Prophage cured strain derivatives from Luctobacillirs araei YIT 9018 were isolated from thermoinducible mutant of the parent lysogenic strain. Two thermoinducible mutants were isolated from L. casei YIT 9018 strain treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine. Prophage cured strains were selected after heat induction of thermoinducible strains at $42^{\circ}C$ for 30 min in MRT medium containing anti- 4 FSV serum. The prophage cured strains, L. casei HYM 1213 and L. casei HYM 4024, could be used an indicator strain for temperate phage $\phi$ FSW. The growth, lactic acid producing ability and carbohydrates fermentation of L. casei HYM 1213 were similar to the parent L. cmei YIT 9018 strain, but A. casei HYM 4024 was not. One of the prophage cured strain, L. cmei HYM 1213, could be used industrially .to produce lactic acid beverages because this strah could not induce the virulent phage$\phi$FSV. The physiological characterization of L. casei HYM 1213 strain was similar to the parent L. casei YIT 9018 strain.
Lactobacillus casei HY 2782, prophage cured strain was characterized to be stable as much as L casei YIT 9018, parent strain. By southern hybridization, it was confirmed that the temperate phage was incorporated in chromosomal DNA of L. casei YIT 9018 as a prophage. It was also proved that the prophage was cured from chromosomal DNA of L casei HY 2782. The growth rate, lactic acid producing ability, carbohydrates fermentation, and enzymatic activity of L. casei HY 2782 were found to be similar to those of L. casei YIT 9018. When L casei HY 2782 was used as a host, the multiplicity of infection (M.O.I.) of the temperate phage for L. casei HY 2782 was 1.0~5.0. Restriction enzyme analysis of pLC90 plasmid from L. casei HY 2782 was shown that the size was an approximately 68.22 kb. The plasmid profiles, genomic DNA patterns, and cellular fatty acids composition of L. casei HY 2782 were similar to those of L casei YIT 9018. And the major fatty acids composition of these strains were C$_{14;0}$,C$_{16;1}$, C$_{16;0}$, C$_{18;1}$ and C$_{19;cyclo-}$ 10 sets of arbitrary primer in the PCR were screened to find differentiation against two strains of L. casei. Among them, b$_{5}-1/17-1 primer was produced an approximately 1.3 kb DNA band of only L casei YIT 9018. And b$_{5}-2/17-2 primer was produced an approximately 1.0 kb DNA band of only L casei HY 2782.
In order to evaluate the aptness for the preparation of liquid-yogurt, microbiological properties of 8 Lactobacilli isolated from 7 Korean liquid-yogurts were investigated. To accelerate acid-producing ability in skim milk, L. bulgaricus D, L. casei A and L. casei E need to supply with glucose, and L. Casei A and L. csaei E also need milk-protein hydrolyzate, but L. jugurti B, L. jugurti C, L. jugurti G, L. helveticus F and L. acidophilus B did not need those supplements. In cultivation in skim milk supplemented with glucose, L. jugurti B, L. jugurti C, L. jugurti G. L. helveticus F and L. bulgaricus D showed rapidity in acid development and weakness in cell viability, but L. acidophilus B, L. casei A and L. casei E showed slowness in acid development and highness in cell viability. Liquid-yogurts made by L. casei A or L. casei E had no sedimentation during storage but those made by L. jugurti B, L. jugurti C, L. jngurti G, L. helveticus F, L. bulgaricus D, or L. acidophilus B had much sedimentation. In sensory evaluation, Liquid-yogurts made by L. casei A or L. casei E had good response but those made by L. jugurti B, L. jugurti C, L. jugurti G, L. helveticus F, L. bulgaricus D or L. acidophilus B did not. Among 8 Lactobacilli examined, L. casei A and L. casei E were thought to have more suitable properties for the preparation of liquid-yogurt though they required a long period of cultivation.
