A chitinase-producing bacterium was isolated from seashore mud around Beobseongpo in Chunnam province by selective enrichment culture, and among it, one isolate which was the best in producing of chitinase was selected. Nutrient or MacConkey medium was confirmed with secreting of prodigiosin pigment by Serratia sp. JM, and it was performed by the production of clear zone on medium containing chitin. Serratia sp. JM was almost same compared with Serratia marcescens ATCC 27117 in respect of its morphological, physiological and biochemical characteristics except succinic, urea and pyruvic acid. Serratia sp. JM was resistant to tetracycline but was not resistant to kanamycin and chloramphenicol. The optimal temperature and pH for the production of chitinase from Serratia sp. JM were $30^{\circ}C$ and 7.5, respectively. Production of chitinase and pH in the medium increased until the cultivation of 120 hours, but after 120 hours, they were decreased due to the acetic acid accumulated from degradation of chitin by Serratia sp. JM.
Some Chlorella species grow heterotrophically with organic substrate in dark condition. However, heterotrophic Chlorella species are limited and their optimum culture conditions are not fully known. In this study, three heterotrophic Chlorella species, two strains (C4-3 and C4-4) of C. vulgaris and one Chlorella sp. (C4-8) were examined on optimum culture conditions such as carbon source, temperature, and concentrations of nitrogen and phosphorus in Jaworski's medium (JM). And the growth and fatty acid composition of Chlorella were analyzed. For three heterotrophic Chlorella species, glucose (1-2%) as a carbon source only increased the growth and the range of optimum culture temperature was $26-28^{\circ}C$. Doubled concentrations of the nitrogen or phosphorus in JM medium also improved the growth of Chlorella. Chlorella cultured heterotrophically showed significantly higher growth rate and bigger cell size than those autotrophically did. C. vulgaris (C4-3) cultured heterotrophically showed the highest biomass in dry weight ($0.8g\;L^{-1}$) among three species. With respect to fatty acid composition, the contents of C16:0 and n-3 highly unsaturated fatty acid (HUFA) were significantly higher in autotrophic Chlorella than in heterotrophic one and those of total lipid were not different between different concentrations of nitrogen and phosphorus in JM medium. Among three Chlorella species in this study, C. vulgaris (C4-3) appeared to be the most ideal heterotrophic Chlorella species for industrial application since it had a high biomass and lipid content.
Helicobacter pylori is a major cause of gastric-associated diseases. In our previous study, the Adhesin/CTXA2B was expressed as insoluble recombinant chimeric protein derived from the H. pylori adhesin genetically coupled to CTXA2B subunit in Escherichia coli. Since it is very important to optimize IPTG concentration, culture temperature and composition of medium to maximize cell growth and productivity, these conditional growth factors were determined for increasing the productivity of the expressed Adhesin/CTXA2B chimeric protein in Escherichia coli JM101 carrying pTEDhpa/ctxa2b. Our data demonstrate that optimal medium for increased production of chimeric protein was a YCP/Glu medium composed of 2% yeast extract, 1% casamino acid, phosphate solution [0.3% $KH_2P0_4$, 0.4% $Na_2HP0_4$, 0.25% ($NH_4)_2HPO_4$], and 0.5% glucose. In addition, optimal concentration of IPTG was 1 mM and culture temperature, $37^{\circ}C$.
The promoter regions from chromosomal DNA of Bacillus sp. SSA3 which is responsible for fermentation of Korean traditional soy sauce, were cloned for construction of expression vector of Bacills sp. SSA3. Recombinant plasmids were constructed by insertion of HindIIl-cleaved Bacillus sp. SSA3 chromosomal DNA fragments in front of the CAT gene of pGR71 plasmid and B-galactosidase gene of pUC18 plasmid. 6 recombinant plasmids were isolated from chloramphenicol resistant E. coli JM109 clones. All these plasmids were found to have promoter activity in Bacills sp. SSA3 and E. coli JM109. When these 6 clones of Bacills sp. SSA3 were cultivated in LB agar medium supplemented with 10% NaCI. fused CAT gene expression of 4 clones was significantly decreased in common. But the others were poorly inhibited.
The optimal concentrations of salts in medium for cell growth and the production of carboxymethylcellulase (CMCase) by a recombinant E. coli JM109/DL-3 were established using two statistical methods: orthogonal array method (OAM) and response surface method (RSM). The analysis of variance (ANOVA) of data based on OAM indicated that $K_2HPO_4$ gave maximum sum of square (S) and percentage contribution (P) for cell growth as well as production of CMCase. The optimal concentrations of $K_2HPO_4$, NaCl, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and $(NH_4)_2SO_4$ in medium for cell growth extracted by Qualitek-4 (W32b) Software were 10.0, 1.0, 0.2, and 0.6 g/l, respectively, whereas those for the production of CMCase by E. coli JM109/DL-3 were 5.0, 1.0, 0.4, and 0.6 g/l. The analysis of variance (ANOVA) resulting from RSM indicated that a highly significant salt for cell growth was $K_2HPO_4$ ("probe>F" less than 0.0001), whereas $K_2HPO_4$ and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ were significant for the production of CMCase. The optimal concentrations of $K_2HPO_4$, NaCl, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and $(NH_4)_2SO_4$ for cell growth extracted by Design Expert Software were 7.44, 1.08, 0.22, and 0.88 g/l, respectively, whereas those for production of CMCase were 5.84, 0.69, 0.28, and 0.54 g/l. The optimal concentrations of salts and their influences on cell growth and production of CMCase extracted by OAM were almost the same as those by RSM. Production of CMCase by a recombinant E. coli JM109/DL-3 under optimized concentration of salts was 1.93 times higher than that by Bacillus amyloliquifaciens DL-3.
