[Cu(L)](ClO4)2(1)(L:3,5,10,12-Tetramethyl-1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane) 착물을 합성하고 구조를 규명하였다. 이 착물은 단순결정, 공간군 P21/n, a=8.802(2)Å, b=13.339(6) Å, c=10.752(5) Å, β=111.02(4)˚, Z=2로 결정화 되었다. 이착물의구조는 최소자승법으로 정밀화 하였으며, 최종 신뢰도 R(Rw)값은 617개의 회석반점에 대하여 0.073및 0.142이었다. 이 착물의 결정구조는 평면사각구조와 trans-III형태를 갖는다.
본 실험은 Lactobacillus spp.와 Bacillus spp. 의 Salmonella typhimurium, E. coli 및 Listeria monocytogenes에 대한 억제활성과 송아지 분변 분리균주의 생장 및 억제활성의 특성을 알아보기 위해 실시되었다.Lactobacillus spp.와 Bacillus spp.의 병원성 세균 Salmonella typhimurium에 대한 억제활성은 Lactobacillus helveticus CU631이 가장 높았고, Bacillus spp.는 활성이 약하였다. 송아지 분변 분리균주를 동정한 결과 Lactobacillus pentosus CU13과 CU05, Pediococcus pentosaceus CUR02, Lactococcus lactis ssp lactis CUM14로 확인되었다. Lactobacillus rhamnosus CU02와 Lactobacillus pentosus CU13의 Listeria monocytogenes에 대한 억제활성에 영향을 미치는 배지성분과 첨가수준은 Tween 80 1.0%, peptone 3.0%, yeast extract 3.0%, glucose 3.0% beef extract 3.0%, NaCl 1.0~3.0%이며, whole cell과 세포벽 물질은 Listeria monocytogenes에 대하여 억제활성을 나타내었다. 억제 성향을 강하게 보인 균체 배양액을 80℃로 열처리한 결과 억제력은 나타나지 않았으나 catalase 및 Proteinase-K 처리는 억제활성에 영향을 미치지 않았다. 이 결과 억제활성 물질은 유기산에 의한 것으로 사료된다. Lactobacillus pentosus CU13과 Lactobacillus rhamnosus CU02의 21균주에 대한 억제 능력을 측정한 결과 병원성균주를 포함한 16균주에서 억제활성을 보였으나 5균주에서는 억제성향을 나타내지 않았다. Escherichia coli O157:H7을 감염시킨 mouse 중 Lactobacillus pentosus CU13을 접종한 경우 다소 체중 회복 현상이 나타났으나, Lactobacillus rhamnosus CU02을 접종한 경우 체중 회복이 빠르게 나타났다.
Ten bacteriocin-producing Enterococcus faecium strains with urease activity ($1.10-6.2nkat.mL^{-1}$) were isolated from the rumen of 2-8 weeks old calves. All strains were resistant aginst disodium arsenate at a minimal inhibition concentration - MIC $5g.L^{-1}$ and mercury chloride ($MIC=10-20mg.L^{-1}$). Eight strains were resistant against silver nitrate ($MIC=40-50mg.L^{-1}$) and three against antibiotics used. The resistance against six antibiotics was found in A23 strain. Values of adherence index ranged from 5.02 to 20.4 enterococci adhered per one epithelial cell of rumen wall. All isolates produced bacteriocins which inhibited the growth at least of one of five indicator organisms. The EF1 strain with a good affinity to the epithelial cell ($15.2{\pm}1.2$) produced bacteriocin substance with antimicrobial activity against grampositive and gramnegative indicator bacteria.
Goh, Teik Beng;Yian, Koh Rhun;Mordi, Mohd Nizam;Mansor, Sharif Mahsufi
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권14호
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pp.5659-5665
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2014
Background: To investigate the antioxidant value and anticancer functions of mitragynine (MTG) and its silane-reduced analogues (SRM) in vitro. Materials and Methods: MTG and SRM was analyzed for their reducing power ability, ABTS radical inhibition and 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazylfree radicals scavenging activities. Furthermore, the antiproliferation efficacy was evaluated using MTT assay on K 562 and HCT116 cancer cell lines versus NIH/3T3 and CCD18-Co normal cell lines respectively. Results: SRM and MTG demonstrate moderate antioxidant value with ABTS assay (Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC): $2.25{\pm}0.02$ mmol trolox / mmol and $1.96{\pm}0.04$ mmol trolox / mmol respectively) and DPPH ($IC_{50}=3.75{\pm}0.04mg/mL$ and $IC_{50}=2.28{\pm}0.02mg/mL$ respectively). Both MTG and SRM demonstrate equal potency ($IC_{50}=25.20{\pm}1.53$ and $IC_{50}=22.19{\pm}1.06$ respectively) towards K 562 cell lines, comparable to control, betulinic acid (BA) ($IC_{50}24.40{\pm}1.26$). Both compounds showed concentration-dependent cytototoxicity effects and exert profound antiproliferative efficacy at concentration > $100{\mu}M$ towards HCT 116 and K 562 cancer cell lines, comparable to those of BA and 5-FU (5-Fluorouracil). Furthermore, both MTG and SRM exhibit high selectivity towards HCT 116 cell lines with selective indexes of 3.14 and 2.93 respectively compared to 5-FU (SI=0.60). Conclusions: These findings revealed that the medicinal and nutitional values of mitragynine obtained from ketum leaves that growth in tropical forest of Southeast Asia and its analogues does not limited to analgesic properties but could be promising antioxidant and anticancer or chemopreventive compounds.
