제거효율은 99.9%에 달하였다.
본 연구는 하계육묘 시 Diniconazole 처리농도에 따른 토마토 접목묘의 생육과 묘소질에 미치는 영향을 조사하기 위해 수행되었다. Diniconazole 처리 농도는 0(무처리), 5, 10 및 $20mg{\cdot}L^{-1}$로 하였고, 접목 3일후에 1회 처리하였다. 대목은 무처리구에 비해 $5mg{\cdot}L^{-1}$ 및 $10mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서 짧았고, 접수는 $20mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서 유의하게 짧았다. 이에 따라 묘의 초장은 가장 높은 농도인 $20mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서 유의하게 짧았다. 묘의 엽면적은 무처리구에 비해 모든 처리구에서 적었는데 높은 농도 처리구일수록 그 경향이 뚜렷하였다. 특히, $20mg{\cdot}L^{-1}$처리구에서는 엽과 줄기 모두 유의하게 신장이 억제되었다. 묘의 엽 및 줄기 생체중은 무처구에 비해 $5mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서, 뿌리 생체중은 모든 처리구에서 유의하게 컸다. 묘의 각 기관별 건물중은 $5mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서 모두 유의하게 컸지만, $20mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서는 엽 건물중이 무처리구에 비해 크게 적었다. T/R률은 모든 처리구에서 무처리구보다 낮았다. 상대생장률은 무처리구에 비해 $20mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서, 엽면적률은 $5mg{\cdot}L^{-1}$ 및 $10mg{\cdot}L^{-1}$ 처리구에서 유의하게 낮았다. 따라서 토마토 접목묘의 하계 육묘 시 도장 억제를 통한 건전한 묘를 생산하고자 diniconazole를 이용할 때에는 $10mg{\cdot}L^{-1}$ 이하의 농도로 하여 사용하는 것이 적합할 것으로 생각된다.
소형의 담액 수경재배기를 이용하여 기본 배양액에 셀레늄(Se) 1mg $L^{-1}$과 계면활성제 PVA-95(polyvinyl alcohol-95) 1, 2, 4mg $L^{-1}$과 CLS(calcium lignosulfonate) 5, 25, 50, 100mg $L^{-1}$을 처리하여 청경채와 상추 식물체의 Se과 양이온 함량, 생육, 그리고 비타민 C 함량을 조사하였다. 생육은 처리간에 차이는 있지만 종류와 농도 별로 일정한 경향을 보이지 않았다. 총 비타민 C 함량은 두 작물 모두 모든 처리구에서 대조구에 비해 약간 증가하는 경향을 보였으나 유의성은 없었다. K 함량은 싱추의 경우는 일정한 경향이 없었지만, 청경채의 경우 Se 1+PVA-95 4mg $L^{-1}$ 처리구가 가장 높았고, Se 1+CLS 처리에서는 대조구에 비해 5mg $L^{-1}$ 농도에서는 증가하였지만 처리 농도가 증가할수록 감소하였다. Ca 함량은 두 작물 모두 Se 1+PVA-95와 CLS 처리에서 대조구에 비해 증가하였다. Mg 함량은 상추에서는 계면 활성제 처리에 의한 Mg 함량의 변화가 없었으며, 청경채에는 Se 1+CLS 25mg $L^{-1}$ 처리구가 대조구에 비해 증가하였고 기타 처리는 차이가 없었다. 식물체내 Se 함량은 상추에서는 계면 활성제 PVA-95 처리와 CLS 처리가 대조구에 비해 Se 함량이 모두 높았고, PVA-95 처리에서는 농도의 증가에 따라 Se 함량이 낮아졌으며, CLS 처리에서는 50mg $L^{-1}$ 까지는 높아졌지만 100mg $L^{-1}$에서는 낮아졌다. 청경채의 엽내 Se 함량은 계면활성제 PVA-95 처리가 큰 효과가 없었으나 CLS 25mg $L^{-1}$ 처리에서 현저히 증가되었다.
Lentinus edodes의 액체배양을 통하여 균사체 및 polysaccharide의 최적 생산조건을 조사하였다. 플라스크 배양을 통하여 검토된 균체량 및 polysaccharede 생성을 위한 최적 배지의 조성은 glucose 60 g/L, yeast extract 10 g/L, $KH_2PO_4$ 2.0 g/L, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 1.0 g/L이었다. 최대 균체량은 배양 10일째 11.01 g/L이었으며 최대 polysaccharide 생성량은 배양 6일째 1.64 g/L를 나타내었다. 생물반응기를 이용한 회분배양에서 균사체와 polysaccharide 생산량을 증가시키기 위하여 통기량을 조절하였다. 그 결과 통기량이 증가할수록 균체량과 polysaccharide의 생성량이 증가하였다. 결과적으로 통기량을 1.5 vvm으로 하여 배양하였을 때 배양 8일째 55.9 g/L의 균체량과 배양 7일째 7.34 g/L의 polysaccharide로 최대생성량을 얻을 수 있었다.
Chlorella vulgaris를 이용하여 기본배지에서 초기 주입농도 $0.7{\times}10^4\;cells/mL$ 상태에서 300시간 배양 후 $1.21{\times}10^5\;cells/mL$의 생체수를 얻었으며, 초기 cell 농도가 0.30g/L인 경우가 성장률이 $0.162g/L\;{\cdot}\;day$로 우수하였다. Glucose 초기농도가 2.00g/L인 경우 초기 cell 농도 0.025g/L에서 140시간 후 0.874g/L이 되었으며 비성장속도는 $0.243h^{-1}$을 나타내었고, 72시간내에 가스를 268mL를 생성하였으며 이후로는 수소 생성이 종료으나 순수 소소를 19.87mol% 함유하고 있었다. Chlorella vulgaris의 조성을 원소분석기로 분석한 결과 $C_{1.000}\;H_{1.774}\;N_{0.125}\;O_{0.557}$가 되었으며 이산화탄소 전환율은 $0.616cells/\;g\;CO_2$가 됨을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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