The medicinal properties of Ganoderma lucidum have been recognized in China for many centuries. Active pharmaceutical components include triterpenes. To elucidate the molecular regulation of triterpene biosynthesis in this mushroom, a 57-base pair DNA fragment encoding the fourth conserved domain SQ-4 (SMGLFLQKTNIIRDYNEDL) of squalene synthase was synthesized and cloned into the expression vector pET-32a(+). The recombinant fusion protein induced by IPTG (isopropyl-$\beta$-D-thiogalactopyranoside) was overexpressed in the Escherichia coli. Using the purified recombinant fusion protein of 20.9 kDa, a specific polyclonal antibody was obtained from immunized rabbit. Expression of squalene synthase at different development stages of Ganoderma lucidum was analyzed.
Bong, Jin Jong;Kang, Yu Mi;Choi, Seung Jin;Kim, Dong-Kwon;Lee, Kyung Mi;Kim, Hee Sun
Journal of Radiation Protection and Research
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제38권4호
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pp.166-171
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2013
While high-dose ionizing radiation results in long term cellular cytotoxicity, chronic low-dose (<0.2 Gy) of X- or ${\gamma}$-ray irradiation can be beneficial to living organisms by inducing radiation hormesis, stimulating immune function, and adaptive responses. During chronic low-dose-rate radiation (LDR) exposure, whole body of mice is exposed to radiation, however, it remains unclear if LDR causes changes in gene expression of the whole brain. Therefore, we aim to investigate expressed genes (EGs) and signaling pathways specifically regulated by LDR-irradiation ($^{137}Cs$, a cumulative dose of 1.7 Gy for total 100 days) in the whole brain. Using microarray analysis of whole brain RNA extracts harvested from ICR and AKR/J mice after LDR-irradiation, we discovered that two mice strains displayed distinct gene regulation patterns upon LDR-irradiation. In ICR mice, genes involved in ion transport, transition metal ion transport, and developmental cell growth were turned on while, in AKR/J mice, genes involved in sensory perception, cognition, olfactory transduction, G-protein coupled receptor pathways, inflammatory response, proteolysis, and base excision repair were found to be affected by LDR. We validated LDR-sensitive EGs by qPCR and confirmed specific upregulation of S100a7a, Olfr624, and Gm4868 genes in AKR/J mice whole brain. Therefore, our data provide the first report of genetic changes regulated by LDR in the mouse whole brain, which may affect several aspects of brain function.
In this study, we investigated the effect of the extracts of Cyrtomium fortunei J.Sm. (CFJ) on lipopolysaccharide (LPS) induced inflammation in mouse BV-2 microglial cells. Nitric oxide (NO) production and cell viability were measured using the Griess reagent and the (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) (MTT) assay. Inflammatory cytokines were detected by quantitative polymerase chain reaction (qPCR) in BV-2 microglial cells with and without CFJ extracts. Subsequently, mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and antioxidant markers were assessed by western blot analysis. It was found that the CFJ extract significantly decreased the production of pro-inflammatory cytokines (interleukin [IL]-6, tumor necrosis factor [TNF]-α, and IL-1β) and NO in BV-2 microglial cells that were stimulated with LPS. In addition, the expression levels of the phosphorylation of the MAPK family (p38, c-Jun N-terminal kinases [JNK], and extracellular-signal regulated kinase [ERK]) were reduced by CFJ. Also, treatment with CFJ significantly increased the activities of superoxide dismutase type 1(SOD1) and Catalase in BV-2 microglial cells. Our results indicate that CFJ has a potent suppressive effect on the pro-inflammatory responses of activated BV-2 microglia. Therefore, CFJ has the potential to be an effective treatment for neurodegenerative diseases, as it can inhibit the production of inflammatory mediators in activated BV-2 microglial cells.