본 연구에서는 Rhodosporidium toruloides를 활용하여 비트 열수추출물의 중성지방 억제효과를 확인하고자 하였다. 대조구, 실험대조구, 비트 열수추출물, 30% 및 60% 에탄올 추출물을 첨가한 YPD 배지에서 배양한 유지효모의 중성지방의 함량은 각각 8.76, 3.43, 2.87, 3.16 및 3.64 mg/dL로 나타났으며, 유지 효모의 세포수는 각각 10.48, 8.46, 12.40, 12.80 및 $8.24{\times}10^3cell/mL$로 나타났다. 대조구, 실험대조구, 0.02, 0.1 및 0.5% 비트 열수추출물을 첨가한 유지효모의 총 지질 함량은 각각 112.29, 38.90, 147.87, 211.36 및 291.89 mg/g로 나타났으며, 유지효모의 중성지방의 함량은 각각 6.02, 2.83, 2.38, 1.37 및 0.73 mg/dL로 나타났다. 대조구, 실험대조구, 0.02, 0.1 및 0.5% 비트 열수추출물의 첨가 농도가 높아짐에 따라서 유지효모내 소량의 형광이 발현됨을 확인하였다. 실험대조구, 0.02, 0.1 및 0.5% 비트 열수추출물을 첨가한 유지효모의 세포수 증가율은 대조구에 비해 각각 -4, 21, 82 및 103%로 증가하였다. 유리지방산과 총 카로티노이드 함량은 비트 열수추출물의 첨가 농도에 따라 농도의존적으로 증가하였다.
An enzymatic reaction system was developed and optimized for bioconversion of resveratrol from glucose. Liquid enzyme extracts were prepared from Alternaria sp. MG1, an endophytic fungus from grape, and used directly or after immobilization with sodium alginate. When the enzyme solution was used, efficient production of resveratrol was found within 120 min in a manner that was pH-, reaction time-, enzyme amount-, substrate type-, and substrate concentration-dependent. After the optimization experiments using the response surface methodology, the highest value of resveratrol production (224.40 μg/l) was found under the conditions of pH 6.84, 0.35 g/l glucose, 0.02 mg/l coenzyme A, and 0.02 mg/l ATP. Immobilized enzyme extracts could keep high production of resveratrol during recycling use for two to five times. The developed system indicated a potential approach to resveratrol biosynthesis independent of plants and fungal cell growth, and provided a possible way to produce resveratrol within 2 h, the shortest period needed for biosynthesis of resveratrol so far.
Boo, Hee Ock;Park, Jeong Hun;Kim, Hag Hyun;Kwon, Soo Jeong;Lee, Moon Soon
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.292-292
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2017
This study was conducted to evaluate the effect of anti-obesity and antioxidant enzyme activities in vitro by different solvent fractions from the roots of Codonopsis lanceolata. The cytotoxicity of different solvent fractions of C. lanceolata on 3T3-L1 preadipocytes were evaluated using the MTT assay, the rate of cell survival progressively decreased in a dose-dependent manner. Butyl alcohol fraction at $200{\mu}g/mL$ exhibited a pronounced cytotoxic effect (75.73%) on 3T3-L1 cell comparable to that of the hexane fraction (79.82%), methylene chloride fraction (84.02%), ethyl acetate fraction (87.62%) and DW fraction (86.30%) at the same concentration. The Oil Red O solution was used to determine whether different solvent fractions of C. lanceolata induce adipocyte differentiation in 3T3-L1 preadipocytes. Confluent 3T3-L1 cells were treated with $50{\mu}g/mL$ concentration of solvent fraction extracts from C. lanceolata. Inhibitory degree of lipid accumulation against solvent fraction extracts showed a significant level compared with the control. Both lipid accumulation and adipocyte differentiation showed relatively high effect on methyl chloride fraction. The root extract of C. lanceolata had the highest SOD enzyme activity of 84.5% in ethyl acetate partition layer and while water partition layer of diploid showed the lowest SOD enzyme activity of 57.9%. The activity of CAT, APX and POD showed a significantly higher activity in ethyl acetate partition layer compared with the other fraction. These results suggested that the roots of C. lanceolata may assist in the potential biological activity on anti-obesity and antioxidant capacity.
