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Comparative Proteome Analysis of Two Antagonist Bacillus subtilis Strains

  • Zhang, C.X.;Zhao, X.;Han, F.;Yang, M.F.;Chen, H.;Chida, T.;Shen, S.H.
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권4호
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    • pp.351-357
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    • 2009
  • Natural wild-type strains of Bacillus subtilis are extensively used in agriculture as biocontrol agents for plants. This study examined two antagonist B. subtilis strains, KB-1111 and KB-1122, and the results illustrated that KB-1122 was a more potent inhibitor of the indicator pathogen than KB-1111. Thus, to investigate the intrinsic differences between the two antagonist strains under normal culture conditions, samples of KB-1111 and KB-1122 were analyzed using MALDI-TOF-MS. The main differences were related to 20 abundant intracellular and 17 extracellular proteins. When searching the NCBI database, a number of the differentially expressed proteins were identified, including 11 cellular proteins and 10 secretory proteins. Among these proteins, class III stress-response-related ATPase, aconitate hydratase, alpha-amylase precursor, and a secretory protein, endo-l, 4-beta-glucanase, were differentially expressed by the two strains. These results are useful to comprehend the intrinsic differences between the antagonism of KB-1111 and KB-1122.

식물세포에 살충독소 유전자의 전이: Bacillus thuringiensis 살충단백질 유전자의 클로닝 (Transfer of Insecticidal Toxin Gene in Plants:Cloning of Insecticidal Protein Gene in Bacillus thuringiensis)

  • 이형환;황성희;박유신
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제18권6호
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    • pp.647-652
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    • 1990
  • Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD1의 내 독소생산과 내독소단백질 유전자의 클로닝에 관한 연구를 하였다. 상기 균주는 아포생성기간 중에 이중피라미드형의 내독소를 생산하였고, 크리는 약 $2.9\times 1.0 \mu m$이었다. 상기 균주는 약 10개의 플라수미드 DNA를 가지고 있었으며, 플라스미드의 분자량의 범위는 2.1에서 80kilobases였다. 플라스미드 73kb, BamHI 절단 29Kb DNA 단편과 PstI 절단 7.9Kb DNA는 Probe DNA와 혼성화되었다. PstI 7.9Kb DNA를 추출하여 운반체인 pBR322 운반체의 PstI 절단부위에 삽입하여 클로닝한 후에 E.coli HB101 균주에 형질전환하였으며, 이 클로운을 pKL-20-1로 명명했고 이 형질전환체는 Bombyxmori 유충을 치사시키는 독소물질을 생산하였다.

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경북지방 돼지유래 salmonella 속균의 약제내성과 plasmid profile (Antibiotic resistance and plasmid profile of salmonella spp isolated from swine in Kyoungbuk province)

  • 김규태;김원일;김상윤;장영술;김대원;김봉환
    • 한국동물위생학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.77-91
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    • 2000
  • This study was conducted to investigate the antibiotic resistance and plasmid profiles of 58 salmonella spp isolated from mesenteric lymphnodes of slaughter pigs in Kyoungbuk province during the period from September 1997 to June 1998. The results obtained are as follow that all isolates were susceptible to amikacin, gentamicin, ciprofloxacin and enrofloxacin, and the majority of isolates were highly susceptible to norfloxacin, colistin, nalidixic acid and apramycin while they were moderately susceptible to kanamycin, cephalothin, chloramphenicol, ampicillin, trimethoprim and penicillin. The majority of isolates were over 90% resistant rates to lincomycin, sulfadimethoxine, vancomycin, methicillin and erythromycin. The plasmid profiles of 58 salmonella spp are developed 1 to 4 fractions, 0.9 to 29.5 Kb molecular range sizes and U strains (45.5%) were showed plasmid profiles by agarose gel electrophoresis. 5 derby harbored 29.5 Kb and 7 Kb, and S schwarzengrund had 14 Kb and 0.9 Kb harboring sizes. Four of 10 S agona and 2 of 4 S typhimurium were harbored 3.1 Kb and n.5 Kb, respectively. Thirty-five untypable strains are developed variable size fractions its showed small size plasmid profile less than 6 Kb and 22 (62.8%) of them had no detectable plasmids.