This paper is focused on fractal analysis of the surface cracking, a new tool for safety evaluation of corroded reinforced concrete (RC) beams. Comprehensive experimental investigations, including flexural tests, coupon tests on strength evaluation of corroded concrete and rusty rebar, and pullout tests to determine bond strength between concrete and rebar were carried out on nine Corroded Reinforced Concrete Beams (CRCB) exposed to an aggressive environment for more than 10 years. In combination with test results from a previous study on CRCBs fabricated in the laboratory from accelerated methods, it is found that, for both types of beams, the surface cracking distributions are fractal in character at loading and failure stages. Fractal dimension is calculated for all specimens at different corrosion states based on fractal analysis method. Relationships between the fractal dimension and mechanical properties of corroded concrete, rebar corrosion ratio, and ductility of CRCBs are discussed in detail. It is concluded that the fractal dimension can act as a damage index and can be efficiently used to describe the corrosion state of CRCBs.
Tu, Yunjie;Chen, K.W.;Zhang, S.J.;Tang, Q.P.;Gao, Y.S.;Yang, N.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권1호
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pp.1-6
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2006
This experiment first cloned some microsatellite sequences for goose species by magnetic beads enriched method and studied the genetic structure research of 14 indigenous grey goose breeds using 19 developed and 12 searched microsatellite markers with middle polymorphism. According to the allele frequencies of 31 microsatellite sites, mean heterozygosity (H), polymorphism information content (PIC) and $D_A$ genetic distances were calculated for 31-microsatellite sites. The results showed that 25 of 31microsatellite sites were middle polymorphic, so the 25 microsatellite markers were effective markers for analysis of genetic relationship among goose breeds. The mean heterozygosity was between 0.4985 and 0.6916. The highest was in the Xupu (0.6916), and in the Yan was the lowest (0.4985) which was consistent with that of PIC. The phylogenetic tree was completed through analysis of UPGMA. Fencheng Grey, Shoutou, Yangjiang and Magang were grouped firstly, then Xongguo Grey, Wugang Tong, Changle and Youjiang were the second group; Gang, Yan Xupu and Yili were the third group; Yongkang Grey and Wuzeng were the fourth group. The results could provide basic molecular data for the research on the characteristics of local breeds in the eastern China, and a scientific basis for the conservation and utilization of those breeds.
The corrosion behavior of a ferritic/martensitic steel T91 exposed to an aqueous solution containing chloride and sulfate ions is investigated depending on the stimulated all-volatile treatment (AVT) and under oxygenated treatment (OT) conditions. The corrosion of T91 steel under OT condition is severe, while the corrosion under AVT condition is not. The co-existence of chloride and sulfate ions has antagonistic effect on the corrosion of T91 steel in both AVT and OT conditions. Unlike to corrosion resistance in the aqueous solution, OT pretreatment provides T91 steel lower oxidation-resistance than VAT pretreatment. From scanning electron microscopy/energy dispersive X-ray spectroscopy (SEM/EDS) and X-ray diffraction (XRD) analysis, the lower corrosion resistance in the aqueous solution by VAT conditions possibly is due to the formation of pits. In addition, the lower oxidation resistance of T91 steel pretreated by OT conditions is explained as follows: the cracks formed during the immersion under OT conditions accelerated peeling-off rate of the oxide film.
The propagation of non-uniformly modulated, evolutionary random waves in viscoelastic, transversely isotropic, stratified materials is investigated. The theory is developed in the context of a multi-layered soil medium overlying bedrock, where the material properties of the bedrock are considered to be much stiffer than those of the soil and the power spectral density of the random excitation is assumed to be known at the bedrock. The governing differential equations are first derived in the frequency/wave-number domain so that the displacement response of the ground may be computed. The eigen-solution expansion method is then used to solve for the responses of the layers. This utilizes the precise integration method, in combination with the extended Wittrick-Williams algorithm, to obtain all the eigen-solutions of the ordinary differential equation. The recently developed pseudo-excitation method for structural random vibration is then used to determine the solution of the layered soil responses.