Lactobacillus casei IFO 3012 and Kluyveromyces fragilis(KFCC 35458) were cultured together in Soymilk to investigate the growth characteristics and the conditions suitable for acid Production. L. casei produced more amount of acid rapidly when cultured with K. fragilis in soymilk than when cultured singly. The optimum conditions for acid production by the mixed cultures of L. casei and K. fragilis were achieved with a temperature of $35-37^{\circ}C$, a 1:5-1:9(O.D 660) ratio of L. casei to K. fragilis at inoculum, a 1.0 level of sucrose fortification or a 2.0% level of skim milk powder fortification and a culture time of 24hr. Under these conditions the amounts of acid produced by the single culture of L. casei and the mixed cultures with K. fragilis were 0.31% and 0.44% in soymilk, 0.43% and 0.97%, respectively, in soymilk fortified with 1.0% level of sucrose. These indicate that the amount of acid produced by mixed cultures is about 1.42 fold greater in soymilk and about 2.26 fold greater in soymilk fortified with 1.0% level of sucrose than that produced by the single culture of L. casei. The amount of acid produced in soymilk fortified with 2.0% level of skim milk powder was 1.0 level for both of the single culture of L. casei and the mixed cultures of L. casei and K. fragilis after 24hr incubation. In soymilk fortified with skim milk power less than 1.5 the mixed culture with K. fragilis showed higher content of acid than the single culture of L. casei only.
Kim, Hee-Jin;Choi, Jae-Kyoung;Lee, Kyung-Min;Im, Jung-Hyun;Eom, Seok-Jin;Kim, Geun-Bae
Food Science of Animal Resources
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v.29
no.5
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pp.619-626
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2009
As a trial for the development of a new starter culture for yogurt products, more than two hundred lactic acid bacteria strains were isolated from raw milk and healthy human feces. The strains that showed excellent growth and acid production ability in the 10% skim milk media were selected and identified as Lactobacillus casei through the API carbohydrate fermentation pattern and 16S rDNA sequence analysis. L. casei CU2604 was further investigated for its physiological characteristics as a starter culture compared with a commercial strain. The CU2604 strain showed good acid production and growth characteristics in milk, which were comparable to those of the L. casei Shirota strain. Despite the fact that both these strains displayed the same sugar fermenting pattern and PFGE band pattern, and had similar growth characteristic in milk, L. casei CU2604 exhibited different fatty acid composition in the cell wall, showed more tolerance to bile and to pH, and presented better growth inhibition activity against pathogenic bacteria. Based on these results, the L. casei CU2604 strain holds great promise for use as a novel and efficient starter culture in the production of yogurt. Additional studies on the probiotic characteristics of this strain are currently being conducted.
Effects of feeding seven strains of Lactobacillus spp. on the level of cell glutathione sulphydryl (GSH) in spleen, liver and erythrocyte of the ICR mice and on the level of immunoglobulin M in the spleen were determined. The level of cell glutathione sulphydryl in the spleen was dependent on the strain of Lactobacilli, it was significantly higher in the mice fed with L. casei CU 001, L. rhamnosus CU 02, L. acidophilus NCFM and L. casei YIT9018 (p>0.05). The level of cell glutathione sulphydryl in the liver increased in the mice fed with L. casei YIT9018, L. acidophilus NCFM, L. casei CU 001 (p>0.05), the level of glutathione sulphydryl of the erythrocyte showed significantly higher value than control mice when fed with L. acidophilus NCFM, L. casei YIT9018, L. casei CU 001 (p>0.05). The level of immunoglobulin M in the spleen of ICR mice expressed as the plaque count revealed significantly higher value than the control mice when fed with L. casei CU 001, L. acidophilus NCFM and L.casei YIT 9018.