Several studies report the anticancer effect of Glycyrrhiza glabra (G. glabra), Glycyrrhiza uralensis (G. uralensis) and their compounds. However, the anticancer effect of Glycyrrhiza cultivar roots are limited. In this study, we compared the anticancer effect of Glycyrrhiza cultivar (Wongam and Shinwongam) extracts with G. glabra and G. uralensis extracts in breast cancer cell lines. Freeze dried Glycyrrhiza root extracts were dissolved in cell culture media at 2 mg/mL and filtered by $0.2{\mu}m$ filter. Glycyrrhiza root extracts were serially diluted at the concentrations of $10{\mu}g/mL$, $100{\mu}g/mL$, $200{\mu}g/mL$, $400{\mu}g/mL$, $800{\mu}g/mL$, $1000{\mu}g/mL$ and $2000{\mu}g/mL$. MCF-7 and MDA-MB-231 breast cancer cells were treated with different concentrations of Glycyrrhiza root extracts and the cell viability was measured using MTT assay. In MCF-7 cells, G. glabra showed no significant difference with Wongam and showed significant difference with Shinwongam at $1000{\mu}g/mL$ (G. glabra 101.2% and Shinwongam 82.68%) and $2000{\mu}g/mL$ (G. glabra 83.07% and Shinwongam 54.05%). G. uralensis showed significant difference with Wongam at $2000{\mu}g/mL$ (G. uralensis 66.48% and Wongam 95.02%) and showed no significant difference with Shinwongam. In MDA-MB-231 cells, G. glabra showed no significant difference with both Wongam and Shinwongam. G. uralensis showed significant difference with Wongam at $2000{\mu}g/mL$ (G. uralensis 72.59% and Wongam 93.47%) and showed no significant difference with Shinwongam. In conclusion, the current study demonstrated that G, glabra and G. uralensis compared with Wongam, and Shinwongam at low concentrations ($10{\mu}g/mL{\sim}800{\mu}g/mL$) display similar cytotoxic potency.
This study determined the effect of light intensity and photoperiod on the dry cell weight and total amount of carotenoids in four isolates of purple non-sulfur bacteria obtained from shaded and exposed microhabitats of a mangrove ecosystem in Kota Kinabalu, Sabah, Malaysia. The initial isolation of the bacteria was carried out using synthetic 112 medium under anaerobic conditions (2.5 klx) at $30{\pm}2^{\circ}C$. On the basis of colony appearance, cell morphology, gram staining, motility test, and 16S rRNA gene sequencing analyses, all four bacteria were identified as Afifella marina. One of the bacterial isolates, designated as Af. marina strain ME, which was extracted from an exposed mud habitat within the mangrove ecosystem, showed the highest yield in dry cell weight ($4.32{\pm}0.03g/l$) as well as total carotenoids ($0.783{\pm}0.002mg/g$ dry cell weight). These values were significantly higher than those for dry cell weight ($3.77{\pm}0.02g/l$) and total carotenoid content ($0.706{\pm}0.008mg/g$) produced by the isolates from shaded habitats. Further analysis of the effect of 10 levels of light intensity on the growth characteristics of Af. marina strain ME showed that the optimum production of dry cell weight and total carotenoids was achieved at different light intensities and incubation periods. The bacterium produced the highest dry cell weight of 4.98 g/l at 3 klx in 72 h incubation, but the carotenoid production of 0.783 mg/g was achieved at 2.5 klx in 48 h incubation. Subsequent analysis of the effect of photoperiod on the production of dry cell weight and total carotenoids at optimum light intensities (3 and 2.5 klx, respectively) revealed that 18 and 24 h were the optimum photoperiods for the production of dry cell weight and total carotenoids, respectively. The unique growth characteristics of the Af. marina strain ME can be exploited for biotechnology applications.
토끼 바이러스성 출혈증의 원인체를 실험 토끼에 접종하여 증식을 유도하고 간장에서 hematoxylin & eosin 염 색 에서 조직학적 진단과 세포내 viral RNA의 소재를 결정하기 위해 post-unicryl 포매한 block의 절편을 사용하여 단 염색과 전자현미경적 in situ hybridization을 시도하였다. 토끼 출혈증 viral RNA의 보합 결합에 이용하는 probe는 4717에서 4800(84bases)까지 oligonucleotide를 5'말단에 biotin-CE phosphoramidite로 표지하여 사용하였다. 보합결합물의 증명은 신호 표지로서 antibiotin antibody-l0nm gold를 사용하였으며, hybridization이나 증명은 기존 protocol에서 약간의 변법을 사용하였다. 0.02% glutaraldehyde에서 고정하고 unicryl resin 포매한 표본, biotinylated oligonucleotide probe, antibiotin antibody-l0nm gold로 실험한 결과 증강된 신호를 얻을 수 있었다. 특히 전처리를 생략하므로써 실험 과정을 간단하게 하여 신속한 결과를 얻을 수가 있었다. 전자현미경 in situ hybridization을 통하여 토끼 출혈증 바이러스의 주요 표적은 간세포로 감염 세포의 세포질 내 미토콘드리아와 핵 사이에서 immune gold입자가 뚜렷하게 표지 됨으로서 viral RNA를 증명할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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