A mycotoxin Patulin, isolated from apple juice medium cultured with Penicillium patulum NRRL5259, was purified through acid aluminum column using ethyl ether as eluent. The yield of purified patulin crystal was 3mg/ml culture medium after 8 days of shaking culture at 28C. The growth rate of Escherichia coli K12JM103 infected with bacteriophage M13 was decreased by patulin at the concentration range of 1Mug/ml to 10Mu/nl. ED50 of patulin for the bacterial growth was 4.5Mug/ml and 10Mug/ml of patulin caused maximum inhibitory effect (60% inhibition) on the growth.
A shuttle vector, pSHvec, was constructed for Lactobacillus casei (L. casei) YIT 9018 and JM1O9 by recombinant DNA technology. This vector contained the $\beta$-lactamase II gene from Bacillus cereus as a selection marker and replication origins for both Gram(+) and Gram(-) strains. It could transform the wild type L. casei YIT 9018 as well as E. coli JM109 and transformed cells were selected based on antibiotics resistance. The ability of L. casei YIT 9018 for curd formation in 11% skim milk was maintained even after transformation with pSHvec. The vector was stable as long as antibiotics were added to the medium. These results could contribute to the study of lactic acid bacteria for the industrial purpose at a genetic level.
Nonactin is the parent compound of a group of ionophore antibiotics, that known as the macrotetrolides. In previous report, in th course of screening superoxide radical-generating compounds from microbial sources, we first screened Streptomyces viridochromogenes JM-4151 that produces nonactin. It was proved that nonactin is superoxide radical-producing compound. In present study, we examined the optimal culture conditions of nonacin. Th optimal culture conditions for nonactin production were as follows: 1% soluble starch, 1% yeast extract, 0.2% ammonium nitrate, 0.06% magnesium sulfate, 0.2% calcium carbonate, initial pH 7.0 at 28$^{\circ}C$ for 96 h. The highest nonactin production was achieved in the production medium of initial pH7.0 at 28$^{\circ}C$ for 96h. The threshold level of dissolved oxygen was found to be above 33.2% at 28$^{\circ}C$ when 1% soluble starch was used as a carbon source. These results suggest that S. viridochromogenes JM-4151 might be a possible strain for industrial nonactin producer.
This study was carried out to test the recycling post-harvest medium from other mushroom bottle cultivation as a secondary medium of the oyster mushroom. In the post-harvest medium from winter mushroom and king oyster mushroom cultivation, oyster mushroom varieties in Chunchu-2ho and Manchuri fruit bodies yields compared with control group tend to be low. After recycling the post-harvest medium, it was replaced by basal medium up to 50%, of which the fruit bodies with stable yield increase from 10% to 30% were increased.
Journal of the Korean Society of Environmental Restoration Technology
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v.11
no.3
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pp.107-115
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2008
Herbs and plants widely used for the ecological restoration were selected for germination rate analysis under treatment of microorganisms to determine ideal treatment conditions and medium for enhanced germination rate. Albizzia julibrissin, when submerged in a nutrient medium or distilled water, presented a decrease in germination period rather than increase in germination rate. When treated with microorganism culture solution (JM-2) for 24 hours, 90% germination was achieved in two days, which is sufficient evidence to conclude that such treatment accelerates the germination of Albizzia julibrissin. Germination period decreased for Lespedeza cyrtobotrya samples submerged in microorganism solution for 15 and 48 hours, however, increases in germination rates were not observed. Sample treated in the solution for 24 hours had increased germination rate and enhanced germination period. Microorganism solution treatment had a negative effect on germination for Lespedeza cuneata, unlike Lespedeza cyrtobotrya and Albizzia julibrissin. Microorganism treated seeds of Lepsedeza cuneata had a lower germination rate than that of the control with no treatment. However, submerging treatments in a nutrient medium or distilled water for 24 to 48 hours were proven effective with higher germination rates than control sample with no treatment. Herbs and plants widely used for the ecological restoration were selected for germination rate analysis under treatment of microorganisms to determine ideal treatment conditions and medium for enhanced germination rate. Albizzia julibrissin, when submerged in a nutrient medium or distilled water, presented a decrease in germination period rather than increase in germination rate. When treated with microorganism culture solution (JM-2) for 24 hours, 90% germination was achieved in two days, which is sufficient evidence to conclude that such treatment accelerates the germination of Albizzia julibrissin. Germination period decreased for Lespedeza cyrtobotrya samples submerged in microorganism solution for 15 and 48 hours, however, increases in germination rates were not observed. Sample treated in the solution for 24 hours had increased germination rate and enhanced germination period. Microorganism solution treatment had a negative effect on germination for Lespedeza cuneata, unlike Lespedeza cyrtobotrya and Albizzia julibrissin. Microorganism treated seeds of Lepsedeza cuneata had a lower germination rate than that of the control with no treatment. However, submerging treatments in a nutrient medium or distilled water for 24 to 48 hours were proven effective with higher germination rates than control sample with no treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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