In order to obtain ultra-high resolution MRI images, research and development of 11 T or higher superconducting magnets have been actively conducted in the world, recently. The high-temperature superconductor (HTS), first discovered in 1986, was very limited in industrial application until mid-2010, despite its high critical current characteristics in the high magnetic field compared to the low-temperature superconductor. This is because HTS magnets were unable to operate stably due to the thermal damage when a quench occurred. With the introduction of no-insulation (NI) HTS magnet winding technology that does not burn electrically, it could be expected that the HTS magnets are dramatically reduced in weight, volume, and cost. In this paper, a 6 T-class NI HTS magnet for basic characteristic analysis was designed, and a distributed equivalent circuit model of the NI coils was configured to analyze the charging current characteristics caused by excitation current, and the charge delay phenomenon and loss were predicted through the development of a simulation model. Additionally, the critical current of the NI HTS magnets was estimated, considering the magnetic field, its angle and temperature with a given current. The loss due to charging delay characteristics was analyzed and the result was shown. It is meaningful to obtain detailed operation technology to secure a stable operation protocol for a 6T NI HTS magnet which is actually manufactured.
The analysis of the fluid flow characteristics in reactor pressure vessel is an important part of the hydraulic design of nuclear power plant, which is related to the structure design of reactor internals, the flow distribution at core inlet and the safety of nuclear power plant. The flow distribution and mixing characteristics in the pressurized reactor vessel for the 1000MWe advanced pressurized water reactor is analyzed by using Computational Fluid Dynamics (CFD) method in this study. The geometry model of the full-scaled reactor vessel is built, which includes the cold and hot legs, downcomer, lower plenum, core, upper plenum, top plenum, and is verified with some parameters in DCD. Under normal condition, it is found that the flow skirt, core plate holes and outlet pipe cause pressure loss. The maximum and minimum flow coefficient is 1.028 and 0.961 respectively, and the standard deviation is 0.019. Compared with other reactor type, it shows relatively uniform of the flow distribution at the core inlet. The coolant mixing coefficient is investigated with adding additional variables, showing that mass transfer of coolant occurs near the interface. The coolant mainly distributes in the 90° area of the corresponding core inlet, and mixes at the interface with the coolant from the adjacent cold leg. 0.1% of corresponding coolant is still distributed at the inlet of the outer-ring components, indicating wide range of mixing coefficient distribution.
Background: Panax notoginseng leaves (PNL) exhibit extensive activities, but few analytical methods have been established to exclusively determine the dammarane triterpene saponins in PNL. Methods: Ultra-performance liquid chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry (UPLC/Q-TOF MS) and HPLC-UV methods were developed for the qualitative and quantitative analysis of ginsenosides in PNL, respectively. Results: Extraction conditions, including solvents and extraction methods, were optimized, which showed that ginsenosides Rc and Rb3, the main components of PNL, are transformed to notoginsenosides Fe and Fd, respectively, in the presence of water, by removing a glucose residue from position C-3 via possible enzymatic hydrolysis. A total of 57 saponins were identified in the methanolic extract of PNL by UPLC/Q-TOF MS. Among them, 19 components were unambiguously characterized by their reference substances. Additionally, seven saponins of PNL-ginsenosides Rb1, Rc, Rb2, and Rb3, and notoginsenosides Fc, Fe, and Fd-were quantified using the HPLC-UV method after extraction with methanol. The separation of analytes, particularly the separation of notoginsenoside Fc and ginsenoside Rc, was achieved on a Zorbax ODS C8 column at a temperature of $35^{\circ}C$. This developed HPLC-UV method provides an adequate linearity ($r^2$ > 0.999), repeatability (relative standard deviation, RSD < 2.98%), and inter- and intraday variations (RSD < 4.40%) with recovery (98.7-106.1%) of seven saponins concerned. This validated method was also conducted to determine seven components in 10 batches of PNL. Conclusion: These findings are beneficial to the quality control of PNL and its relevant products.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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