Proceedings of the Korean Society of Food Hygiene and Safety Conference
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2002.05a
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pp.215-215
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2002
Catalytic subunit of pyruvate dehydrogenase phosphatase (PDPc) has been suggested to have three major funational domains such as dihydrplipoamide adetyltransferase(E2)-binding domain, regulatory subunit of PDP(PDP)r-binding domain, and calcium-binding domain. In order to identify functional domains, recombinant catalytic subunit of pyruvate dehydrogenase phosphatase(rPDPc) was expressed in E. coli JM101 and purified to near homogeneity using the unique property of PDPc: PDPc binds to the inner lipoyl domain (L2) of E2 of ppyruvate dehydrogenase complex (PDC) in the presence of Ca+2, not under EGTA. PDPc was limited-proteolysed by typsin, chymotypsin, Arg-C, and elastase at pH 7.0 and 30C and N-terminal analysis of the fragments was done. Chymotrypsin, trypsin, and elastase made two major fragments: N-terminal large fragment, approx. 50kD and C-terminal small fragment, approx.10 kDa. Arg-C made three major fragments: N-terminal fragment, approx. 35kD, and central fragment, approx. 15 kD, and C-terminal fragment, approx. 10 kD. This study strongly suggest that PDPc consists of three major functional domains. However, further study should be necessary to identify the functional role.
In this study, the formation mechanism of discontinuities in the laser fusion zone of diamond saw blade was investigated. $CO_2$ laser weldings were conducted along the butt between Fe base sintered tip and carbon steel shank with sets of variable welding parameters. The effect of heat input on irregular humps, outer cavity, inner cavity and bond strengh was evaluated. The optimum heat input to have a proper humps was in the range of 10.4~$17.6kJm_{-1}$. With increasing heat input, both outer and inner cavities were reduced. The outer cavity was caused by insufficient refill of keyhole, while inner cavity was caused by trapping of bubble in molten metal. The bubble came from sintered tip and intensive vaporization at bottom tip of the keyhole. A gas formation and low melting point element vaporization were not occurred during welding. We could not find any relationship between bond strength and amount of discontinuities. Because the fracture were occurred in not only sintered tip but also carbon steel shank due to hardness distributions.
Pyruvate dehydrogenase phosphatase (PDP)와 kinase는 당대사시 해당과정에서의 대사 산물인 pyruvate를 acetyl CoA로 만들어 구연산 회로로 진입시켜 주는 효소인 pyruvate dehydrogenase complex (PDC)의 활성을 조절하는 중요한 효소이다. PDP의 catalytic subunit는 PDC의 dihydrolipoamide acetyltransferase (E2), PDP regulatory subunit (PDPr), 그리고 칼슘 결합 도메인 등으로 구성되어 있는 것으로 추측되어지고 있다. 본 연구에서는 그 구조와 기능과의 상관관계를 알아보기 위해 PDPc를 E. coli JM101에서 발현시켜 순수 정제 후 단백분해 효소를 이용한 제한적 가수분해 방법을 이용해 그 구조와 기능과의 상관관계에 대해 연구하고자 하였다 정제된 PDPc는 trypsin, chymotrypsin, Arg-C 그리고 elastase를 이용하여 3$0^{\circ}C$ 그리고 pH 7.0에서 제한적으로 분해시켰으며 각 분해산물의 아미노 말단의 아미노산 배열을 분석하였다. 그 결과 PDPc는 trypsin, chymotrypsin, elastase에 의해 N-terminal의 50 kD과 C-terminal의 10 kD의 두개의 분해산물을 만들었으며, Arg-C에 의해 50kD의 분해산물은 약 35kD와 15kD으로 더 가수분해가 되었다. 이러한 결과로 볼 때 PDPc는 앞에서 추측한데로 세개의 주요한 기능적 도메인으로 이루어져 있음을 알 수 있었다 또한 C-terminal의 10kD은 PDPc의 활성에는 영향을 주지 않는 것으로 밝혀졌으나 다른 도메인의 기능은 더 연구가 되어져야 할 것으로 생각된다.
In order to confirm the presence of putative glucoamylase gene in Tricholoma matsutake genome, the genomic DNA was prepared from T. matsutake NBRC30773 strain and was used as template to clone the glucoamylases gene (TmGlu1). We obtained the nucleotide sequence of TmGlu1 and its franking region. The coding region (from ATG to stop codon) is 2,186 bp. The locations of exons and introns were determined from the nucleotide sequences of 3'- and 5'-RACE PCR and RT-PCR products. On the other hand, to investigate the relationship between composition of medium and glucoamylase expression, we checked the expression level of glucoamylase gene by realtime reverse transcription PCR and measurement of glucoamylase enzyme activity. It was found that enzyme activity of glucoamylase was very low in different medium. Expression of glucoamylases gene appeared to not be affected by different carbon source.
Phylogenic relationships and morphological characteristics were classified and investigated among the 233 collected strains of Agaricus spp. The 38 strains were differently identified as different characteristic group using analysis of ITS regions in rDNA. A. bitorquis was showed close relationship in groupA whereas A. campestris was in groupC as different characteristic group among with A. bisporus. There was no phylogentic difference with strains collected by country and different pileus colored Agaricus bisporus. Also the strains were cultivated twice to investigate morphological characteristics of fruiting bodies. The characteristics and yield of collected strains were compared with molecular varieties and seasons by the cultivation. In this result, A. campestirs showed good yield and quality in terms of hardness off-white mushroom was more harder than other number of A. bisporus. Also earliness and color of pileus was influenced by external environment all conditions.