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잿빛 곰팡이병의 미생물학적 제어 (Biological Control of Blue Mold by Microorganism)

  • 조정일;조자용;안병렬
    • 한국유기농업학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.121-130
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    • 2000
  • 사과 저장중에 발생하는 푸른곰팡이병원균에 대한 길항미생물을 찾기 위하여 자연계로부터 유용미생물을 분리하여 Penicillum expansum에 대한 길항력 검정과 동정하였다. 자연계로부터 얻은 3,000여종의 미생물중에서 푸른곰팡이병원균에 대하여 길항력이 우수한 미생물을 1차적으로 11종 선발하였으며, 이중에서 가장 길항력이 뛰어난 미생물을 치종적으로 KB22를 선발하였다. 길항력이 우수한 KB22의 형태적 성질, 배양적 특성 및 생리 생화학적 성질 등을 조사하여 비교 검토한 결과 Bacillus subtilis와 유사한 균으로 동정되었다. 분리한 길항균 Baillus subtilis KB22는 푸른곰팡이병에 대한 55.9%의 높은 생장억제력을 보였으며, 한천배지에서 Penicillum expansum 접종 후 길항균처리와 열처리한 길항균배양액을 처리하였을 때 각각90%와 15%이상 길항력을 보여주었다.

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내병성 버어리종 신품종 "KB 101"의 육성경과 및 특성 (Performance of "KB 101" a New Burley Tobacco Resistant to Bacterial Wilt and Black Shank)

  • 김대송;조천준;한철구;추홍구;정석훈;조명조;이승철
    • 한국연초학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.97-103
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    • 1992
  • KB 101 is a bacterial wilt(Pseudomonas solanaceamm E.F. Smith) and black shank (Phytophthora nicotianae Breda de Haan Var. nicotianae Waterhouse) resistant cultivar of burley tobacco (Nicotiana tabacum L.) KB 101 was developed by the Korea Ginseng&Tobacco Research Institute, and released in 1987. KB 101 was developed from a single plant selection in the F2 generation derived from the double cross, [(Burley 21X Burley 37) X (Burley 64X Ky 16)]. Burley 37 and Burley 64 were the source of resistance to bacterial wilt and black shank. Yield trials were conducted in the Fs through F6 generations at the four Exp. Stn. of Korea Ginseng &Tobacco Research Institute as JB 7705-1. On-farm yield trials were conducted in the F7 through F9 generations at the 45 locations of burley tobacco growing area from 1984 to 1986 as KB 101. KB 101 has an erect growth habit similar to that of Burley 21: plant size is larger and has more leaves than those of Burley 21. It is late maturing cultivar that flowers approximately 3 days later than Burley 21. The physical characteristics and chemical composition of KB 101 were similar to those of Burley 21.

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Brand Concept Elaboration Strategy for an Extended Brand: a Case Study for KB Kookmin Card

  • Chun, Seungwoo;Yoo, Changjo;Lee, Sukekyu;Lee, Seon Min
    • Asia Marketing Journal
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    • 제14권3호
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    • pp.153-167
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    • 2012
  • KB Kookmin Card has separated as an independent corporation from KB Kookmin Bank Credit Card Business Group on March, 2011. Ever since, KB Kookmin Card worked to build its own brand identity. The strategic preparation and conscientious implementations made KB Kookmin Card position in consumer's mind with a strong and unique brand image. Its new brand image was rooted in the inherited strengths of reliable and sincere image. However, it faced the challenge to compete in credit card industry in which most competitors had an advanced and sophisticated image. The strengths of KB Kookmin Card were also at the same time their limitations. KB Kookmin Card took a strategy that strengthened the strengths and improved the weaknesses. It focused on the core competence of being a people's sincere life supporter that helps people make savings from everyday events to make a good sum rather than being a lump sum benefit. The brand introduction strategy was implemented in 2011. The implementation focused on the activities that made internal as well as external customers be aware of the brand. Communication programs using a variety of media were executed to attain this goal. In 2012, second phase communication programs were introduced to elaborate the newly established brand image. It introduced many extended products as well as accessory programs which targeted the segments. Also, various CSR activities in many social domains helped consumers and the public to consider KB Kookmin Card an authentic, caring, trustworthy, and consistently-developing supporter in their everyday lives.

