• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제26권2호
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• pp.365-375
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• 1996

5 serotypes(a, b, c, d, e) of Actinobacillus actinomycetemcomitans showed distinct hybridization patterns(DNA fingerprinting patterns) when the bacterial DNA were hybridized with randomly cloned 4.7-Kb sized DNA probe. The sizes of hybridized bands in each serotypes were different among serotypes and represented unique patterns of hybridization with the probe used. The serotype a showed two bands of fingerprinting patterns: 23.1 kb and 2.5 kb respectively. Serotype b and c showed single band: 6.6 kb and 9.5 kb, respectively. Serotype d and e showed two bands of hybridization: 23.1 kb and 2.8 kb, and 23.7 kb and 2.1 kb, respectively. The results indicate that this standard fingerpriting patterns of DNA hybridization with 4.7 kb probe can be further used for genotyping clinical isolates of Actinobacillus 8ctinomycetemcomitansand its relevance with periodontal disease activity.

• 생명과학회지
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• 제8권3호
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• pp.348-351
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• 1998

Common DNA fragments of the ${\beta}$-globin gene were observed from six races of the adult common carp: Hybrid-Yamato, Japanese wild type, Mirror, Suwa-Yamato, Scale German, and Saku-Yamato. Chromosomal DNAs isolated from the above six races were digested with restriction endonucleased EcoRI and PstI. The digested fragments were transferred onto nitrocellulose filter and hybridized with a probe of carp ${\beta}$-globin cDNA. Molecular sizes of the hybridized DNA fragments digested with EcoRI were 3.6Kb(Kilo base), 4.3Kb and 15Kb in Hybrid-Yamato, Japanese wild type, Mirror, Scale German and Saku-Yamato carp DNAs. In Scale German and Saku-Yamato carp DNAs, two and one more hybridized DNA fragments were observed, respectively. Molecular sizes of the hybridized DNA fragments digested with PstI were 2.2Kb, 6.5Kb, 7.8Kb and 9.2Kb in Hybrid-Yamato, 2.2Kb, 6.5Kb and 9.2Kb in Japanese wild type, 2.2Kb, 6.5Kb, 7.8Kb, and 13Kb in Mirror, 2,2Kb, 5,5Kb, 6.5Kb, 7.8Kb, 9.2Kb and13Kb in Scale German, and 2.2Kb, 5.5Kb, 6.5Kb, 9.2Kb and Saku-Yamato carp DNA. Therefore, depending on carps, three to six DNA fragments were hybridized with ${\beta}$-globin gene probe. Thus it indicated polymorphysm in the globin gene family of carp.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제24권2호
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• pp.242-246
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• 1996

Hatomarubigins inhibited the growth of various cancer cell lines including multidrug-resistance cells. Hatomarubigins were found to potentiate the colchicine- and vinblastine-induced cytotoxicity against KB-C2 cell, but not the adriamycin-induced cytotoxicity against KB-C2 cells. Hatomarubigins didn't affect the sensitive KB cells. These results suggest that hatomarubigins are specific potentiators of colchicine. Among four hatomarubigins, hatomarubigin A sho- wed the highest synergestic effect on colchine-induced cytotoxicity. Similar effect of hatomarubigin A was found against V79/ADM cells.

• 한국가금학회지
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• 제46권1호
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• pp.17-24
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• 2019

본 연구는 오브알부민 프로모터의 최적 크기를 결정하기 위해 수행하였고, 이를 위해 2.8, 5.5, 그리고 Mut-4.4 kb의 오브알부민 프로모터를 리포터 벡터에 클로닝하여 다양한 세포들에서 프로모터의 활성을 검증하였다. Mut-4.4kb-pOV는 2.8와 5.5kb-pOV에 비해 HeLa, MES-SA, 그리고 LMH/2A에서 높은 수준의 프로모터 활성을 유도하였으나, cEF 세포에서는 낮은 활성을 보였다. 한편, Mut-4.4kb-pOV/pGL4.11 벡터가 도입된 HeLa, MES-SA, LMH/2A, 그리고 cEF 세포에서 에스트로겐 처리에 의한 반응성을 검증한 결과, cEF 세포를 제외한 나머지 세포들은 에스트로겐을 처리했을 때 리포터 유전자의 발현량이 증가하였다. 또한 LMH/2A 세포에 500 nM 에스트로겐 처리 결과, Mut-4.4kb-pOV는 에스트로겐 처리 후에도 2.8와 5.5kb-pOV에 비해 높은 수준의 프로모터 활성을 유도하였다. 더불어 ERE 영역이 없는 2.8kb-pOV는 LMH/2A 세포에서 500 nM 에스트로겐 처리 후 프로모터의 활성에 효과가 없었으나, ERE 영역을 포함하는 5.5 그리고 Mut-4.4kb-pOV는 에스트로겐 처리에 의해 프로모터의 활성이 증가한 결과를 보였다. 이상의 결과는 Mut-4.4kb-pOV가 형질전환 암탉을 생산하기 위한 재조합바이러스 벡터의 프로모터 영역으로 2.8와 5.5kb-pOV에 비해 보다 효율적인 크기임을 보여주는 결과이다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권5호
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• pp.473-477
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• 1993

