Ascorbic acid로부터 $2-O-{\alpha}-D-glucopyranosyl-L-ascorbic$ acid(ascorbic acid-2-glucoside, AA-2G)를 생산하기 위하여, transglucosylation 활성을 가지는 시금치 종자의 ${\alpha}-glucosidase$를 효소원으로 이용하였다. 시금치 종자로 사용한 Spinachia oleracea L. WooSung의 조효소액의 ${\alpha}-glucosidase$ 활성은 발아 후 3일 째에 가장 높게 나타났으며, AA-2G의 생산은 2일 키운 시금치의 조효소액을 이용하였을 때, 생산량이 1.053 mM로 가장 높았다. 조효소액을 이용한 AA-2G 생산에 있어서 glucose 공여체로는 maltose가 가장 좋았으며, maltose와 ascorbic acid의 최적 농도는 각각 225 mM과 175 mM이었다. ${\alpha}-glucosidase$는 60 unit를 사용했을 때 생산량이 가장 좋았다. 효과적인 반응완충용액은 sodium acetate 완충액이었으며, 최적 농도는 175 mM이었다. 최적 pH및 반응온도는 각각 5.0과 $65^{\circ}C$였고, 최적 반응조건 하에서 50분 반응 후에 ascorbic acid로부터 2.30 mM의 AA-2G가 생산되었다.
Squash-조직을 graphite rod disk 전극에 고정하여 메탄올 용매 속에서 L-ascorbic acid(AA)를 정량할 수 있는 전류법 바이오센서를 만들었다. 전극의 검출한계는 $2{\times}10^{-6}M$이었다. 순수한 ascorbate oxidase(AO)를 고정시켜 만든 전극에 비해 식물 조직에 들어 있는 효소로 만든 이 전극은 생촉매의 활성도가 높고 안정성이 좋았으며(1주간) 대단히 값싸게 만들 수 있었다.
This study investigated the heat stability of L-ascorbic acid (AA) in acetic acid solution. To analyze the degradation of AA using high performance liquid chromatography (HPLC), AA was measured at a wavelength of 244 nm in acetic acid and 265 nm in distilled water. During the storage of AA in acetic acid or distilled water at $37^{\circ}C$, degradation of AA was slower in acetic acid than in distilled water. On examining various ratios of AA to acetic acid, the stability of AA at $100^{\circ}C$ for 30 min was the highest when the concentration of acetic acid was 10 times higher than the concentration of AA. After acetic acid was added into AA degraded by heating, the AA is stabilized by reheating. Ultimately, these results indicate that degraded AA is reduced by hydrogen ions dissociated from acetic acid, and the rate of reduction of degraded AA in acetic acid solution is improved with heat processing.
신선절단 '쓰가루' 사과의 갈변과 미생물 성장 저해에 대해 ascorbic acid와 초음파 처리의 효과를 조사하였다. 사과를 8조각으로 자르고, 1분간 증류수에 침지(Cont), 1분 동안 1% ascorbic acid에 침지(AA), 1분 동안 초음파 처리(US), 또는 1분 동안 1% ascorbic acid용액으로 초음파 처리(AA+US) 후 0.04 mm polypropylnene film으로 열접합 포장하고, 8일 동안 $10^{\circ}C$에서 저장하면서 품질 변화를 분석하였다. AA+US 처리구에서 저장 마지막 날까지 가장 높은 $L^*$값과 낮은 $a^*$, $b^*$값을 보였고, polyphonoloxidase 활성 또한 가장 억제 된 것으로 나타났다. 총균수의 변화는 저장 초기부터 마지막 날까지 AA+US 처리구에서 미생물 성장이 가장 저해된 것으로 나타났다. 가용성 고형분 함량, 적정산도 및 pH 등은 처리조건에 따른 큰 차이를 보이지 않았다. 따라서 ascorbic acid와 초음파의 병용 처리는 신선 절단 사과의 효소적 갈변을 억제하고, 미생물 성장을 저해하는 효과를 가지는 것으로 확인되었다.
Formation of a L-Ascorbic Acid 2-O-$\alpha$-glucoside(AA-2G) is a chemically stable dervative of asocrbate that shows a vitamin C acitivity in vitro as well as in vivo. We studied whether ascorbic acid(AA) and AA-2G are formed in baechu kimchi during fermentation at 4 $^{\circ}C$ or 18$^{\circ}C$. To determine the formation of AA and AA-2G during fermentation of kimchi, wheat flour (as a carbhydrate source) added baechu kimchi (WBK) and control baechu kimchi(CBK) were prepared and fermented at 4 $^{\circ}C$ or 18 $^{\circ}C$. A substance like AA-2G was detected by HPLC from WBK fermented at 18 $^{\circ}C$ for 26 days in fall season and confirmed later to be the AA-2G showing distinctive characteristics of heat stability and resistance to ascrobate oxidase catalase. However, none of the kimchi formed AA-2G when the kimchi were fermented under a different temperature condition such as 4 $^{\circ}C$ instead of 18 $^{\circ}C$ or a different season such as summer instead of fall even if they were fermented at 18 $^{\circ}C$. The pH of kimchi was decreased rapidly during the first 3 days. and then decreased slowly after 4 days when the kimchi were fermented at 18 $^{\circ}C$. However, there were slight changes of pH in both CBK and WBK feremented at 4$^{\circ}C$ for 30 $^{\circ}C$ days. Therefore, the AA-2G -forming activity in kimchi seems to be correlated with the formentation temperature, the microorganisms involved in kimchi fermentation and a suitable glycosyl donor for AA as provided by wheat flour in this study.