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Electroporation 방법을 이용한 포유동물 세포내 GFP 유전자 도입

  • 양병철;성환후;김동훈;이상기;오현주;임석기;박수봉;이은주;민관식
    • 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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    • 한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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    • pp.70-70
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    • 2002
  • 형질전환 가축을 생산하기 위하여 최근 체세포 복제 기법을 이용하고 있다. 이러한 체세포를 이용한 형질전환 동물의 생산에는 체세포내에 유전자의 도입 효율이 직접적인 영향을 주게 된다. 따라서 본 연구는 세포내 유전자의 transfection 효율을 높이고자 한우의 체세포를 이용하여 여러 가지 조건에서 유전자 도입을 실시하였다. 세포내 유전자 도입 방법은 electroporation (EP) 방법을 이용하였다. 사용한 세포는 소의 귀세포(KbESF), 태아섬유아세포 (KbFF), 그리고 대조구로서 CHO cell을 이용하여 GFP 유전자를 도입하였다. EP는 0.4 cm cuvette을 사용하였고, voltage는 0.25 kV, 그리고 field strength 는 0.625 kV/cm 조건으로 실시하였으며, pulse times은 각각 1, 2, 또는 3회를 사용하였다. KbFF와 KbESF에서는 각각 pulse times을 증가시킬수록 유전자도입 세포수가 증가하였으나 (KbFF: 81, 634, 1,065 cells/$10^{6}$ cells, KbESF: 1,011, 5,567, 15,408 cells/$10^{6}$ cells), CHO cell에서는 pulse times을 증가시킬 수록 오히려 유전자도입 세포수가 감소하였다 (CHO: 1,591, 687, 297 cells/$10^{6}$ cells). 그리고 2주 동안 neo selection을 실시 한 결과 KbFF, KbESF, CHO에서 각각 93, 35, 184 colony가 선발되었으며, 이 중 65.6%, 8.6%, 4.3% 가 GFP 형광 발현 colony로 나타났다. 한편 CHO cell에서 transfection cell수가 감소된 것은 EP의 자극으로 인해 손상된 세포가 많이 발생한 것으로 나타났다. 또한 neo selection에서 선발된 colony중 GFP가 발현되지 않거나 일부만 발현되는 colony들이 많이 발생하였는데, 이것은 세포내 유전자가 transfection되지 않은 세포도 neo selection에서 선발된다는 것을 제시하고 있다. 따라서 체세포를 이용한 형질전환동물 생산을 위해서는 세포내 유전자 도입과 선발 과정에서 나타난 colony에 대하여 보다 엄격한 screen을 하는 것이 필요한 것으로 생각된다.