Both glycerol-phosphate acyltransferase (GPAT) and 7.2 kb mRNAs were present at the highest level in liver. Glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2 kb mRNA levels increased dramatically when fasted mice were refed a high carbohydrate diet. In mature 3T3-L1 adipocytes, insulin increased both glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2kb mRNA levels 2.6 to 3-fold while dibutyryl cAMP decreased mRNA levels by 50% and 80%, respectively. These results indicate positive regulation by insulin and negative regulation by dibutyryl cAMP of both glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2 kb mRNA.

• IMMUNE NETWORK
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• 제8권4호
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• pp.137-142
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• 2008

Background: CD11c, also known as integrin alpha x, is one of the optimum markers of dendritic cells. However, the regulation of the CD11c expression in mouse has not been identified yet. In this study, in order to analyze the regulation of CD11c expression, the promoter of CD11c was cloned and characterized. Methods: To identify the promoter portion, various sizes of what are considered to be CD11c promoter fragments was amplified by polymerase chain reaction (PCR), using mouse genomic DNA as a template. After sequence was obtained, these fragments were transfected into various cell lines including mouse dendritic cell lines such as JAWSII and DC2.4 and L929 as control cell line.. The promoter activity of three promoter fragments was measured and compared by luciferase activity in the transfected cells. Results: Three clones with size of 1kb, 3kb and 6kb were obtained from mouse genomic DNA. Flow cytometry analysis of JAWSII cells revealed that 52% of the cells expressed CD11c, which was confirmed by RT-PCR analysis. On the contrary, L929 and DC 2.4 cells did not express CD11c. The CD11c+ JAWSII cells were enriched from 52% to 90% with cell sorter. The comparative luciferase activity analyisis demonstrated that the region responsible for tissue specific expression was contained within -3 kb and the clone with size of 3 kb particularly showed higher luciferase activity than 6 kb and 1 kb clones. Conclusion: The CD11c promoter region containing the region responsible for tissue specificity was successfully cloned and -3 kb region showed the highest activity.

• 미생물학회지
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• 제47권1호
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• pp.92-96
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• 2011

Rhodococcus sp. strain DK17은 3개의 linear catabolic megaplasmid (380 kb pDK1, 330 kb pDK2, 750 kb pDK3)를 보유하고 있다. Alkylbenzene 분해 유전자군(akbABCDEF)은 pDK2에만 위치하는 반면 phthalate 분해 유전자군의 경우에는 거의 동일한 copy가 pDK2 (ophA'B'C'R')와 pDK3 (ophABCR)에 각각 위치한다. DK17은 최적 성장온도인 $30^{\circ}C$에서 $37^{\circ}C$로 배양온도를 상승시키면 성장이 멈추지만 $30^{\circ}C$로 환원 즉시 다시 성장을 시작하였다. 이는 $37^{\circ}C$라는 온도 조건이 DK17에게 치명적이지는 않지만 스트레스로 작용함을 암시하는 것이다. 또한 $37^{\circ}C$에서 열충격을 받은 일부 세포는 o-xylene (alkylbenzene의 모델 화합물)을 분해 능력을 상실하였다. 열충격 후 200개의 집락을 무작위로 선택하여 pDK2- 또는 pDK3-specific 프라이머를 이용한 PCR과 pulsed-field gel electrophoresis를 통해 megaplasmid의 변화 양상을 비교 분석한 결과, 29개 돌연변이체에서 야생형의 것과 다른 5가지 megaplasmid 유형[pDK2 소실과 함께 새로운 약 700 kb megaplasmid 출현(10개), pDK2만 소실(9개), pDK3 소실과 함께 새로운 약 400 kb megaplasmid 출현(8개), pDK3만 소실(1개), 그리고 pDK2와 pDK3 소실과 함께 각각 약 400 kb와 700 kb 크기의 새로운 megaplasmid 출현(1개)]이 관찰되었다. 이상의 연구 결과는 성장 온도 변화가 세균 유전체의 물리적 변화를 직접 유도할 수 있음을 입증하는 것으로 온도 변화를 비롯한 서식지 환경 변화가 세균 진화에 상당한 영향력을 미칠 수 있음을 보여준다.

