The optimum medium composition for the production of L-tryptophan with Klebsiella pnuemoniae pheA tyrA trpE trpR/pSC 101-trp$^{+}$ and the effect of precusors in the optimum medium were studied. The specific growth rate in the optimum medium was almost the same as that in the basal medium, the former showing 1.01 and the latter 1.07 hr $$^{-1}$, but the produced tryptophan was increased 45% in the optimum medium. The maximum amount of produced tryptophan was 159 mg/l within 14 hours. Tryptophan production was ceased by casamino acid addition over 4 g/l in medium, but cell maSS increased with its addition. Indole and anthranilate as precusors had toxic effect on growth and tryptophan production at experimented concentration range (over 20 mg/l), but L-serine had good effect on tryptophan production, resulting in 175 mg/l tryptophan within 14 hours.
hTATl에 의해 수송되는 방향족 아미노산들의 수송특성을 밝히기 위해 hTATl의 cRNA를 미세주입한 Xenopus laevis oocyte에서 hTATl에 의 해 유도되는 방향족 아미노산의 up-take를 여러 조건 하에서 관찰하였긴. hTATl은 L-[$^{14}$ C]tryp-tophan의 uptake를 유도하였으며, 그 uptake는 $Na^{+}$-과 Cl$^{-}$-비 의존적이었다. hTATl은 L-($^{14}$ C)tryptophan의 uptake를 시간의 존적으로 유도함을 알 수 있었다. hTATl에 의한 L-($^{14}$ C) tryptophan의 uptake는 방향족 아미노산인 phenylalanine, tyrosine 및 tryptophan에 의해서 억제되었으며 , hTATl에 의한 아미노산들의 uptake 실험에서 L-($^{14}$ C)phenylalanine, L-($^{14}$ C)tyrosine 및 L-($^{14}$ C)tryptophan의 수송을 확인하였다 hTATl에 의 한 L-($^{14}$ C)tryptophan의 uptake는 포화되었으며, Km치는 452.2$\pm$27.8 UM, V$_{max}$ 값은 2.1 $\pm$0.3 pmol/oocyte/min 이었다. L-($^{14}$ C)tyrosine 및 L-[$^{14}$ C]phenylalanine의 Km치는 각각 636.3$\pm$59.4 UM과 740.5$\pm$96.7 HM이었다. 실험용액의 pH 5.5에서 8.5까지의 변화는 hTATl에 의한 L-[$^{14}$ C]tfpto- phan의 uptake에 별다른 영향을 미치지 못하였다. hTATl의 CRNA를 미 세주입한 oocyte에서 배양시간 의존적 인 L-($^{14}$ C) tryptophan의 efflux를 볼 수 있었으며, 이 efflux는 oocyte 외 용액의 tryptophan존재 유무에는 영향을 받지 않았다. 따라서 본 연구의 결과로 hTATl이 상피세포로부터 혈류로의 방향족 아미노산의 수송에 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
The effects of daily dietary Bacillus subtilis (Bs), and adding L-tryptophan, fructan, or casein to fecal fermentation broths were investigated as means to reduce the production of noxious gas during manure fermentation caused by ammonia, hydrogen sulfide ($H_2S$), and 3-methylindole (skatole). Eighty swine ($50.0{\pm}0.5kg$) were equally apportioned to an experimental group given Bs in daily feed, or a control group without Bs. After 6 weeks, fresh manure was collected from both groups for fermentation studies using a $3{\times}3$ orthogonal array, in which tryptophan, casein, and fructan were added at various concentrations. After fermentation, the ammonia, $H_2S$, L-tryptophan, skatole, and microflora were measured. In both groups, L-tryptophan was the principle additive increasing skatole production, with significant correlation (r = 0.9992). L-tryptophan had no effect on the production of ammonia, $H_2S$, or skatole in animals fed Bs. In both groups, fructan was the principle additive that reduced $H_2S$ production (r = 0.9981). Fructan and Bs significantly interacted in $H_2S$ production (p = 0.014). Casein was the principle additive affecting the concentration of ammonia, only in the control group. Casein and Bs significantly interacted in ammonia production (p = 0.039). The predominant bacteria were Bacillus spp. CWBI B1434 (26%) in the control group, and Streptococcus alactolyticus AF201899 (36%) in the experimental group. In summary, daily dietary Bs reduced ammonia production during fecal fermentation. Lessening L-tryptophan and increasing fructan in the fermentation broth reduced skatole and $H_2S$.