Kim, Gyung-Tae;Lee, Jeong-Jun;Suh, In-Young;Na, Seog-Hwan;Baek, Young-Jin
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.19
no.2
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pp.147-152
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1991
In order to study effect of the phage ${\phi}$ FSV on the growth of lactic acid bacteria, Lactobacillus casei YIT 9018(wild type strain with prophage) or L. casei HYM 1213 (prophage cured strain) was infected with various concentrations of phage ${\phi}$ FSV (called Lac S21) or wild type virulent phage (called Lac J-1). When L. casei YIT 9018 was infected with Lac S21 under the concentration of $6.0{\times}10^6$ pfu/ml, the growth and lactic acid production of the strain were normal and the number of phages decreased. But L. casei HYM 1213 was susceptible to Lac S21. Regardless of the concentration of the phage infection, the number of phages increased rapidly into $10^9$ to $10^{10}$ pfu/ml at 2 day cultures and was maintained $10^7$ to $10^9$pfu/ml phage until 6 day cultures. The lactic acid production of L. casei HYM 1213 infected with Lac S21 was abnormal. Therefore, phage ${\phi}$ FSV had an evil effect on growth of L. casei HYM 1213, but not L. casei YIT 9018. On the other hand Lac J-1 caused abnormal fermentation to either L. casei YIT 9018 or L. casei HYM 1213.
Lactobacillus casei, one of the most widely used probiotics, has been reported to alleviate multiple diseases. However, the effects of this species on intestinal diseases are strain-specific. Here, we aimed to screen L. casei strains with inflammatory bowel disease (IBD)-alleviating effects based on in vitro physiological characteristics. Therefore, the physiological characteristics of 29 L. casei strains were determined, including gastrointestinal transit tolerance, oligosaccharide fermentation, HT-29 cell adhesion, generation time, exopolysaccharide production, acetic acid production, and conjugated linoleic acid synthesis. The effects of five candidate strains on mice with induced colitis were also evaluated. The results showed that among all tested L. casei strains, only Lactobacillus casei M2S01 effectively relieved colitis. This strain recovered body weight, restored disease activity index score, and promoted anti-inflammatory cytokine expression. Gut microbiota sequencing showed that L. casei M2S01 restored a healthy gut microbiome composition. The western blotting showed that the alleviating effects of L. casei M2S01 on IBD were related to the inhibition of the NF-κB pathway. A good gastrointestinal tolerance ability may be one of the prerequisites for the IBD-alleviating effects of L. casei. Our results verified the efficacy of L. casei in alleviating IBD and lay the foundation for the rapid screening of L. casei strain with IBD-alleviating effects.
As a first step for developing Lactobacillus strains capable of fermenting starch directly, the $\alpha$-amylase gene (amyL) from Bacillus licheniformis (Kim et al., 1988. Kor. J. Appl. Microbiol. Bioeng. 16: 369-373) was introduced into Lactobacillus casei strains and the level of $\alpha$-amylase expression in transformants was examined. 3 kb EcoRI fragments encompassing amyL were subcloned into the suitable lactococcal cloning vectors (pSA3, pMG36e, and p1L2530) and then recombinant plasmids were introduced into E. coli and L. casei strains by electroporation. Only one recombinant plasmid, $pIL2530\alpha$ was able to transform few L. casei strains tested at low efficiencies. The transformation efficiencies with the plasmid into L. casei YIT 9018 and L. casei A Tee 4646 were less than $10^2/\mu$ g pIL2530\alpha$. The level of amylase activities in L. casei was five to ten-fold lower than that in E. coli cells. $p1L2530\alpha$ was stably maintained in Lactobacillus strains in the presence of Em (5 $\mu $g/ml) but without antibiotic selection, it was unstable so more than 95$%$ of cells lost plasmids after a week of daily subculturing.
Young Jin Baek;Hyeong Suk Bae;Young Kee Kim;Min Yoo;Hyun Uk Kim
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.14
no.4
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pp.319-324
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1986
After intraspecific fusion of Lactobacillus casei protoplasts, the recombinants have been studied for their lactose utilization, protease activity and phage resistance. L. casei C-M phenotypes constituted 46% of the fused cells when tested against phages, and L. casei 3-M phenotypes 42% of the fused cells, and 12% of the recombinants developed the resistance to both parent types of phages. The acid production and proteolytic activity of recombinants evidenced the similar trends. There was no difference in Hind III digests of plasmid DNA between parent cells and recombinants, but the reconlbinant cells were found to possess only one type of plasmid, either of 1. casei C-M or of L. casei 3-M.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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