미생물 다당류중 viscosifier를 생산하는 세균을 분리하고 그 특성을 조사하였다. 본 세균은 Enterobacter agglomerans로 동정되었으며, 다당류 생산을 위한 조건은 glucose 25 g/ι, peptone 2.0 g/$\ell$, yeast extract 0.5 g/$\ell$, KH$_2$PO$_4$1g/$\ell$, MgSO$_4$.7$H_2O$ 1g/$\ell$, CaCO$_3$2.5g/$\ell$, 3$0^{\circ}C$ pH 5.7이며 이 조건에서의 생산량은 8.41g/L 이었다. 본 다당류의 성분은 갈락토오스(1.0몰), 크실로오스(1.5몰), 글루코 노델타락톤(1.9몰) 및 리보오스(0.03몰)로 되어 있었다. 1% 용액의 점도는 60rpm에서 504mpa.s이며 고유 점도는 45.8 d$\ell$/g 이었다
Simila, Janika;Gernig, Anita;Murray, Patrick;Fernandes, Sara;Tuohy, Maria G.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권12호
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pp.1653-1663
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2010
The first gene (${\alpha}$-gal1) encoding an extracellular ${\alpha}$-Dgalactosidase from the thermophilic fungus Talaromyces emersonii was cloned and characterized. The ${\alpha}$-gal1 gene consisted of an open reading frame of 1,792 base pairs interrupted by six introns that encoded a mature protein of 452 amino acids, including a 24 amino acid secretory signal sequence. The translated protein had highest identity with other fungal ${\alpha}$-galactosidases belonging to glycosyl hydrolase family 27. The ${\alpha}$-gal1 gene was overexpressed as a secretory protein with an N-terminal histidine tag in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. Recombinant ${\alpha}$-Gal1 was secreted into the culture medium as a monomeric glycoprotein with a maximal yield of 10.75 mg/l and purified to homogeneity using Hisbinding nickel-agarose affinity chromatography. The purified enzyme was maximally active at $70^{\circ}C$, pH 4.5, and lost no activity over 10 days at $50^{\circ}C$. ${\alpha}$-Gal1 followed Michaelis-Menten kinetics ($V_{max}\;of\;240.3{\mu}M/min/mg,\;K_m\;of\;0.294 mM$) and was inhibited competitively by galactose ($K_m{^{obs}}$ of 0.57 mM, $K_i$ of 2.77 mM). The recombinant T. emersonii ${\alpha}$-galactosidase displayed broad substrate preference, being active on both oligo- and polymeric substrates, yet had strict specificity for the ${\alpha}$-galactosidic linkage. Owing to its substrate preference and noteworthy stability, ${\alpha}$-Gal1 is of particular interest for possible biotechnological applications involving the processing of plant materials.
Background: Red-skin root disease has seriously decreased the quality and production of Panax ginseng (ginseng). Methods: To explore the disease's origin, comparative analysis was performed in different parts of the plant, particularly the epidermis, cortex, and/or fibrous roots of 5-yr-old healthy and diseased red-skin ginseng. The inorganic element composition, phenolic compound concentration, reactive oxidation system, antioxidant concentrations such as ascorbate and glutathione, activities of enzymes related to phenolic metabolism and oxidation, and antioxidative system particularly the ascorbate-glutathione cycle were examined using conventional methods. Results: Aluminum (Al), iron (Fe), magnesium, and phosphorus were increased, whereas manganese was unchanged and calcium was decreased in the epidermis and fibrous root of red-skin ginseng, which also contained higher levels of phenolic compounds, higher activities of the phenolic compound-synthesizing enzyme phenylalanine ammonia-lyase and the phenolic compound oxidation-related enzymes guaiacol peroxidase and polyphenoloxidase. As the substrate of guaiacol peroxidase, higher levels of $H_2O_2$ and correspondingly higher activities of superoxide dismutase and catalase were found in red-skin ginseng. Increased levels of ascorbate and glutathione; increased activities of $\text\tiny L$-galactose 1-dehydrogenase, ascorbate peroxidase, ascorbic acid oxidase, and glutathione reductase; and lower activities of dehydroascorbate reductase, monodehydroascorbate reductase, and glutathione peroxidase were found in red-skin ginseng. Glutathione-S-transferase activity remained constant. Conclusion: Hence, higher element accumulation, particularly Al and Fe, activated multiple enzymes related to accumulation of phenolic compounds and their oxidation. This might contribute to red-skin symptoms in ginseng. It is proposed that antioxidant and antioxidative enzymes, especially those involved in ascorbate-glutathione cycles, are activated to protect against phenolic compound oxidation.
The whole gal/lae operon genes of Lactococcus lactis ssp. lactis 7962 were reported as follows: galA-galM-galK-galT-lacA -lacZ-galE. The galK gene encoding a galactokinase involved in one of the Leloir pathways for galactose metabolism was found to be 1,197 bp in length and encodes a protein of 43,822 Da calculated molecular mass. The deduced amino acid sequence showed over 50% homology with GaIK proteins from several other lactic acid bacteria. The galK gene was expressed in E. coli and the product was identified as a 43 kDa protein which corresponds to the estimated size from the DNA sequence. The galactokinase activity of recombinant 5. coli was about 8 times greater against that of the host strain and more than 3 times higher than the induced L. lactis 7962.