• 대한바이러스학회지
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• 제29권4호
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• pp.261-269
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• 1999

The relationship between second messenger cGMP and human cytomegalovirus (HCMV) replication was investigated. First, the intracellular level of cGMP ([cGMP]i) in HCMV-infected cells was measured. The [cGMP]i increased at early times after HCMV infection, reached maximum level at 12 hr and returned to basal level at 24 hr after virus infection, while [cGMP]i in mock-infected cells remained relatively unchanged. Increasing [cGMP]i resulted in enhanced transcription of HCMV major immediate early gene. For early gene expression, cGMP had varying effect. Expression of 1.2 kb RNA decreased and 2.2 kb RNA increased with increasing cGMP, while 2.7 kb RNA gene expression was not affected. HCMV early genes are regulated by immediate early gene, and the effect of cGMP on the regulatory effect of major immediate early gene on early genes was investigated. In the absence of cGMP, major immediate early gene repressed 2.7 kb RNA gene expression, while 1.2 kb RNA and 2.2 kb RNA early genes were not significantly affected. In the presence of $1\;{\mu}M$ cGMP, however, major immediate early gene stimulated the expression of three early genes.

• KSBB Journal
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• 제14권1호
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• pp.76-81
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• 1999

Wmogradsky column을 이용하여 자연계 및 폐수처리장 등 10 개소로부터 순수 분리한 균주에 대하여 암모니아성 질소와 아질산성 질소 산화능 및 특성을 조사하였다. 암모니아성 질소의 경우 가장 성능이 우수한 균주는 K회사 폐수처리장에서 분리된 Nitrosomonas KBI이었고 배양 4일 후 91%의 산화력을 보여주었다. 아질산성 질소의 산화능이 가장 우수한 균주는 K회사 폐수처리장에서 분리된 Nitrobacten KB2이었고, 배양 4일후 91%의 산화력을 보여주었다 Nitrobacten KB1의 최적 성장 온도는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. 초기 배지의 암모니아성 질소의 농도를 조절해 산화 속도를 비교해 본 결과 100mg/L미만일 경우에는 6.7mg/day까지 상승하다가 100mg/L 이상에서는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. Nitrobacten KB2의 최적 성장 온도는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. Nitrobacten KB2 균주를 대상으로 초기 아질산성 질소의 농도를 변화시켜 산화 속도를 비교해 본 결과 아질산성 질소의 농도가 증가할수록 산화속도가 증가하였으며, 20mg/L 이상에서는 약 4.2mg/day로 산화속도를 유지되었다.

• 미생물학회지
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• 제30권3호
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• pp.218-224
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• 1992

Carboxydobacteria 의 일산화 탄소 산화에 대한 유전학적 연구를 위해 Pseudomonas caarboxydovorans 에 존재하는 pYK100 plasmid 와 pBR322 를 이용하여 pYK322 (7.2 kb, Ap, Tc) 와 pYK324 (7.2 kb, Ap, Tc) 등 두가지 재조합 plasmid shuttle 백테를 만들고, pYK100와 pACYC184를 이용하여 pYK210(5.2 kb, $CM^{r}$ ), pYK220 (5.2kb,$CM^{r}$ ), pYK230 (5.2 kb, $Cm^{r}$ ), pYK232 (5.2 kb, $CM^{r}$) 등 네가지 shuttle 벡터를 만들었다. 재조합된 벡터들은 보두 대장균에서 안정되게 복제되었다. pYK322 와 pYK220 을 이용한 carboxydobacteria 의 형질전환 실험에서 Bagdasarian 과 Timmis 의 방법 (Curr. Top. Microbiol. Immunol., 96 :47-67, 1982) 을 변형하여 0.2% succinate 가 포함된 무기염류배지에서 지수성장 중기까지 배댜ㄷ한 세균을 이용하고, 형질전환용액의 10 mM RbCI 을 100 mM KCI 로 대체하며, 형질전환용액 처리후 4.deg.C 에서의 방치시간을 12시간으로 하고, DNA첨가휴 45.deg.C 에서 3 분간 heat shock 을 준 경우에 높은 형질전환이 일어났다. 형질전환된 세균으로 부터 형질전환에 사용한 plasmid 를 발견할 수 없었는데, 이는 도입된 plasmid 가 염색체 DNA 에 결합되었기 때문인 것으로 추측된다.