An easy and convenient synthetic route to (S)-2-hydroxy-2'-(3-phenyluryl-benzyl)-1,1'-binaphthyl-3-carboxaldehyde (1), capable of recognizing tryptophan by fluorescence has been developed. The binol carboxaldehyde 1 exhibited a high selectivity to L-tryptophan over other examined L-${\alpha}$-amino acids such as alanine, phenylalanine, glutamine, arginine, lysine, serine, threonine, aspartat, valine, histidine and cysteine, with a fluorescence "turn-on" signal. In addition, 1 displayed chiral discrimination with good enantioselectivity toward L-tryptophan over D-tryptophan through different fluorescence enhancement factors.
Claviceps spp.는 tryptophan함유배지에서 적갈색 색소를 형성한다. D.L.-tryptophan$[side\;chain-3^{14}C]$를 배지에 첨가하였을 때 $^{14}C-labeled$ pigment와 constant specific radioactivity를 갖는 5-hydroxytryptophan을 재결정 분리하였다. 동시에 $^{14}C-labeled$ 5-hydroxytryptophan으로 같은 실험을 행한 결과, tryptophan 보다 4배 이상, 색소물질로 주입되는 것을 관찰할 수 있었다. 한편, UV-spectrum 및 fluorometric analysis등에 의하여 배지중 5-hydroxytryptophan이 생합성되는 것을 확인할 수 있었다. tryptophan에서 출발하는 또 하나의 ergot pigment 생합성경로는 곰팡이 생육배지중에서 40pmde/mg protein 농도의 cytochrome p-450을 분리 정제할 수 있어 tryptophan이 hydroxylation되어 5-hydroytryptophan으로 전환하는 효소학적 반응으로 검정되어 hydroxylation반응이 우선하는 기작에 의한 것임을 알 수 있다.
L-트립토판이 충족된 사료에 0.015%의 L-트립토판이 더 첨가된 사료를 이용종계 PS(Hubbard) 1768수에 34주령부터 52주령까지 133일간 급여하여 산난율, 종난율, 수정률, 규격병아리수를 조사하여 대조사료를 급여한 1105수의 값들과 비교하였다. L-트립토판을 급여한 종계는 급여개시 후 7주간인 피크산란기에는 대조사료를 급여한 것과 비슷한 산난율을 보였으나, 피크기 이후 84일(41-52주령)간과 급여중지후 28일간(53-56주령)에는 대조사료를 급여한 것에 비해서 유의하게(P<0.05) 높은 산난율을 보였다. 종난율도 피크기 이후와 급여중지후의 조사기간에 L-트립토판을 급여한 것에서 대조사료를 급여한 것보다 유의하게 (P<0.01) 높았고, 실험사육 전기간의 평균종난율도 L-트립토판급여에 의해서 유의하게 (P<0.05) 높았다. 한편 산난율과 종난률의 변동률은 시험사료를 급여한것에서 대조구의 값들보다 일반적으로 낮았다. 수정률과 부화율은 L-트립토판급여의 영향이 관찰되지 않았으나, 규격병아리수는 L-트립토판을 급여하면 대조에 비해서 유의하게 (P<.05) 높았다. 그리고 수정률, 부화율 및 규격병아리수에 대한 변동률도 L-트립토판을 급여하면 일반적으로 낮아졌다. 이상과 같이 L-트립토판을 그 요구량 이상으로 첨가한 사료를 급여하면 종란율과 규격병아리수가 높아진다는 것을 나타내고 있다.