The 2-O-$\alpha$-D-glucopyranosyl L-ascorbic acid (AA-2G) which was enzymatically glucosylated with the cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) [EC 2.4.1.19] from Bacillus sp. JK-43 has been reported previously. The presnet experiments examined the optimal conditons for the productio of AA-2G from AA and soluble starch, and characterized the properties of the CGTase from Bacillus sp. JK-43. The reaction mixture for the maximal production of AA-2G was followings; 12% total substrate concentration, 1,400 usits/mL of CGTase and a mixing ratio of 2 : 3(g or AA : g of soluble starch). Under this condition, 1.76mM of AA-2G, which corresponded to 2.53% yield based on AA, was produced after incubation for 24hrs at 45$^{\circ}C$ (pH 5.5). The optimum pH and temperature for the CGTase activity were 6.0 and 45$^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at pH 5.5 to 9.5, and at temperature up to 5$0^{\circ}C$. The thermostability of the enzyme could be enhanced up to 6$0^{\circ}C$ by the addition of 30mM CaCl2.
Encapsulation of L-ascorbic acid(AA) into BGsome was attempted to improve its stability. BGsome is a bio-compatible vesicular system prepared by dispersion of hydrated liquid crystalline phase formed through hydration of 1,3-butylene glycol(BG)-dissolved lecithin with an aqueous solution containing hydrophilic component. The characteristics of AA encapsulated BGsome, such as droplet size, surface charge, and solution appearance, was investigated. The concentration of AA solution had considerable effect on droplet size and surface charge of BGsome. Several tens nanometer droplet made by sonication treatment did not showed any change of size with storage time. Stability of AA was improved by encapsulation into BGsome, which was verified through DPPH test and HPLC assay.
A material with the same high performance liquid chromatography (HPLC) retention profile as authentic ascorbic acid 2-Ο-$\alpha$-glucoside (AA-2G) was detected in kimchi. This material was identified as AA-2G by testing its susceptibility to $\alpha$-glucosidase hydrolysis, the HPLC profile, and through the elementary analysis. Among several strains of bacteria isolated from fermented kimchi, four strains could produce cydodextrin glucanotransferase (CGTase) which catalyzes the transglucosylation reaction of ascorbic acid. By using starch as the glycosyl donor, AA-2G was produced as the major product through this reaction.
This presentation reviewed the dietary vitamin C requirements in main marine finfish culture in Korea. In experiment I, an II-week feeding trial was conducted to study the effects of the different levels of dietary vitamin C on growth, tissue ascorbic acid concentrations and histopathological changes in parrot fish. Casein and gelatin based diets were formulated to contain 0, 60, 120, 240, 480 and 2000mg L-ascorbic acid (AA)kg diets on Ah equivalent basis in the form of L-ascorbyl-2-monophosphate (AMP), 60 and 240 mg AA/kg diet as L-ascorbic acid. Broken line analysis of weight gain indicated that the dietary vitamin C requirement of parrot fish is l18$\pm$12 mg AA/kg diet in the form of L-ascorbyl-2-monophosphate for maximum growth. In experiment II, a 12-week experiment was conducted to compare L-ascorbyl-2-monophosphate-Ca (AMP-Ca) with L-ascorbyl-2-monophosphate-Na/Ca (AMP-Na/Ca) for supplying the dietary vitamin C for juvenile Korean rockfish Sebastes schlegeli. Fish were fed one of 11 semi-purified diets containing equivalent of 0, 50, 100, 200, 400, and 800 mg ascorbic acid (AA)kg diet in the form of AMP-Ca or AMP-Na/Ca for 12 weeks. Broken line analysis of weight gain indicated that the dietary vitamin C requirement of Korean rockfish is 100 mg AA/kg diet in the form of AMP-Na/Ca, and 117 nag AA/kg diet in the form of AMP-Ca. In experiment III, a 12-week experiment was conducted to study the effects of different dietary levels of vitamin C, L-ascorbyl-2-polyphosphate (ASPP), on growth and tissue vitamin C concentrations in juvenile olive flounder. Fish were fed one of six semi-purified diets containing an equivalent of 0, 25, 50, 75, 150, or 1500 mg ascorbic acid (AA) kg 1 diet in the form of ASPP for 12 weeks. Based on broken line analyses for WG and PER, the optimum dietary levels of vitamin C were 91 and 93 mg AA/kg diet, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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