• 제목/요약/키워드: Iysozyme

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다중 이온교환크로마토그래피를 이용한 계란난백에서 리소짐의 분리 (Purification of Lysozyme from Egg White by Multicycle Ion Exchange Chromatography)

  • 허윤석;김형원;김인호
    • KSBB Journal
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    • 제18권2호
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    • pp.122-126
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    • 2003
  • 본 연구에서는 다중 이온교환크로마토그래피로 리소짐을 분리하는 공정개발을 위해 Cellufine CM C-200과 Bio-rex 70 겔을 이용하여 비교 실험하였다. 난백에서 Iysozyme의 분리, 정제 및 수지의 활용성을 확인하는 실험이었다. 실험결과 Cellufine겔은 5 주기가 지나면서부터 용출분획에서 낮은 농도의 단백질이 용출됨을 확인하였다. 이는 주기가 진행될 수록 겔의 흡착능력이 약화됨을 보여주는 것이다. 또한 주기가 진행될수록 각 주기의 크로마토그램을 분석한 결과, 단백질이 겔의 작용기와 효과적으로 흡·탈착 작용을 하고 있지 못하기 때문에 용출영역의 peak가 계속해서 낮아지는 경향을 보였다. 그러나 Bio-rex 70겔은 6 주기를 수행 후에도 겔의 흡착능력이 상실되지 않고 단백질과 효과적으로 결합함을 용출영역의 크로마토그램과 전기영동에서 확인하였다. Bio-rex 겔은 Cellufine겔보다 단백질과 작용기와의 결합력이 우수하였으나 순수한 Iysozyme의 정제에 있어서 적당하지 못함을 알 수 있었다. Iysozyme의 용출 이온강도가 다른 단백질들보다 더 강하기 때문에 용출용액의 소금 농도구배를 실행함으로써 단백질을 용출한다면 순수한 IysoByme을 정제할 수 있다고 생각된다. 따라서 본 실험결과 다중 이온교환크로마토그래피 공정에 효과적인 겔은 Bio-rex 70겔임을 알 수 있었다.

증기확산법에 의한 단백질 결정화에 미치는 Reservicr 용액의 영향 (The Effects of Solvents in Reservior Solution on Protein Crystallization Using Vapor Diffusion method)

  • 이정희;정용제
    • 한국결정학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.33-38
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    • 1994
  • Hen egg white Iysozyme과 equine serum albumin을 모델 단백질로 하여 'heterogeneous' vapor diffusion실험을 수행하였다. 즉, droplet과 reseroir용액에 각각 다른 침전제를 사용하여 vapor diffusion에 의하여 평형에 이르도록 하였다. 실험 결과는 NSI 혹은 ammonium sulfate 대신 polyethylene glycol이 reservoir 용액에 포함되므로써 droplet과 reservoir 용액 사이의 평형 속도가 감소되는 것을 보여 주었다. Heterogeneous vapor diffusion 법을 통하여 reservoir용액에 포함된 이온성 염과 비이온성 침전제의 양을 적절히 조절하여 평형속도를 조절할 수 있음을 보였다.

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Membrane-crystallization of Iysozyme

  • Efrem Curcio;Profio, Gianluca-Di;Enrico Drioli
    • 한국막학회:학술대회논문집
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    • 한국막학회 2003년도 The 4th Korea-Italy Workshop
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    • pp.73-76
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    • 2003
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호알칼리성 Bacillus속 B-17의 형질전환조건 (Conditions for Transformation of Alkalophilic Bacillus sp. K-17)

  • 성낙계;정운상;고학룡;정정희
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권3호
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    • pp.213-218
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    • 1989
  • Cloning을 위한 host와 vector의 이용 가능성을 타진하기 위해 호알칼리성 Bacillus속 K-17을 host로, pUB110과 pBD64를 vector로 사용하여 Bacillus속 K-17의 protoplast 형질전환조건을 검토하였다. 원형질체의 형성은 200$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 Iysozyme 을 처리하였으며, 원형질체 형성의 최적 온도, PH및 배양시간은 각각 4$0^{\circ}C$, 7.0 및 4시간으로 나타났다. 원형질체는 DM3 재생배지에서 재생시켰으며 0.8% agar, 0.5M sodium succinate 농도에서 가장재생이 좋았다. 형질전환시 PEG의 농도는 40%(w/v) PEG 6,000 30%(v/v)가 최적으로 나타났다. 형질전환체의 특성을 조사한 결과, plasmid 안정성은 pUB110이 pBD64보다 더 안정하였으며, 최대 효소활성은 비슷하였지만 효소 분비시간은 pUB110 은 2.5일, pBD64의 경우는 3일로 Bacillus속 K-17의 2일에 비해 약간 지연되었다.