Ha, Manh Tuan;Park, Se Eun;Kim, Jeong Ah;Woo, Mi Hee;Choi, Jae Sue;Min, Byung Sun
Natural Product Sciences
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제28권3호
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pp.138-142
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2022
Alzheimer's disease (AD) is the most common age-related neurodegenerative disease in industrialized countries. It is estimated that about 47 million people living with dementia and the number of cases will be tripled by 2050. However, the exact mechanism of AD is not known, and full therapy has still not been found. Various tryptophan-derived alkaloids have been reported as promising agents for the treatment of AD. In the present study, a series of tryptophan-derived alkaloids were isolated and characterized from the methanol extract of Hedera rhombea fruit. Based on the analysis of their observed and reported spectroscopic data, their structures were identified as N-[4'-hydroxy-(E)-cinnamoyl]-L-tryptophan (1), N-[3',4'-dihydroxy-(E)-cinnamoyl]-L-tryptophan (2), N-[4'-hydroxy-(E)-cinnamoyl]-L-tryptophan methyl ester (3), and N-[3',4'-dihydroxy-(E)-cinnamoyl]-L-tryptophan methyl ester (4). These compounds were screened for anti-Alzheimer activity via their inhibition of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) enzymes in vitro. As a result, compounds 3 and 4 showed moderate BChE inhibition with IC50 values of 86.9 and 78.4 μM, respectively, compared to those of the positive control [berberine (IC50 = 11.5 μM)]. However, all four compounds did not show significant inhibition of the AChE enzyme. This is the first time, the AChE and BChE inhibitory activities of these tryptophan-derived alkaloids were investigated and reported.
유전자 조작된 Klebsiella pnuemonia를 이용하여 트립토판 생산을 위한 최적 조건 및 플라스미드 안정성에 대한 연구를 수행하였으며, 최적온도는 $37^{\circ}C$, 최적온도에서의 비증식속도는 1.05$h^{-1}$로 측정되었다. 포도당을 기질로 사용하여 첨가회분배양 36시간 후의 트립토판 농도는 0.175g/l 이었으며, 이 결과는 다른 회분배양이나 플라스크 배양에 비해 1.2 및 1.6배 증가한 수치이다. 첨가회분배양에서의 균주안정성은 플라스크에서의 연속 교대 배양에서는 95%가 유지되었으나 첨가 회분배양에서는 50%만이 유지됨을 측정했다.
옥수수의 5-methyltryptophan 저 항성 돌연변이 주(MR1)로부터 anthranilate synthetase(AS)와 tryptophan synthetase(75)의 특성을 분석하였다. 대조구 식물로써 사용한 옥수수 품종 당진의 순계와 저항성주에 있어서 AS와 75의 효소 활성은 5-MT를 포함하지 않은 MS기본배지에서 생장시켰을 때는 차이를 보이지 않았다. 그러나, 25mg/L의 5-MT를 포함한 MS배지에서 생장한 MR1에 있어서 AS의 활성은 대조구보다 2배 높았다. 또한, 4mg/L의 L-tryptophan을 처리 했을때의 AS의 활성은 50% 저해 되었다. MR1의 조추출물로부터 대조구와 동일한 활성저해율을 나타내기 위해서는 약 4배의 아미노산이 필요하였다. MR1의 75활성은 대조 식물보다 4배가 더 높았다. 그리 하여 tryptophan synthetase B subunit (TSB)를 encoding하는 유전자를 cloning하여 염기배열을 결정 하였다. TSB유전자는 상이한 기관으로부터 cloning된 TSB와 높은 상동성을 보였으며, 모든 발육단계에서 발현하였다. 띠orthern hybridization분석에서 MR1의 TSB발현량은 대조식물보다 높게 나타났다
Tryptophanase를 이용하여 트립토판 합성시 인돌의 효소활성 저해를 억제하기 위하여 유가식 조업, 유기용매 이상계의 사용, 그리고 cyclodextrin의 첨가등에 대하여 연구하였다. 효소 농도가 0.5mg/ml일때 인돌 농도 0.4mM 부근에서 트립토판 생성이 가장 빨랐으며 그 이상에서는 효소활성이 심한 저해를 받았다. 초기 인돌 농도가 20mM일 때는 27시간 반응후 인돌의 전환율이 20인데 비하여 반응기내 인돌 농도를 5mM 이하로 유가식 조업을 하였을 때 전환율이 80%로 향상되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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