Oyster mushrooms including of P. ostreatus, P. eryngii, P. pulmonarius and P. cornucopiae are one of the famous mushrooms for foods in Korea. RAPD were carried out using 14 of oligoprimers to analyze the phylogenetic relationship among 57 strains of 32 Pleurotus species. Most of species formed the minimum clade with strains within species and was divided respectively species. Therefore clade was separated well in accordance species. Pleurotus species formed again clade to be added in close related to other species, and were discriminated by sixteen clades with each representative species including high similarity groups. Sixteen clades were composed representative species according to each clade. There were clade I of P. pulmonarius(P. sajor-caju, P. opuntiae, P. sapidus), clade II of P. eryngii(P. fuscus var. ferulae, P. fossulatus), clade III of P. ostreatus(P. ostreatus var. columbinus, P. spodoleucus, P. floridanus), clade IV of P. florida, clade V of P. djamor(P. flabellatus, P. incarnates, P. salmoneo-stramineus), clade VII of P. populinus(P. subareolatus), clade VIII of P. cystidiosus(P. cystidiosus var. formosensis), clade X of P. dryinus(P. dryinus var. pometi), clade XIV of P. cornucopiae(P. citrinopilieatus, P. euosmus), and clade XV of P. australis. These species were representative species each clades. Five species, P. ulmarius(clade VI), P. griseus(clade IX), P. calyptratus(clade XI), P. lampas(clade XII), P. smithii(clade XIII)and P. serotinus (clade XVI) were used each one strain in analysis, so they were clustered other groups.
Twenty Inter simple sequence repeat (ISSR) primers were used to assess genetic diversity of 64 Agaricus strains including 45 A. bisporus strains and other 19 Agaricus spp. ISSR primers, (GA)T, (AG)YC, (GA)C and (CTC) amplified PCR polymorphic bands between the Agaricus species or within A. bisporus strains. PCR polymorphic bands were inputted for UPGMA cluster analysis. The varieties, Saea, Saedo, Saejeong and Saeyeon that have recently been developed in Korea were involved in the same group with closely genetic relationship of coefficient similarity over 0.92, whereas, other Korean strains were genetically related to A. bisporus strains that were introduced from USA, Eroupe and Chinese. Furthermore, ISSR-PCR polymorphism could potentially be used to identify homokaryon isolates.
An auxin-producing bacterium, Klebsiella michiganensis Jopap-1, was isolated from a button mushroom bed in Buyeo-Gun, Chungcheongnam-Do. The strain Jopap-1 was classified as a novel strain of K. michiganensis based on a chemotaxonomic and phylogenetic analysis. The isolated K. michiganensis Jopap-1 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA), which is one of auxin hormones by TLC and HPLC analyses. The maximum concentration of IAA ($96.05mg\;L^{-1}$) was detected in the culture broth incubated in R2A medium containing 0.1% L-tryptophan for 48 h at $35^{\circ}C$ by HPLC quantity analysis. A negative relationship between IAA production and pH variation was estimated to show that the increase of IAA caused acidic pH in the culture. The effect of the supplement on L-tryptophan (precursor of IAA) production was observed to be highest at 0.1% concentration, but was significantly lowered above a concentration of 0.2%. To investigate the growth-promoting effects on the crops, the culture broth of E. michiganensis Jopap-1 was infected to water cultures and seed pots of mung bean and lettuce. Consequently, the adventitious root induction and root growth of mung bean and lettuce were observed to be 2.1 and 1.8 times higher than those of the control.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2002.07a
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pp.236-236
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2002
Pyruvate dehydrogenase phosphatase (PDP) is a mitochondrial protein serine/threonine phosphatase that catalyzes the dephosphorylation and concomitant reactivation of the pyruvate dehydrogenase componant of the pyruvate dehydrogenase complex (PDC). PDP consists of a Mg$\^$+2/ -dependent and Ca$\^$+2)-stimulated catalytic subunit (PDPc) of Mr 52,600 and a FAD-containing regulatory subunit (PDPr) of Mr 95.600. Catalytic subunit of pyruvate dehydrogenase phosphatase (PDPc) has been suggested to have three major functional domains such as dihydrolipoamide acetyltransferase(E$_2$)-binding domain, regulatory subunit of PDP(PDPr)-binding domain, and calcium-binding domain. In order to identify functional domains, recombinant catalytic subunit of pyruvate dehydrogenase phosphatase (rPDPc) was expressed in E. coli JM101 and purified to near homogeneity using the unique property of PDPc: PDPm binds to the inner lipoyl domain (L$_2$) of E$_2$ of pyruvate dehydrogenase complex (PDC) in the presence of Ca$\^$+2/, not under EGTA. PDPc was limited-proteolysed by trypsin, chymotrypsin, Arg-C, and elastase at pH7.0 and 30$^{\circ}C$ and N-terminal analysis of the fragment was done. Chymotrypsin, trypsin, and elastase made two major framents: N-terminal large fragment, approx. 50kD and C-terminal small fragment, approx. 0 kDa. Arg-C made three major fragments: N-terminal fragment, approx. 35 kD, and central fragment, approx. 15 kD, and C-terminal fragment, approx. 10 kD. This study strongly suggest that PDPc consists of three major functional domains. However, further study should be necessary to identify the functional role.
The purpose of this study is to deduce a successful business model of fintech and suggest the business model component in fintech on domestics. Business model has suggested on a strategic levels but it is to a value of corporation. From literature research, we find a conceptual character and its component of business model. The results show that we understand the business model of fintech. We suggest business model of component for a successful entry of market. These results suggest business model canvas by Alexander Osterwalder. This business model consist of 9 blocks - customer segmentation, value proposition, customer relationship, key resource, key activity, key partnership, revenue stream, and cost structure. These components need an analytic approach for a successful entry and settlement of market. Also, we analyze and suggest a fintech business model and directivity of its components.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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