After ethanol (BM-E and RW-E) and hot-water (BM-HW and RW-HW) extracts were fractionated from two herbal mixtures (BM and RW), their physiological activities were investigated. All extracts consisted of more than 50% of neutral sugar, with their total polyphenol levels higher than flavonoid levels. Radical scavenging activities of EtOH extracts remained significantly higher compared to that of hot-water extracts, and in particular, RW-E showed consistently higher antioxidant activity than BM-E. When anti-inflammatory activities of the extracts were evaluated by LPS-stimulated RAW 264.7 cells at 10~500 μg/mL non-cytotoxicity doses, BM-E showed significantly higher levels of TNF-α, IL-1β, IL-6, and nitric oxide inhibitory activity than those of hot-water extracts and RW-E. Murine peritoneal macrophage cells were shown to be enhanced in crude polysaccharides (BM-CP and RW-CP fractionated from BM-HW and RW-HW) compared to hot-water extracts and polysaccharide K (PSK, positive control). Especially, RW-CP exhibited higher activity than BM-CP, and component sugar analysis showed that BM-CP mainly contained galacturonic acid, glucose, arabinose, galactose, and xylose (34.5%, 33.9%, 16.1%, 7.1%, and 6.3%, respectively), whereas RW-CP showed different measurements (29.5%, 59.2%, 5.0%, 4.5%, and 0.2%). In conclusion, two herbal mixtures could contain varying sets of physiological activities dependent on different extraction and fractionation methods.
An innovative biopolymer known as the Rhizobian gum has been developed in France, which shows some dramatic refreshing effect on the skin. The origin of this innovative project takes its source in the natural environment, and in particular the natural environment of the roots of sunflowers and wheat, where a symbiotic bacterium has been discovered. It is a Rhizobium bacterium, which is hosted by the roots, and which is able to synthesize a specific polymer showing a dramatic water binding capacity. This polymer is in particular synthesized in period of drought, and its biological role is to concentrate the small amount water present in the soil in order to take it available for the root, which becomes then able to absorb it. This vital mechanism allows the plant to survive despite a severe climatic environment. This basic research has been conducted in collaboration whit the French National centre of scientific Research (CNRS), and has lead to the isolation of the Rhizobium bacteria. Rhizobian gum is a branched biopolymer consisting in the repetition of a polysaccharide unit of 3 molecules of glucose, 3 molecules of galactose and 1 molecule of glucuronic acid, whit one pyruvate group an average 1.6 acetyl groups. The fresh effect of Rhizobian gum is a strong sensorial impact that 100 % of the consumers are able to perceive, and which is judged very pleasant by most of them. In addition to this, a large majority of consumers are perceived, and which is judge very pleasant by most of them. In addition to this, a large majority of consumers also feel a very pleasant relaxing sensation. Smoothness and softness are also felt by most consumers and qualified positively by most of them. These qualities guarantee a strong impact on today's consumers.
An innovative biopolymer known as the Rhizobian gum has been developed in France, which shows some dramatic refreshing effect on the skin. The origin of this innovative project takes its source in the natural environment, and in particular the natural environment of the roots of sunflowers and wheat, where a symbiotic bacterium has been discovered. It is a Rhizobium bacterium, which is hosted by the roots, and which is able to synthesize a specific polymer showing a dramatic water binding capacity. This polymer is in particular synthesized in period of drought, and its biological role is to concentrate the small amount water present in the soil in order to take it available for the root, which becomes then able to absorb it. This vital mechanism allows the plant to survive despite a severe climatic environment. This basic research has been conducted in collaboration whit the French National centre of scientific Research (CNRS), and has lead to the isolation of the Rhizobium bacteria. Rhizobian gum is a branched biopolymer consisting in the repetition of a polysaccharide unit of 3 molecules of glucose, 3 molecules of galactose and 1 molecule of glucuronic acid, whit one pyruvate group an average 1.6 acetyl groups. The fresh effect of Rhizobian gum is a strong sensorial impact that 100 % of the consumers are able to perceive, and which is judged very pleasant by most of them. In addition to this, a large majority of consumers are perceived, and which is judge very pleasant by most of them. In addition to this, a large majority of consumers also feel a very pleasant relaxing sensation. Smoothness and softness are also felt by most consumers and qualified positively by most of them. These qualities guarantee a strong impact on today's consumers.