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Lactobacillus spp.로부터 RNA 추출을 위한 신속/간단한 방법 (Simple/Rapid Method for RNA Preparation from Lactobacillus spp.)

  • 소재성;오은택;최민지;윤현식
    • KSBB Journal
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    • 제17권3호
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    • pp.311-313
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    • 2002
  • L. crispatus KLB46는 Gram-positive bacteria로써 인간의 건강에 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 glass bead를 이용하여 세포벽을 파괴하고 hot phenol RNA 분리방법을 이용하여 RNA를 성공적으로 분리하였다. 또한 Iysozyme과 proteinase K 처리과정을 배제하여 시간적, 경제적인 면에서 유용한 방법임을 확인할 수 있었다. Gram-positive bacteria에서 glass bead를 이용한 RNA 분리는 특수한 조건에 의해 전사 되거나 반감기가 찬은 mRNA의 연구에 유용한 방법이라 사료된다.

Thermal denaturation analysis of protein

  • Miyazawa, Mitsuhiro
    • 한국근적외분광분석학회:학술대회논문집
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    • 한국근적외분광분석학회 2001년도 NIR-2001
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    • pp.1628-1628
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    • 2001
  • Near infrared (NIR) spectroscopy is a powerful technique for non-destructive analysis that can be obtained in a wide range of environments. Recently, NIR measurements have been utilized as probe for quantitative analysis in agricultural, industrial, and medical sciences. In addition, it is also possible to make practical application on NIR for molecular structural analysis. In this work, Fourier transform near infrared (FT-NIR) measurements were carried out to utilize extensively in the relative amounts of different secondary structures were employed, such as Iysozyme, concanavalin A, silk fibroin and so on. Several broad NIR bands due to the protein absorption were observed between 4000 and $5000\;^{-1}$. In order to obtain more structural information from these featureless bands, second derivative and Fourier-self-deconvolution procedures were performed. Significant band separation was observed near the feature at $4610\;^{-1}$ ,. Particularly the peak intensity at $4525\;^{-1}$ shows a characteristic change with thermal denaturation of fibroin. The structural information can be also obtained by mid-IR and CD spectral. Correlation of NIR spectra with protein structure is discussed.

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Methamphetamine이 면역장기 및 항체생성 능에 미치는 영향 (The Effect of Methamphetamine on the Immune Organs and the Antibody Production)

  • 윤은이;신전수;박현애;김미영;선우연;한형미
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제2권1호
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    • pp.54-58
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    • 1994
  • BALB/C mice were intraperitoneally injected with methamphetamine (5 mg/kg) to observe the effect of methamphetamine on the immune system. Body weights were decreased in both acutely treated group (twice for 2 weeks with 7 days interval) and subchronically treated group (daily injection for 14 days). The relative spleen weights and the numbers of splenocytes were unexpectedly increased (p<0.05) in acutely treated group, but subchronically treated group showed the trend of decrease without significance. But there was no significant effect on antibody formation to hen egg Iysozyme which was immunized during the treatment of methamphetamine and on plaque forming cell number. The relative thymus weights of both groups were significantly decreased by the treatment of methamphetamine (acutely treated group, p<0.05; subchronically treated group, p<0.01). These results suggest that the effect of methamphetamine on the immune system may be caused by thymic dysfunction.

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Effects of stress on scuticociliate killing activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) plasma in relation to humoral immunity

  • Kwon, Se-Ryun;Kim, Chun-Soo;Kim, Ki-Hong
    • 한국어병학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.77-82
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    • 2002
  • Effects of stress-induced suppression of humoral immunity on scuticociliate killing activity of olive flounder plasma were investigated. Changes in glucose level. alternative complement activity and Iysozyme activity of plasma by handling stress were analysed in relation to in vitri parasiticidal activity of plasma. The plasma glucose level was about two times higher in fish after a handling stress than in control fish. Plasma lysozyme activity and natural haemolytic activity were decreased in suessed fish.The scuticociliate killing activity of plasma was significantly lower in stressed fish than in non-stressed control fish. The present results indicated that stress-induced immunodepression could be a cause of scuticociliatosis occurrence in olive flounder.