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고추탄저병(Colletotrichum gloeosporioides) 방제를 위한 엽권 길항미생물의 탐색 (Screening for Phyllospheral Antagonistic Microorganisms for Control of Red-pepper Anthracnose (Collectotrichum gloeosporioides))

  • 백수봉;김동우
    • 한국균학회지
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    • 제23권2호통권73호
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    • pp.190-195
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    • 1995
  • 고추탄저병(Colletotrichum gloeosporioides)에 대한 생물학적방제 능력을 가지는 엽권미생물을 선발하기 위하여 38과 87종의 약용식물로부터 243균주의 세균과 51균주의 사상균 그리고 30균주의 효모를 분리하여 이들에 대하여 항진균활성검정을 in vitro 및 in vivo에서 실시한 결과는 다음과 같다. 분리된 엽권미생물 중에서 PDA 배지 대치배양에서 10 mm 이상의 생육저지대를 형성하는 4개의 엽권미생물이 선발되었다. 선발된 4개의 세균균주 KB6, KB12, KB13 및 KB14의 PDB 배양여액 중에서 KB12 균주가 균사생장 억제율이 가장 높았다. 액체배양여액 처리에서 푸른 고추보다 붉은 고추에서 방제효과가 컸다. Bacterial cell 처리에서는 푸른 고추나 붉은 고추에서도 높은 방제효과가 있었다. 선발된 4개의 세균균주들은 모두 Bacillus subtilis로 동정되었다.

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Agrobacterium tumefaciens KU12내에 존재하는 Octopine Type Ti Plasmid의 확인 (Identification of Octopine Type Ti Plasmid in Agrobacterium tumefaciens KU12)

  • 이용욱;음진성;심웅섭
    • 미생물학회지
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    • 제31권4호
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    • pp.292-299
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    • 1993
  • 국내에서 분리된 Agrobacterium tumefaciens KU12 는 많은 식물체에서 종양을 유발하여 octopine 을 유일한 탄소원과 질소원으로 이용할 수 있다. A. tumefaciens KU12 내에는 크기가 각각 45.5 kb, 240 kb 및 240 kb 이상인 3종류의 플라스미드가 존재하는 것으로 확인되었다. KU12내에 존재하는 octopine type Ti plasmid 를 확인하기 위하여 플라스미드를 가지고 있지 않은 A. tumefaciens A136 을 direct transformation 방법에 따라 KU12 에서 분리한 플라스미드 시료로 형질전환시킨후 질소원으로 octopine 만을 가지로 있는 AB 최소배지를 이용하여 Ti plasmid 에 의해 형질전환된 형질정환체를 선별하였다. 선별된 형질전환체를 A. tumefaciens KU911 이라고 명명하였으며 KU911 내에는 240 kb 크기의 플라스미드만이 존재하였다. 종양형성능 및 Southern hybridization 을 이용하여 octopine type Ti plasmid 인 pTiKU12 로 명명된 240 kb 크기의 플라스미드가 Ti plasmid 임을 확인되었다.

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귀비탕(歸脾湯)이 인체피부 섬유아세포에 미치는 영향 (Effects of Kwibi-tang on Dermal Fibroblast)

  • 제윤모;유정은;최경희;임현정;유동열
    • 대한한방부인과학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.10-19
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    • 2011
  • Objectives: This study was performed to elucidate the effects of Kwibi-tang extract(KB) on dermal fibroblast. Methods: To demonstrate the effects of KB on dermal fibroblast, we used human dermal fibroblast(F6) and UVB light(30 $mJ/cm^2$) was used to damage to dermal fibroblast. we measured the nitrite production, LDH release in UVB-irradiated dermal fibroblast to elucidate the action-mechanism of KB. Also, we evaluated cell proliferation of dermal fibroblast and the amount of increased PICP, TIMP-1 in dermal fibroblast. Results: 1. KB decreased the cell proliferation of F6 dermal fibroblast in concentration of 50 ${\mu}g/ml$. 2. KB decreased the synthesis of PICP in concentration of 50 ${\mu}g/ml$. 3. KB decreased the synthesis of TIMP-1 in concentration of 50 ${\mu}g/ml$. 4. KB have no effect on the damage in UVB-irradiated F6 dermal fibroblast. Conclusions: From the results, we concluded KB decreases the cell proliferation and collagen synthesis in dermal fibroblast. So we suggest that KB has the anti-hyperplasy of dermal fibroblast.