본 연구는 비만과 노화가 동시에 유발된 흰쥐에서 12주간의 트레드밀 운동과 L-arginine의 투여가 복부지방량, GH, IGF-I, somatostatin, fibrinogen, PAI-1에 미치는 영향을 관찰하고 이를 개선하는데 더욱 효과적인 방법을 제시하는데 그 목적이 있다. 이를 위해 단독 처치 군과 복합 처치 군으로 나누어 실험하여 그 효과를 비교, 분석한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 복부지방량은 통제집단에 비해 모든 집단에서 유의하게 감소하였다($p$<0.01). 2. AG+EX, AG+LA+EX집단에서 통제집단에 비해 GH의 혈중 농도가 유의하게 높게 나타났다($p$<0.1). 3. AG+EX, AG+LA+EX집단에서 통제집단에 비해 IGF-I의 혈중 농도가 유의하게 증가하였다($p$<0.01).
양식 농어 치어에 발생하는 포도상구균증의 원인균에 대한 생화학적 성상, 생물학적 성상, 약제 감수성 및 병원성을 검토하였다. 병어의 간, 신장, 비장 및 뇌로부터 원인균을 분리하였으며, 생물학적 생화학적 성상을 조사한 결과 본 균을 Staphylococcus epidermidis로 동정하였다. S. epidermidis에 감염된 농어 치어의 외부 소견은 안구 충혈 및 백탁이 주증상이었고, 해부학적 소견은 뇌출혈, 간울혈, 신장 및 비장의 팽대가 특징적였다. 분리균주는 BHIA, HIA 및 Staphylococcus No. 110에서 잘 발육하였으며, 식염 농도 0~9% (최적 염분 : 1~3%), $10\sim45^{\circ}C$(최적 온도 ; $35\sim40^{\circ}C$) 및 pH 4~10(최적 pH : 8)에서 발육하였다. DNase, coagulase에는 모든 균주가 음성였으며, 용혈성은 양성을 나타내었고, urease 양성, novobiocin 저항성에는 음성을 나타내었다. 모든 균주는 탄수화물 분해시 가스를 생성하지 않았고 혐기적 조건하에서 포도당과 maltose를 분해했다. 호기적 조건하에서 모든 균주는 포도당, galactose, sucrose, maltose 및 dextrin을 분해하였다. $1.7{\times}10^{10}$ viable cells/$m\ell$를 근육 주사한 실험구에서는 모든 접종어에 강한 병원성을 나타내었으나, $1.7{\times}10^4$ viable cells/$m\ell$를 접종한 실험구에서는 약한 병원성이 나타났다. 분리균은 bacitracin, erythromycin, norfloxacin 등에 감수성을 나타냈으나, colistin, gentamicin, nalidixic acid 등에는 내성을 나타냈다. 병어의 병리조직학적 관찰 결과 뇌의 소상 울혈, 간 실질세포의 퇴행성 병변 및 신장 조직에서 뇨세관 상피세포의 분리와 괴사가 나타났다.
우유에 풍부하게 존재하는 유당은 galactose와 포도당의 $\beta(1\rightarrow4)$ glycosidic 결합으로 구성되어 있고, 인간에서 이를 가수분해하는 효소는 lactase, 세균에서는 $\beta-galactosidase$로 알려져 있다. Lactase의 활성이 낮은 사람이 우유를 섭취했을 경우 일시적인 설사를 일으키고 때로는 만성적인 대감의 염증으로 인한 만성설사의 원인이 되기도 한다. 겨울철에 젖소를 사육하는 축사 주변에서 저온에서 생육하는 세균 AS-20을 분리하여 $\beta-galactosidase$ 활성을 갖는 균주를 선별하고 온도별로 분리균의 성장을 조사하였다. 그 결과 대장균이 자라지 못하는 $10^{\circ}C$에서도 분리된 AS-20은 생육이 가능하였고 생육 최적온도는 $30^{\circ}C$이였으며 이 온도에서 세대시간은 60여분 이었다. AS-20의 생화학적 특성을 bioMerieux Vitek Gram negative identification card (GNI+)로 조사한 결과 포도당을 발효, 산화시켰으며 유당, maltose, mannitol, xylose, L-arabinose 등을 이용하여 97% Hafnia alvei, 2% Escherichia coli로 동정되었다. Polymerase chain reaction으로 16S rRNA유전자를 증폭하여 1,426 bp의 염기서열을 결정하여 기존에 보고된 유전자들과의 유사도를 조사한 결과 분리된 균주 AS-20은 Hafnia alvei와 99%의 염기서열상 동성을 보였다. 이러한 결과는 BioMerieux Vitek Gram negative identification card 키트로 동정한 결과와 일치하였다. AS-20을 $10^{\circ}C,\;20^{\circ}C,\;30^{\circ}C$에서 배양하면서 $\beta-galactosidase$ 활성을 조사한 결과 저온인 $10^{\circ}C$와 $20^{\circ}C$에서 배양하였을 때에 배양최적 온도인 $30^{\circ}C$에서 배양했을 때 보다 1.5 배 정도 높은 효소활성을 보여주었으며, $30^{\circ}C$에서 배양된 대장균 보다 6배 이상의 효소활성을 보여 주어 저온조건에서 분리균의 효소생산이 비교적 높은 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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